Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

2-окклюзии сосудов / Гипотония: крысиной модели глобальной ишемии мозга

19.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/50173

⸱

22 июня 2013 г.

 , 

В этой статье

Краткое содержание

Двусторонние окклюзии сонной сочетании с системной гипотензии производит глобальной ишемии мозга у крыс приводит к повреждению гиппокампа с воспроизводимыми тяжести. Животное субъектов обесценились с предсказуемый характер повреждения головного мозга, они выздоравливают целесообразно, и смертность сравнительно низки.

Аннотация

Остановка сердца последующей реанимации часто приводит к резкому повреждение головного мозга, вызванных ишемией и последующей реперфузии головного мозга. Глобальной ишемии мозга производит повреждение определенных областях мозга показано, что весьма чувствительными к ишемии 1. Нейронов гиппокампа имеют более высокую чувствительность к ишемического инсульта по сравнению с другими популяции клеток, и, в частности, области СА1 гиппокампа особенно подвержена ишемии / реперфузии 2.

Конструкция терапевтическое вмешательство или изучение механизмов, участвующих в повреждения головного мозга, требуется модель, которая производит повреждение похожа на клиническое состояние и воспроизводимым образом. Двусторонние окклюзии сонной судно с гипотонией (2VOH) представляет собой модель, которая формирует обратимой ишемии переднего мозга, подражая головного события, которые могут произойти во время остановки сердца и реанимации. Мы описали модель редактировался Смит и др.. (1984) 2, А впервые представлена ​​в его нынешнем виде в Sanderson и соавт. (2008) 3, который производит воспроизводимых травмы выборочно уязвимых регионах мозга 3-6. Надежность этой модели продиктован точным контролем системного артериального давления при гипотонии применяются, длительность ишемии, тщательный контроль температуры, специальную схему анестезии, и прилежные послеоперационного ухода. 8 минут ишемического инсульта производит гибель клеток СА1 нейронов гиппокампа, который прогрессирует в течение от 6 до 24 часов реперфузии, в то время как менее уязвима областей мозга избавлены. Эта прогрессивная гибели клеток легко количественно 7-14 дней после реперфузии, как почти полная потеря нейронов CA1 очевидно, в это время.

В дополнение к этой модели мозговой травмы, мы представляем метод для количественного CA1 повреждения с помощью простой, но тщательно, методология. Важно отметить, что количественное может быть достигнуто с помощью простого монтажа камеры микроскопа,Да Фри ImageJ (NIH) программного обеспечения плагин, что исключает необходимость в непомерно программ стереологии программного обеспечения и моторизованных микроскопические стадии оценки ущерба.

Введение

Повреждения головного мозга, как следствие, остановки сердца и инсульт является одной из ведущих причин смерти и длительной инвалидности. В то время сердечно-легочной реанимации для жертв остановки сердца успеха в деле восстановления спонтанного кровообращения примерно в 70 000 пациентов в год в США 7,8 по меньшей мере 60% этих больных впоследствии умирают в больнице в результате обширного повреждения головного мозга, и только 3-10% из реанимации пациенты могут возобновить свои бывшие 9,10 образа жизни. Очевидно, что понимание механизмов, которые приводят к повреждению мозга после глобальной ишемии мозга и проектирования терапевтического вмешате....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка

Все эксперименты на животных должны соответствовать ведомственным руководящим принципам и получить одобрение соответствующего Комитета ухода за животными до начала. Все процедуры, представленные здесь, были одобрены Wayne State University Институциональные уходу и использованию животных комитета и следовать указаниям на этичное обращение с животными, как выдвинул в Руководство по уходу и использованию лабораторных животных, а также правительству США принципов Использование и уход за позвоночных животных, используемых в Испытания, исследования и обучение. Перед началом операции, подготовить необходимые материалы и хирургические....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

2VOH Модель общей ишемии мозга / реперфузионного вызывает гибель нейронов в области СА1 гиппокампа. Рисунок 2 представляет травма производства 8 мин глобальной ишемии мозга, обработанных 14 дней после реперфузии. Фиг.2А и 2В сравнить гиппокампа от фиктивных и постишемического мозги, окрашивали Cresyl фиолетового. рисунке 2а гиппокампа от ложнооперированных крыса, которая показывает нормальную морфологию, в том числе нетронутыми CA1. рис. 2В

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Эта модель описана здесь производит ишемического инсульта головного мозга, которые могут возникнуть в результате остановки сердца и реанимации, обеспечивая травмы подобный тем, которые имеются у людей. Этот способ получения глобальной ишемии мозга является одним из множества протоколов. Мы используем этот протокол очередь для его сравнительно низкой смертности, быстрое восстановление, и воспроизводимость результатов. Остановки сердца / реанимации модели, возможно, самый клинически значимой модели, однако технически самы.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют никаких финансовых конфликтов интересов.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Material Name
5-0 VICRYL шовная ткань, обратная резка EthiconJ391H
Scalpel, No.10Swann-Morton6601
Марлевые губкиFisher22-362-178
18G x 1 ½ в иглеBD305201
23G x 1 в иглеBD305145
26 г x 3/8 в иглеBD305110
18 Г x 1 ¼ катетерEXEL26735
1 мл шприцBD309659
10 мл шприцBD309604
60 мл шприцBD309653
SurgilubeHenry Schein1152666,9
% физиологический раствор, пластик IV мешокHenry Schein1537468
шовный материал 3-0 ШелкHenry Schein1007842
Puralube Офтальмологическая мазьHenry Schein3390017
BetadineHenry Schein6903564
Стерильное полотенце ДрапировкаMoore Medical14170
Полиэтиленовая трубка, 50Intramedic427411
Stopcock, 3 waySmiths medicalMX9311L
Drug Name
AERRANE (изофлуран)Henry Schein2091966
Mapap Liquid (Tylenol)Major Pharmaceuticals1556
Kedavet (кетамин)Ketathesia ButneyNDC 50989-996-06
Butorphic (буторфанол)Lloyd Labs4881
HeparinAPP Pharmaceuticals504011
Chemical Name
Paraformaldehyde prillsElecron Microscopy Sci.19202
2-метилбутансигма270342
кресилфиолетовый ацетатсигмаC5042
сахарозасигмаS9378
Software
ImageJNIH

Ссылки

  1. Kirino, T., Sano, K. Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia. Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).
  2. Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. The density and distribution of....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Окклюзия сонной артерииканюляция бедренной артериисистемная гипотензиянейроны поля CA1 гиппокампаколичественная оценка повреждения нейроновImageJ Cell Counterгемодинамический мониторингпоствоспалительная реперфузия