Оценка баланса двигателя и координации в использовании мыши Бревно

Дефицит в прекрасной координации движений может быть оценено с помощью теста бревне. Спектакль по луча количественно скорость, с которой луч пересекается и сколько раз мышь скользит по лучу.

Общей целью этой процедуры является оценка координации движений и равновесия у мышей. Первым делом необходимо собрать балансир с учетом положения датчика движения, зафиксировать задержку пересечения луча для начала обучения, разместить его в начальной точке балансира и позволить ему пересечь его на безопасную площадку. Иногда необходимо подталкивать животное вдоль луча к конечной точке.

После интервала между испытаниями в 10 минут маер тренировался на более узком луче, чтобы обеспечить большую чувствительность. Завершающим этапом процедуры является тестирование обученных животных на балках разной ширины. В конечном счете, можно получить результаты, которые показывают дефицит координации движений и равновесия.

Здравствуйте, меня зовут Тим Луонг, и я кандидат медицинских наук, кандидат наук на биологическом факультете Калифорнийского технологического института. Меня зовут Холли Карлайл, я работаю постдоком в Калифорнийском технологическом институте на биологическом факультете, и сегодня мы покажем вам, как оценить равновесие и координацию движений у мышей с помощью теста на балансировочном пучке. Основное преимущество этого метода по сравнению с другими методами, такими как стержень ротора, заключается в том, что тест с балансирным лучом, как правило, более чувствителен даже к незначительным дефицитам координации движений.

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области поведения, например, затрагиваются ли наши двигательные координации и равновесие в определенных моделях неврологических заболеваний и облегчаются ли наши двигательные дефициты с помощью определенных методов лечения. Цель этого теста — измерить количество времени, которое требуется мыши, чтобы пересечь луч без остановки или остановки, а также без подсказки со стороны исследователя. Чтобы получить чистый результат в день тестирования, мы тренируемся в течение двух дней перед тестированием.

Визуальная демонстрация этого метода полезна, так как способ обращения с мышами и оказания им помощи через луч может быть сложным для тех, кто менее знаком с поведенческим тестированием. Итак, приступим. Этот протокол основан на протоколах Southwell, etal и Carter etal.

Аппарат собирается путем установки балки длиной один метр между двумя столбами высотой 50 сантиметров. Балки имеют плоскую поверхность шириной шесть или 12 миллиметров. Лучи большей ширины могут быть использованы для более крупных мышей и тех, кто не может пересечь более узкие размеры.

Черный ящик помещается в конце луча, а внутри черного ящика помещается материал для вложения, чтобы стимулировать мышь к конечной точке, освещать начальную точку лампой, которая служит отталкивающим стимулом. Датчики движения размещают на ноль и 80 сантиметров для фиксации задержки пересечения луча, натягивают нейлоновый гамак ниже луча и примерно на 7,5 сантиметров выше столешницы, чтобы смягчить любые падения. Мыши, используемые в этой процедуре, содержатся в 12-часовом цикле светлой темноты и были акклиматизированы в течение двух недель перед тестированием.

Животных вводили в тестовую комнату примерно за 10 минут до начала эксперимента и использовали когорту не менее 10 мышей в каждом тестовом условии для достижения наилучших результатов. Чтобы начать обучение, наведите курсор мыши на начальное место луча шириной 12 миллиметров. Таймер запускается, когда нос мыши входит в центр на 80 сантиметров и останавливается, когда животное достигает конца 80 сантиметров.

Мыши должны пересекать луч с минимальным количеством остановок или остановок. Если животное перестает двигаться вперед, поощряйте его продолжать, осторожно подталкивая его сзади. После того, как животное успешно преодолело бревно, выньте его из сейфа и поместите обратно в домашнюю клетку на 10 минут, прежде чем начать следующую тренировку.

Балансир и коробка очищаются и протираются 70% этанолом перед введением следующей мыши. Каждая мышь трижды обучается на луче шириной 12 миллиметров, а затем обучается на луче шириной шесть миллиметров. Дополнительное трехкратное превышение тренировки может увеличить частоту остановки по мере того, как животное лучше знакомится с задачей и оборудованием.

С другой стороны, если мышам не удается успешно пройти весь пучок после двух дней обучения, может потребоваться дополнительная тренировка. Обязательно запишите исходные измерения до того, как животные получат какое-либо лечение. После завершения дневного обучения верните мышей в их домашние клетки в помещение для содержания.

В день тестирования приведите животных в комнату за 10 минут до начала эксперимента, как показано ранее, поместите мышь в исходное место и запишите задержку для прохождения животным центра на 80 сантиметров луча. Данные представлены как среднее значение двух успешных испытаний, в которых мышь прошла прямо до конца без остановки и без подталкивания со стороны исследователя. Видеозаписи могут быть использованы для более точного анализа проскальзывания и других наблюдаемых двигательных дефицитов.

В этом примере шесть мышей C 57 black в возрасте от 9 до 11 недель были протестированы на пучках шириной 12 мм и 6 мм. Среднее время пересечения луча шириной 12 мм составляло 4,6 плюс-минус 0,4 секунды для самцов, а 3,3 плюс-минус 0,3 секунды для самок, время на шестилучевом луче составляло 6,8 плюс-минус 0,7 секунды для мужчин и 5,9 плюс-минус 0,5 секунды. Для женщин.

Производительность балансира может варьироваться в зависимости от возраста и штамма мышей. Мыши C 57 black six, использованные в этом примере, обычно являются активными животными, несколько падений, но у этих мышей не наблюдалось падений, и генетически или фармакологически модифицированные животные могут стать более частыми и могут быть количественно определены. Ослабленные мыши могут цепляться за сторону луча, что увеличивает время их пересечения при попытке выполнить эту процедуру.

Важно быть настойчивым и последовательным, подталкивая мышей двигаться вперед, если они останавливаются или отвлекаются на луч. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее понимание того, как тренировать мышей пересекать бревно и оценивать их равновесие и координацию. Спасибо за просмотр, и я надеюсь, что вы нашли это полезным.