Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:17 мин. • August 31st, 2026
Возьмите ночную культуру лизогенной бактерии, в которой большинство клеток содержат спящую ДНК фага, интегрированную в их геном.
Инокулируйте культуру в свежую среду и инкубируйте.
Некоторые бактерии подвергаются спонтанной индукции, переходя в литический цикл, при котором происходит вырезание и репликация ДНК фага, а также синтез вирусных белков.
Вновь собранные инфекционные фаги высвобождаются путем лизиса клеток.
Собирайте образцы культуры через определенные интервалы времени.
Для подсчета жизнеспособных неиндуцированных лизогенов нанесите серийные разведения каждого образца на чашку с агаром и инкубируйте.
Подсчитайте количество колоний для определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ).
Для подсчета инфекционных фагов нанесите те же разведения на чашку с антибиотикосодержащим агаром, предварительно засеянную устойчивыми к антибиотикам клетками-хозяевами индикаторного штамма. Поскольку лизогены чувствительны к антибиотикам, расти только устойчивые хозяева.
Фаги инфицируют и лизируют клетки, образуя прозрачные бляшки.
Подсчитайте количество бляшек для расчета бляшкообразующих единиц (БОЕ). Более низкие значения БОЕ указывают на меньшее количество событий спонтанной индукции.
Постро
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео