Оценка взаимодействия бактерий и клеток-хозяев с помощью биомиметических шариков

Возьмите многолуночный планшет, содержащий культуру эпителиальных клеток млекопитающих.

В тестовые лунки добавьте бактериальный патоген вместе с полимерными шариками, связанными с бактериальными поверхностными белками.

В контрольные лунки добавьте возбудителя и шарики, в которых отсутствуют бактериальные поверхностные белки. Инкубировать.

В испытательных лунках шарики имитируют бактериальную поверхность и конкурируют с возбудителем за связывание с мембраной эпителиальной клетки фосфатидной кислотой, уменьшая бактериальное прикрепление.

В контрольных лунках бусины не влияют на прикрепление бактерий.

Удалите носитель и промойте буфером, чтобы удалить несвязанные компоненты.

Инкубируйте с неионогенным детергентом, чтобы лизировать клетки, высвобождая прикрепленные к мембране бактерии и шарики.

Пипеткой измельчите лизат для получения однородной суспензии и последовательно разбавляйте гомогенат с помощью буфера.

Перенесите разведения на агаровые планшеты, инкубируйте, чтобы дать возможность образоваться колониям, и подсчитайте колонии.

Тестовая пластина демонстрирует меньшее количество колоний, чем контрольная группа, что указывает на снижение взаимодействия бактерий и хозяина.

Приготов