Комбинаторного синтеза и высокая пропускная способность белка Освобождение от полимерной пленки и наночастицы библиотеки

Summary

Этот метод описывает комбинаторного синтеза биологически фильм полиангидрид и наночастиц библиотек и высокую пропускную способность обнаружения белка освобождение от этих библиотек.

Abstract

Полиангидриды представляют собой класс биоматериалов с превосходной биосовместимостью и возможности доставки лекарств. В то время как они были изучены с обычными один образец-на-времени методы синтеза, более поздняя высокой пропускной подход был разработан позволяя синтеза и испытаний крупных библиотек полиангидриды ^1. Это будет способствовать более эффективной оптимизации и процесс проектирования этих биоматериалов для применения лекарств и вакцин доставки. Метод В этой работе описывается комбинаторного синтеза биологически фильм полиангидрид и наночастиц библиотек и высокой пропускной способностью обнаружения белка освобождение от этих библиотек. В этой управлением робота методом (рис. 1), линейные приводы и шприцевые насосы находятся под контролем LabVIEW, которая позволяет громкой автоматизированный протокол, устраняя ошибки пользователя. Кроме того, этот метод позволяет быстро изготовления микро-масштабе библиотеки полимера, красныйucing размер пакета в то время как в результате создания многовариантной системы полимер. Это комбинаторный подход к синтезу полимеров способствует синтезу до 15 различных полимеров в эквивалентное количество времени, которое потребуется для синтеза одного полимера условно. Кроме того, библиотека комбинаторного полимеров могут быть изготовлены в пустой или белка загруженных геометрии в том числе фильмов или наночастиц при растворении в библиотеке полимера в растворителе и осадки в не-растворитель (наночастиц) или вакуумной сушки (для пленок). При загрузке флуорохромом сопряженных белка в библиотеках полимеров, кинетики белка выпуска может быть оценена на высокой пропускной способности, используя флуоресценции на основе метода обнаружения (рис. 2 и 3), как описано ранее ^1. Это комбинаторное платформа была подтверждена с помощью традиционных методов ² и фильм полиангидрид и наночастиц библиотеки были характеризуются токсичность лабораторных клеточных, продукция цитокинов, поверхностных маркеров выражения, адгезию, пролиферацию и дифференцировку, а также в естественных условиях биораспределения и мукоадгезия ^1-11. Комбинаторный метод, разработанный здесь обеспечивает высокую пропускную способность синтеза полимеров и производства белково-загруженных наночастиц и кино библиотек, которые, в свою очередь, будет показан в пробирке и в естественных для оптимизации производительности биоматериала.

Protocol

1. Комбинаторные библиотеки Синтез полимерных (Изменение в химии полимеров) - см. Рисунок 1 Роботизированная установка

1. Растворите каждого мономера в соответствующем растворителе (= концентрация 25 мг / мл) и загружать каждую в 10cc газонепроницаемого шприца.
2. Прикрепить растворителям приманки замок капилляров в конце каждого шприца.
3. Положите шприц на шприц насосов (New Era Программируемый насос шприца) и зафиксируйте в этом положении.
4. Установить линейные приводы (Zaber) в исходное положение.
5. Использование зажима кольца стенда, поместить конец обоих капилляров в стартовый флакон / а для мономера осажде....

Discussion

Знания необходимые условия синтеза и температуры стеклования (T _г ы) полимеров синтезируется имеют важное значение для библиотеки изготовления. Если T _{^ S} ниже комнатной температуры, шаг наночастиц изготовление, возможно, придется проводить в контролируемых условиях температуры ниже _Т с полимеров. Кроме того, следует проявлять осторожность, чтобы убедиться, что все оборудование, которое вступает в контакт с высокими температурами и растворители должны быть пригодными для обработки этих у.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Имя	Компания	Номер в каталоге
Моторизованный XYZ этап: 3x T-LSM050A, 50 мм хода на ось	Zaber технологий	T-XYZ-LSM050A-KT04
NE-1000 один насос шприца	Новые насосные системы Эпоха	NE-1000
Pyrex * Vista * Rimless многоразовые стеклянные трубки культуры	Гранулирование	07-250-125
Стеклянные кюветы	Научно Стратегии	G102
LabVIEW	National Instruments	776671-35
SGE газонепроницаемого шприца, Луер Лок	Sigma Aldrich	509507
U96 Deepwell пластины 1,3 мл и 2,0 мл	Thermo Scientific: Nunc	278743
Ну коврики крышкой	Thermo Scientific: Nunc	276000
Тайфун 9400	GE Healthcare	63-0055-79
Ватман класс 50 кругов 90 мм	Ватман	1450-090