Использование прав Периваскулярная стволовых клеток для регенерации костной

Общей целью данного эксперимента является наблюдение за эффектами периваскулярной имплантации стволовых клеток в моделях эктопической и ортотопической дифференцировки костей. Это достигается путем выделения стволовых клеток из жировой ткани с помощью факсимильной технологии. Затем изготавливаются специальные каркасы, обеспечивающие поверхность для дифференцировки клеток в эктопической или ортотопической среде.

Для тестирования опосредованного ПСК костного формирования скелетные дефекты создаются с использованием модели мышечного мешка мыши, модели черепа мыши или модели сегментарного дефекта бедренной кости атимической мыши крысы, и привитый каркас приживается в пределах дефекта. Рентгенологический, гистологический и биохимический анализ показывает, что периваскулярная дифференцировка стволовых клеток приводит к значительному костеобразованию in vivo. Основное преимущество использования параваскулярных стволовых клеток по сравнению с другими, более традиционными источниками стволовых клеток заключается в том, что ПСК или параваскулярные стволовые клетки представляют собой более однородную популяцию, что повышает чистоту стволовых клеток, усиливает выработку трофических факторов и потенциально увеличивает образование костной ткани.

Начните с создания каркаса, как описано в прилагаемой рукописи. Подготовьте каркас к имплантации, добавив в него клеточную суспензию. Для моделей мышечного мешка мыши или дефекта черепа используйте плотность 250 000 клеток на сто микролитров после анестезии.

Шестинедельные мыши-заносчики с изофлураном и бупренорфином. Сделайте стандартный препарат Бетадина в области задней конечности. Затем сделайте двухмиллиметровый продольный двусторонний разрез и с помощью тупого рассечения вырезайте карманы глубиной четыре миллиметра в мышцах бицепса бедра.

Параллельно мышечному волокну должно наблюдаться только минимальное кровотечение. Вставьте имплантат, привитый с помощью ПСК. Теперь сшиваем фасцию, покрывающую мышцу, простым непрерывным узором с помощью пяти и Викрила.

Далее закройте кожу пятью о Викрилом подкожным рисунком. Послеоперационный период. Обрабатывайте животных бупренорфином в течение 48 часов и T-M-P-S-M-X в течение 10 дней. Мышь должна легко ходить в первый день после операции.

После введения изоофтора анестезия у 12-14-недельной мыши-полозья. Сделайте стандартный препарат Бетадином для черепной области. Начните с восьмимиллиметрового разреза кожи на среднем сагиттальном шве пятки мыши.

Далее аккуратно удалите пятышневую надкостницу с помощью аппликатора с ватным наконечником и с помощью аппликатора впитайте кровотечение. Теперь с помощью трепанного сверла с алмазным покрытием, прикрепленного к высокоскоростной стоматологической борде, сделайте четырехмиллиметровый теменный костный дефект. Сделайте дефект на всю толщину, например, по всей кости, но будьте предельно осторожны, чтобы не повредить основную твердую мозговую оболочку, так как это помешает заживлению.

Теперь аккуратно поместите имплантат и прививку с ПСК в место дефекта. Наконец, зашите кожу шестью и Викрилом после операции. Обрабатывайте животных бупренорфином в течение 48 часов и T-M-P-S-M-X в течение 10 дней.

Начните с очистки и подготовки бедренной кости 12-14-недельной амической крысы, которая была обезболена фтором Изофа. Используется стандартный протокол Бетадин. Сделайте продольный разрез от 27 до 30 миллиметров над передней боковой поверхностью бедренной кости.

Затем обнажите бедренный стержень, отделив обширные латеральные и двуглавые мышцы бедра, чтобы избежать чрезмерного кровотечения. Будьте осторожны вокруг крупных кровеносных сосудов. Для максимальной консистенции регенерации кости, полностью.

Удалите надкостницу, покрывающую бедренный дефект, вместе с резецированным бедренным сегментом. Избегайте повреждения бедренного нерва, чтобы предотвратить неврологические повреждения. Теперь поместите полиэтиленовую пластину на переднюю боковую поверхность бедренной кости.

Шесть предварительно просверленных отверстий в пластине, вмещают резьбовые провода Киршнера диаметром 0,9 миллиметра. Используя пластину в качестве шаблона, просверлил шесть резьбовых проводов Киршнера через пластину, и обе коры. С помощью небольшого качающегося пильного полотна сделайте шестимиллиметровый средний дефект.

Затем имплантируют ПСК и привитый каркас в дефект. Закройте вышележащую мышцу и фасцию четырьмя рассасывающимися швами с викрилом. Чтобы закрепить имплантат на месте, дайте крысе обезболивание в течение двух дней после операции и следите за расхождением раны в течение четырех недель после имплантации мышечного мешка.

Наблюдалось постепенное увеличение объема кости и минеральной плотности костной ткани, что наблюдалось при приживлении ПСК с помощью микрокомпьютерной томографии и анализа XR в течение восьми недель после введения дефекта черепа, заживление кости без каркаса не наблюдалось из-за критического размера дефекта с каркасом, но без клеток. Было незначительное заживление, по оценкам, около 20%, как и ожидалось. Постепенное увеличение окостенения дефекта наблюдалось при использовании засеянного каркаса.

Значительное окостенение произошло в течение двух недель. Полное окостенение произошло через восемь недель после введения бедренного дефекта. Постепенное увеличение окостенения происходило при лечении дефекта BMP уже через четыре недели, у некоторых животных наблюдалось сращение, а к восьми неделям все животные были исцелены.

В отличие от этого, сращение костей не наблюдалось без каркаса или с каркасом, в котором отсутствовали клетки или рекомбинантный белок. После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее представление о том, как выделять параваскулярные стволовые клетки, как затем использовать параваскулярные стволовые клетки в сочетании с остеоиндуктивными каркасами PLGA, и, наконец, как использовать эти комбинированные каркасы и продавать продукты для трех различных методов тканевой инженерии, пытаясь выполнить каждую процедуру, как представлено здесь. Есть несколько вещей, о которых важно помнить. Во-первых, при использовании модели черепного дефекта точная сохранность твердой мозговой оболочки гарантирует надлежащее заживление.

Во-вторых, для модели сегментарного дефекта бедренной кости крысы важно свести к минимуму травмирование окружающих нервов и кровеносных сосудов. Как только человек освоит определенную хирургическую технику, представленную здесь, вы можете ожидать, что каждая имплантация мышечного мешка занимает около 20 минут, а каждый дефект кальвариального и бедренного сегментарного дефекта может занять до 30 минут для правильного выполнения.