Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель свиньи ex vivo для гидродинамического тестирования экспериментальных процедур аортального клапана и новых медицинских устройств

1.9K просмотров

DOI:

10.3791/65885

25 августа 2023 г.

В этой статье

Краткое содержание

Представлен способ монтажа аортального клапана свиньи на дубликаторе импульсов для проверки его гидродинамических свойств. Этот метод может быть использован для определения изменения гидродинамики после применения экспериментальной процедуры или нового медицинского устройства перед использованием на модели крупного животного.

Аннотация

Возможности тестирования новых кардиологических процедур и исследовательских медицинских устройств перед использованием на животной модели ограничены. В данной работе представлен способ монтажа аортального клапана свиньи в дубликаторе импульсов для оценки его гидродинамических свойств. Эти свойства могут быть оценены до и после проведения исследуемой процедуры и/или применения медицинского прибора для исследования. Фиксация входящего сегмента представляет некоторые трудности из-за отсутствия окружного миокарда в выходном тракте левого желудочка. Этот метод решает эту проблему путем закрепления сегмента притока с помощью передней створки митрального клапана, а затем сшивания свободной стенки левого желудочка вокруг приспособления для притока. Сегмент оттока фиксируется путем введения приспособления в разрез в верхней части дуги аорты. Установлено, что образцы имеют достоверно разные гидродинамические свойства до и после фиксации тканей. Это открытие побудило нас использовать свежие образцы в наших испытаниях, и его следует учитывать при использовании этого метода. В нашей работе мы использовали этот метод для тестирования новых внутрисердечных пластырей для использования в клапанном положении путем выполнения процедуры неокуспидизации аортального клапана (процедура Одзаки) на смонтированных аортальных клапанах свиньи. Эти клапаны были протестированы до и после процедуры для оценки изменения гидродинамических свойств по сравнению с нативным клапаном. В данной работе мы представляем платформу для гидродинамического тестирования экспериментальных процедур на аортальном клапане, которая позволяет сравнивать их с нативным клапаном, а также между различными устройствами и методами, используемыми для исследуемой процедуры.

Введение

Заболевание аортального клапана представляет собой серьезное бремя для общественного здравоохранения, особенно аортальный стеноз, от которого страдают 9 миллионовчеловек во всем мире1. Стратегии борьбы с этим заболеванием в настоящее время развиваются и включают восстановление аортального клапана и замену аортального клапана. Особенно в педиатрической популяции существует значительный стимул к ремонту, а не замене клапана, поскольку доступные в настоящее время протезы склонны к структурной дегенерации клапана (SVD) и не устойчивы к росту, требуя повторной операции для повторной замены по мере роста пациента. Даже процедура Росса, при которой больной аортальный клапан (АВ) заменяется нативным легочным клапаном (ЛВ), требует протеза или трансплантата в легочном положении, который также подвержен СВД и часто ограниченной толерантности к росту. В настоящее время разрабатываются новые подходы к лечению заболеваний аортального клапана, и существует необходимость в тестировании в биологически значимом контексте перед применением на крупной животной модели.

Мы разработали метод тестирования AV у свиней, который может дать представление о функционировании клапана до и после исследовательской процедуры или применения нового медицинского устройства. Установив AV свиней на коммерчески доступный импульсный дубликатор, мы можем сравнить гидродинамические характеристики, которые обычно используются при исследовании и, в конечном итоге, утверждении протезов клапанов, включая фракцию регургитации (RF), эффективную площадь отверстия (EOA) и среднюю положительную перепад давления (PPD)3,4. Вмешательство может быть точно настроено в биологически значимом контексте перед использованием на модели крупного животного, тем самым ограничивая количество животных, необходимых для производства процедуры или протеза, который может быть использован на людях. Сердца, использованные для этого эксперимента, могут быть получены с местной скотобойни или из отходов тканей других экспериментов, поэтому нет необходимости приносить в жертву животное исключительно для целей этого эксперимента.

В своей работе мы использовали этот метод для разработки нового заплаточного материала для ремонта и замены клапанов. Мы проверили гидродинамическую функцию различных пластырей, выполнив процедуру неокуспидизации аортального клапана (процедура Озаки 5,6,7) на AV свиней и протестировав их в дубликаторе импульсов до и после процедуры. Это позволило нам точно настроить материал на основе его гидродинамических характеристик. Таким образом, этот метод обеспечивает платформу для гидродинамического тестирования экспериментальных процедур и новых медицинских устройств для использования на AV перед применением на модели крупного животного.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все исследования проводились в соответствии с институциональными рекомендациями по уходу за животными.

1. Соображения и подготовка к эксперименту

  1. Используйте подходящий дубликатор импульсов (PD) для моделирования сердечного выброса через AV. ДР должны быть в состоянии вместить биологические материалы и быть очищенными.
    1. Используйте настройки PD, подходящие для тестирования AV: объем смещения 70 мл и 70 ударов в минуту (сердечный выброс 5 л/мин), 35% сердечного цикла в систоле, средний градиент трансклапанного давления 100 мм рт.ст., максимальный градиент давления 120 и минимальный градиент давления 80.
    2. В качестве жидкой среды используйте физиологический раствор комнатной температуры (0,9% NaCl).
  2. Найдите или создайте (с помощью 3D-печати или аналогичного метода) подходящие приспособления для установки AV свиньи для тестирования на PD.
    1. Используйте приспособления, смоделированные на основе приспособлений, поставляемых с дубликатором импульсов, со следующими характеристиками: убедитесь, что внутренний диаметр приспособления аналогичен диаметру исследуемого AV, длина крепления составляет не менее 2 см, а полезная ширина крепления составляет не менее 4 см (Рисунок 1).
    2. Используйте резиновые уплотнительные кольца в качестве прокладок на концах приспособлений.
  3. Получите образец сердца после кардиоэктомии (Рисунок 2A).
    1. Используйте образцы свиных сердец со скотобойни или отходы тканей животных, которые в остальном здоровы и не были частью каких-либо экспериментальных протоколов, влияющих на их сердце.
    2. Получение образца после кардиэктомии или посмертной кардиэктомии, включая рассечение верхней полой вены, нижней полой вены, главной легочной артерии (ПА), всех легочных вен и аорты в дистальной части дуги аорты.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Для этого эксперимента следует использовать свежие образцы, хранящиеся менее чем через 6 ч после вскрытия или хранящиеся в стерильном физиологическом растворе с 1% раствором антибиотика (пенициллина и стрептомицина) в холодильнике 4 °C до 7 дней. Ткани, зафиксированные формалином или глутаровым альдегидом, будут давать измененные гидродинамические результаты из-за повышенной жесткости.

figure-protocol-1
Рисунок 1: Изготовленные на 3D-принтере приспособления для монтажа аортальных клапанов свиней на дубликаторе импульсов. Как отмечено в протоколе, длина крепления должна быть не менее 2 см, а полезная ширина крепления должна быть не менее 4 см. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

2. Резекция правосторонних конструкций

  1. Рассеките ПА от аорты ножницами Метценбаума до тех пор, пока не станет видна ткань желудочка (рис. 2B).
  2. Рассекают и перевязывают шелковыми завязками обе коронарные артерии в месте их начала от пазух аорты, стараясь не сужать пазухи.
  3. Пересекают коронарные артерии дистальнее шелковых связей.
  4. Сделайте разрез правого желудочка (ПЖ) между аортой и ПА у основания клапана легочной артерии ножницами Метценбаума (рис. 2C).
  5. Начиная спереди, продолжайте разрез по окружности вдоль межжелудочковой перегородки, чтобы удалить свободную стенку ПЖ (рис. 2D, E).
  6. Продолжайте разрез кзади через кольцо трехстворчатого клапана вдоль межпредсердной перегородки, чтобы удалить всю ткань правого предсердия (Рисунок 2F).

figure-protocol-2
Рисунок 2: Образец для кардиэктомии и резекции правосторонних структур. (А) Образец для кардиоэктомии. (B) Магистральная легочная артерия рассечена от аорты до тех пор, пока не будет видна ткань желудочков. (C) Разрез правого желудочка (ПЖ) у основания клапана легочной артерии. (D) Продолжение разреза вдоль межжелудочковой перегородки спереди. (E) Удаление стенки, свободной от ПЖ, путем продолжения разреза по окружности вдоль межжелудочковой перегородки. (F) Образец с удаленной правосторонней структурой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

3. Подготовка выходного тракта левого желудочка (ЛВОТ) к канюляции фиксатором ПД

  1. Разрез левого предсердия (ЛП) через устье правой легочной вены параллельно аорте ножницами Метценбаума (рис. 3А).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Несмотря на ограниченную вариабельность, анатомия легочной вены свиньи обычно заканчивается двумя устьями легочной вены, входящими в LA8.
  2. Продолжайте разрез по направлению к переднебоковой спайке митрального клапана (МВ), оставляя на стороне аорты манжету размером не менее 3 мм ткани предсердий.
  3. Обрежьте лишнюю ткань LA, сохраняя 3-миллиметровую манжету ткани предсердий на аорте и кольцо MV по окружности (рис. 3B).
  4. Расширьте разрез на левый желудочек (ЛЖ) через переднебоковую спайку МВ, стараясь сохранить переднебоковую сосочковую мышцу (рис. 3C).
  5. Отделяют сухожильные хорды от переднелатеральной папиллярной мышцы до заднего створка МВ, сохраняя прикрепления к передней створке МВ.
  6. Продолжайте разрез до верхушки сердца.
  7. Обрежьте лишнюю ткань ЛЖ ниже папиллярных мышц, сохранив обе сосочковые мышцы (рис. 3D).

figure-protocol-3
Рисунок 3: Подготовка выходного тракта левого желудочка к канюляции с помощью дубликатора импульсов. (А) Разрез левого предсердия (ЛП) через устье правой легочной вены. (B) Обрезка избыточной ткани LA, сохранение манжеты предсердной ткани на аорте толщиной не менее 3 мм и поддержание кольца митрального клапана по окружности. (В) Расширение разреза на левый желудочек (ЛЖ) через переднебоковую спайку митрального клапана. (D) Удаление избыточной ткани ЛЖ ниже папиллярных мышц. Ножницы видны в правом верхнем углу изображения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

4. Подготовка аорты к канюляции с помощью фиксатора ПД

  1. Удалите лишнюю ткань лимфатической, соединительной или легочной артерии с аорты (рис. 4A).
  2. Разрез верхней части дуги аорты от нисходящей аорты до левой подключичной артерии ножницами Метценбаума (рис. 4Б).
  3. Продолжайте разрез на верхней стороне дуги аорты от левой подключичной артерии до брахиоцефального ствола (рис. 4C, D).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Ветви дуги аорты свиньи от дистального к проксимальному включают левую подключичную артерию и брахиоцефальный ствол, который дает начало правой подключичной артерии, правой сонной артерии и левой сонной артерии9.

figure-protocol-4
Рисунок 4: Подготовка аорты к канюляции с помощью дубликатора импульсов. (А) Дуга аорты с удалением лишней ткани. Обратите внимание на два дугообразных сосуда в дуге аорты свиньи, брахиоцефальный ствол и левую подключичную артерию. (Б) Начало разреза по верхней части дуги аорты от нисходящей аорты до левой подключичной артерии. (C) Продолжение разреза вдоль верхней стороны дуги аорты от левой подключичной артерии до брахиоцефального ствола. (D) Завершенный разрез дуги аорты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

5. Канюляция ЛВОТ с приспособлением ПД

  1. Проверьте положение приспособления в LVOT и обрежьте лишнюю ткань ЛЖ.
    1. Вставьте приспособление в ЛВОТ под переднюю створку МВ.
    2. Оберните стену без LV вокруг прибора.
    3. Обрежьте лишнюю ткань LV, чтобы плотно обернуть приспособление.
    4. Удаляют половину толщины свободной стенки ЛЖ, начиная с межжелудочковой перегородки, сохраняя не менее 1 см эпикарда у свободного края для сохранения целостности линии шва (рис. 5А).
    5. Отрежьте 1 см ткани от верхнего угла пленки LV free (Рисунок 5А).
  2. Расположите приспособление в LVOT так, чтобы отверстие для крепления опорного стержня находилось на расстоянии 1 см позади разреза НН (Рисунок 5B).
    1. Следите за тем, чтобы приспособление не вставлялось слишком глубоко в LVOT так, чтобы оно расширяло затрубное пространство AV.
  3. Прикрепите переднюю створку MV к приспособлению с помощью одной или двух 6-дюймовых стяжек-молний, расположенных между сухожилиями хорды створки (Рисунок 5C).
  4. Зашить свободную стенку LV вокруг приспособления (Рисунок 5D).
    1. Начните с пришивания манжеты ткани LA на аорте к кольцу MV с помощью простого ходового шва иглой с коническим концом.
    2. Продолжайте выполнение стежка на ЛЖ, не разрывая ткань ЛЖ.

figure-protocol-5
Рисунок 5: Канюляция выходного тракта левого желудочка с помощью дубликатора импульсов. (А) Удаляется половина толщины свободной стенки ЛЖ с сохранением 1 см эпикарда по свободному краю. Пунктирной линией обозначена область 1 см, которую необходимо удалить от верхнего угла свободной стеновой пленки LV. (B) Отверстие для крепления опорного стержня расположено на расстоянии 1 см позади разреза свободной стенки LV. (C) Стяжка-молния, прикрепляющая переднюю створку MV к проксимальному креплению. (D) Свободная стенка LV, зашитая вокруг прибора. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

6. Канюляция аорты с фиксатором ЧР и окончательная подготовка к тестированию ЧР

  1. Измерьте диаметр AV с помощью расширителей Хегара, чтобы помочь в интерпретации результатов тестирования частичных разрядов.
  2. Определите нейтральное положение аорты, сняв образец со стола, взявшись за аорту (Рисунок 6А).
  3. Вставьте приспособление PD в аорту, следя за тем, чтобы отверстия для крепления стержня совпадали в нейтральном положении аорты.
  4. Проверьте длину образца, вставив опорные стержни.
  5. Закрепите фиксатор PD на аорте с помощью одной или двух 6-дюймовых стяжек (Рисунок 6B).
  6. Закрепите LVOT вокруг приспособления PD с помощью одной или двух 8-дюймовых стяжек-молний.
  7. Закрепите опорные стержни на месте с помощью винтов, входящих в комплект PD.
  8. Поместите образец в PD и начните испытание (Рисунок 6C, Видео 1 и Видео 2).
  9. При необходимости зашивайте все протечки.

figure-protocol-6
Рисунок 6: Канюляция аорты и тестирование в дубликаторе импульсов. (А) Подъем образца со стола за аорту для определения нейтрального положения аорты. (B) Дистальное крепление в аорте с помощью застежек-молний. (C) Образец, установленный в дубликаторе импульсов для гидродинамических испытаний. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

7. Проведите экспериментальную процедуру

ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните экспериментальные процедуры, такие как процедура Одзаки,как описано ранее 5,6,7, и повторите тестирование ЧР.

  1. Если ткань пересохла во время процедуры, затяните стяжки и укрепите линию шва по мере необходимости.

8. Длительное хранение образца (при желании)

  1. Поместить образец в формалин 10% на 168 ч (1 неделя)10,11.
  2. После фиксации ткани образец промывают деионизированной водой и помещают в этиловый спирт 70% для длительного хранения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Репрезентативные данные, собранные с помощью дубликатора импульсов, включают фракцию регургитации (RF), эффективную площадь отверстия (EOA) и среднюю положительную разность давлений (PPD). RF и EOA, в частности, используются в стандартах ISO для протезов клапанов (ISO 5840) и будут важны для сбора, если продукты для протезирования клапанов находятся на стадии исследования. PPD содержит информацию о том, какое давление требуется для открытия клапана, и на него обычно ссылаются при обсуждении замены протеза клапана

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Представленный здесь метод обеспечивает платформу для гидродинамических испытаний AV с целью изучения эффекта экспериментальной процедуры или нового медицинского устройства. Установив родной аортальный клапан на дубликатор импульсов, мы можем определить влияние экспериментальной процедуры на все гидродинамические параметры, используемые при исследовании и утверждении новых протезов клапанов (ISO 5840). Это дает возможность точно настроить процедуры и протезы перед использованием на модели крупного животного.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет соответствующих финансовых конфликтов интересов, которые они могли бы раскрыть.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить лабораторию доктора Горданы Вуньяк-Новакович, в том числе Джули Ван Хассель, Мохамеда Диана и Панпана Чена, за то, что они позволили нам использовать сердечные отходы, полученные в результате их экспериментов. Эта работа была поддержана Коалицией по врожденным порокам сердца в Батлере, штат Нью-Джерси, и Национальными институтами здравоохранения в Бетесде, штат Мэриленд (5T32HL007854-27).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
3D принтерUltimaker UltimakerS5Используется для печати пользовательских приспособлений для гидродинамических испытаний
Crile-Wood ИглопробительEmerald Instruments2.0638.15Используется для наложения швов на желудочек
Debakey ЩипцыJarit320-110Используется для вскрытия и подготовки образцов (можно использовать несколько, если работаете с ассистентом)
Этанол 200 proofDecon Labs Inc. DSP-MD.43Используется для хранения несъемных тканей
Формалин 10%Epredia5701Используется для фиксации тканей
Gerald ЩипцыJarit285-126Используются для препарирования и подготовки образцов
Стеклянные банкиQAPPDAB07QCP54Z3Используются для хранения тканей
Глутаральдегид 25%Электронная микроскопия Sciences16400Используются для тканей фиксация
HEPES 1 М буферный растворFisherBP299-100Используется для изготовления глутаральдегида 0,6%
Ножницы MayoJarit099-200Используется для разрезания швов
Ножницы МетценбаумаJarit099-262Используется для препарирования и подготовки образцов
Уплотнительное кольцоSterling Seal & Supply Inc.AS568-117Используется в качестве прокладки на конце напечатанных на 3D-принтере приспособлений
Смола полимолочной кислотыUltimaker1609Используется для 3D-печати приспособлений
Полипропиленовый шовCovidienVP-762-XИспользуется для наложения швов желудочка, коническая игла
Импульсный дубликаторBDC LaboratoriesHDTi-6000Используется для гидродинамических испытаний
Шелковые галстукиCovidienS-193Используется для перевязки коронарных артерий
Зажим для миндалинAesculapBH957RИспользуется для диссекции коронарных артерий
Стяжки (6 дюймов)Advanced Cable Lings, Inc.AL-06-18-9-CИспользуется для крепления образца к приспособлениям, длина 157,14 мм (6 дюймов), ширина 2,5 мм
Стяжки (8 дюймов)GTSEGTSE-20025B.1000Используется для крепления образца к приспособлениям, длина 203 мм (8 дюймов), ширина 2,5 мм

Ссылки

  1. Aluru, J. S., Barsouk, A., Saginala, K., Rawla, P., Barsouk, A. Valvular heart disease epidemiology. Medical Science. 10 (2), Basel, Switzerland. 32(2022).
  2. Herrmann, J. L., Brown, J. W. Seven decades of valved right ventricular outflow tract reconstruction: The most common heart procedure in children. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 160 (5), 1284-1288 (2020).
  3. Rotman, O. M., Bianchi, M., Ghosh, R. P., Kovarovic, B., Bluestein, D. Principles of TAVR valve design, modelling, and testing. Expert Review of Medical Devices. 15 (11), 771-791 (2018).
  4. Pibarot, P., et al. Imaging for predicting and assessing prosthesis-patient mismatch after aortic valve replacement. JACC Cardiovascular Imaging. 12 (1), 149-162 (2019).
  5. Ozaki, S., et al. Aortic valve reconstruction using self-developed aortic valve plasty system in aortic valve disease. Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 12 (4), 550-553 (2011).
  6. Krane, M., Amabile, A., Ziegelmüller, J. A., Geirsson, A., Lange, R. Aortic valve neocuspidization (the Ozaki procedure). Multimedia Manual of Cardiothoracic Surgery. , (2021).
  7. Ozaki, S., et al. A total of 404 cases of aortic valve reconstruction with glutaraldehyde-treated autologous pericardium. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 147 (1), 301-306 (2014).
  8. Vandecasteele, T., et al. The pulmonary veins of the pig as an anatomical model for the development of a new treatment for atrial fibrillation. Anatomia Histollogia Embryologia. 44 (1), 1-12 (2015).
  9. Góes, A. M. O., et al. Comparative angiotomographic study of swine vascular anatomy: contributions to research and training models in vascular and endovascular surgery. Journal Vascular Brasilerio. 20, 20200086(2021).
  10. Hołda, M. K., Klimek-Piotrowska, W., Koziej, M., Piątek, K., Hołda, J. Influence of different fixation protocols on the preservation and dimensions of cardiac tissue. Journal of Anatomy. 229 (2), 334-340 (2016).
  11. Hołda, M. K., Klimek-Piotrowska, W., Koziej, M., Tyrak, K., Hołda, J. Penetration of formaldehyde based fixatives into heart. Folia Medica Cracoviensia. 57 (4), 63-70 (2017).
  12. Spampinato, R. A., et al. Grading of aortic regurgitation by cardiovascular magnetic resonance and pulsed Doppler of the left subclavian artery: harmonizing grading scales between imaging modalities. International Journal of Cardiovascular Imaging. 36 (8), 1517-1526 (2020).
  13. Capps, S. B., Elkins, R. C., Fronk, D. M. Body surface area as a predictor of aortic and pulmonary valve diameter. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 119 (5), 975-982 (2000).
  14. Baumgartner, H., et al. Recommendations on the echocardiographic assessment of aortic valve stenosis: a focused update from the European Association of Cardiovascular Imaging and the American Society of Echocardiography. European Heart Journal - Cardiovascular Imaging. 18 (3), 254-275 (2017).
  15. Saisho, H., et al. An ex vivo evaluation of two different suture techniques for the Ozaki aortic neocuspidization procedure. Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 33 (4), 518-524 (2021).
  16. Saisho, H., et al. Ex vivo evaluation of the Ozaki procedure in comparison with the native aortic valve and prosthetic valves. Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 35 (3), (2022).
  17. Paulsen, M. J., et al. Comprehensive ex vivo comparison of 5 clinically used conduit configurations for valve-sparing aortic root replacement using a 3-dimensional-printed heart simulator. Circulation. 142 (14), 1361-1373 (2020).
  18. Al-Atassi, T., et al. Impact of aortic annular geometry on aortic valve insufficiency: Insights from a preclinical, ex vivo, porcine model. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 150 (3), 656-664 (2015).
  19. Sun, M., et al. A biomimetic multilayered polymeric material designed for heart valve repair and replacement. Biomaterials. 288, 121756(2022).
  20. Waller, B. F., McKay, C., Van Tassel, J., Allen, M. Catheter balloon valvuloplasty of stenotic porcine bioprosthetic valves: Part I: Anatomic considerations. Clinical Cardiology. 14 (8), 686-691 (1991).
  21. Crick, S. J., Sheppard, M. N., Ho, S. Y., Gebstein, L., Anderson, R. H. Anatomy of the pig heart: comparisons with normal human cardiac structure. Journal of Anatomy. 193, 105-119 (1998).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги