Статическая атомно-силовая микроскопия для визуализации и определения характеристик собранных нуклеосом
Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 5:09 мин. • July 8th, 2025
Нуклеосомы, основная повторяющаяся единица эукариотического хроматина, состоят из витков ДНК, обернутых вокруг ядра белков-гистонов.
Чтобы визуализировать собранные нуклеосомы с помощью статической атомно-силовой микроскопии, АСМ, начните с тонкой полоски слюды, функционализированной для придания поверхности положительного заряда. Нарежьте полоску на небольшие квадратики. Пипеткой собирают нуклеосомную суспензию.
Отрицательно заряженная ДНК в нуклеосоме связывается с положительно заряженной группой функционализированной полоски слюды посредством электростатических взаимодействий. Промойте с буфером, чтобы предотвратить переполнение нуклеосом.
Закрепите полоску слюды на опорном диске для образца. Установите ее на инструментальный столик AFM.
Прикрепите держатель щупа к оптической головке прибора. Держатель содержит предварительно установленный консоль AFM с наконечником на вершине.
Направьте лазерный луч на заднюю часть кантилевера для точного измерения прогиба. Расположите наконечник в непосредственном контакте с поверхностью, содержащей нуклеосомы.
Во время визуализации в контактном режиме, когда кончик кантилевера сканирует поверхность нуклеосомы, возникают силы отталкивания посл
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео