Количественная Когнитивные Уменьшает причиненный Черепно Лучевая терапия

Когнитивные нарушения, возникающие в результате радиотерапевтического лечения опухолей головного мозга, представляют собой клинически неизлечимое состояние, которое отрицательно влияет на качество жизни. Способность критически оценивать потенциальные вмешательства для улучшения когнитивных нарушений, вызванных радиацией, в конечном счете зависит от способности проводить строгие количественные оценки когнитивных функций.

Общая цель этой процедуры заключается в количественной оценке поведенческих и когнитивных изменений, вызванных облучением черепа. Первым шагом является проверка памяти на пространственное распознавание на основе гиппокампа с помощью новой задачи на распознавание места. Затем оценивается уровень тревожности с помощью задачи «Повышенный плюс лабиринт», формирования памяти на основе страха, с помощью задачи на справедливое справедливое обусловливание гиппокампа и миндалевидного тела, а затем измеряется задача на обусловливание страха в очереди, зависящей от миндалевидного тела.

Последним шагом является выполнение задания «Водный лабиринт Мориса» для оценки пространственного обучения, пространственной памяти и способности к обратному обучению. В конечном счете, этот протокол обнаруживает изменения в настроении, пространственном и непространственном обучении и памяти, а также любые сенсорно-моторные нарушения, вызванные облучением черепа. Тем не менее, этот метод может дать представление о влиянии облучения черепа на поведение и познание.

Он также может быть использован в других ситуациях, в которых когнитивные способности нарушены в качестве нежелательного побочного эффекта другой терапии, например, в случае нарушений обучения и памяти, вызванных химиотерапией или химиотерапией. Люди, плохо знакомые с этим методом, будут испытывать трудности из-за трудоемкого характера настройки и оптимизации оборудования. Интерпретация полученных результатов может быть затруднена, если экспериментальные процедуры не контролируются строго, а вариации данных затрудняют выявление различий между контрольной и экспериментальной группами.

Визуальная демонстрация этих методологий имеет решающее значение, чтобы читатель мог оценить тонкости, связанные с организацией или экспериментальными комнатами, в которых проводится когнитивное тестирование, а также конкретные используемые процедуры. Чтобы обеспечить равномерное обращение с животными, начните этап ознакомления с подготовкой испытательной среды, тщательно очистите два идентичных пластиковых блока с 70% этанолом и поместите их в определенные места на арене. Поместите животное в центр арены и позвольте ему свободно исследовать.

В течение пяти минут оцениваются исследовательские поведения. С помощью автоматизированной системы слежения исследование определяется как нос животного, находящийся в радиусе четырех сантиметров от блоков и направленный в сторону блоков. Когда время истечет, переместите животное в клетку еще на пять минут.

В течение этого времени очистите испытательную арену с 70% этанолом. Добавьте одну идентичную копию блоков в то же пространственное положение, что и на этапе ознакомления, и одну в новую пространственную позицию. После пятиминутного интервала задержки снова введите животное на испытательные арены на пятиминутную фазу тестирования и дайте ему свободно исследовать его в течение трех минут.

Если запомнить пространственное расположение блоков из фазы ознакомления, крыса потратит больше времени на изучение блока в новом пространственном месте. На следующий день животных снова возвращают на арену. В течение 24-часовой фазы тестирования один блок снова остается в привычном положении, в то время как другой находится в романе.

Во-первых, поместите животное в центр арены и записывайте исследование в течение трех минут. Лабиринт с повышенным плюсом измеряет уровень тревожности у грызунов. Перед тестированием убедитесь, что лабиринт тщательно очищен.

Для начала поместите животное в центральную часть лабиринта лицом к открытой руке от экспериментатора, дайте животному исследовать его в течение пяти минут. Количество входов и время, проведенное в открытом и закрытом оружии, отслеживается с помощью автоматизированного программного обеспечения. Если крыса выпадает из лабиринта, быстро положите ее обратно на распростертую руку и запишите происходящее.

Также обратите внимание на любое зависание и возможные причины. Обусловливание страха — это поведенческая парадигма, в которой животные учатся бояться ранее нейтрального стимула. Соединив его с вредным раздражителем в первый день, поместите животное в тщательно вымытую камеру.

Начните тренировочное испытание, которое состоит из трех этапов. Первая представляет собой пятиминутную базовую фазу, когда во время фазы тренировки не подается шок или тон, в течение пятиминутного периода представляются несколько пар тональных ударов. Наконец, на этапе после дрессировки животному дается еще пять минут.

При отсутствии шока или тонуса процент времени, в течение которого каждое животное замирает, измеряется от последних 60 секунд исходной фазы и от последних 60 секунд фазы после тренировки. Через 24 часа верните животное в камеру для пятиминутного контекстуального теста и запишите процент времени, проведенного в заморожении через час после тестирования. В привычном контексте снимите решетчатый пол, добавьте панели снаружи камеры и очистите таким же ароматизированным бытовым чистящим средством.

Чтобы проверить условные рефлексы страха, поместите животное в новый контекст и запишите поведение замирания в присутствии и отсутствии тона, который ранее был связан с вредным стимулом. Водный лабиринт Морриса — это тест на пространственное обучение, который требует использования дистальных сигналов для определения местоположения погруженной спасательной платформы в большом бассейне непрозрачной воды, задача выполняется в течение восьми дней и состоит из четырех этапов, теста очереди и сбора. Фаза: 24-часовой тест зонда и тест на обратное обучение.

Чтобы начать испытание в очереди, поместите четкий черно-белый флаг в центре платформы, чтобы место побега было очевидно для животного. Для каждого испытания CUD поместите животное в другое заранее определенное стартовое место по периметру бассейна, переместите платформу в другой квадрант. В каждом из четырех испытаний дайте животному 30 секунд, чтобы найти спасательную платформу.

Если достигнуто максимальное время, ведите животных туда вручную. Дайте животному постоять на платформе в течение 20 секунд, прежде чем поместить его в утепленную клетку. На следующий день начните фазу сбора, состоящую из четырех испытаний в день в течение пяти дней подряд.

Во время этой фазы скрытая платформа остается на том же месте, и животные учатся перемещаться к ней. Используя дистальные сигналы комнаты, поместите животное в бассейн в другой заранее определенной точке старта. Для каждой попытки запишите среднюю задержку для поиска платформы и длину пути в качестве мер пространственного обучения.

Если животное не убежало в течение максимального времени плавания в 60 секунд, направляйтесь к платформе вручную и дайте ему оставаться там в течение 20 секунд. Через 24 часа после заключительного тренировочного испытания проведите 62-е испытание, в котором платформа удаляется, чтобы определить предпочтения животного в отношении квадранта, в котором раньше находилась платформа. После этого пробного испытания верните платформу в тот же квадрант и проведите три дополнительных испытания сбора данных для теста Reversal Learning.

На восьмой день перенесите платформу на новое место. Познакомьте животное с бассейном и измерьте количество времени, затраченного на поиск платформы в его предыдущем месте по сравнению с новым здесь. Результаты исследования контрольных и облученных животных в задаче на распознавание нового места показали, что эти две позиции были исследованы в равной степени на этапе ознакомления.

Тем не менее, контрольные животные показали явное предпочтение новому пространственному положению после пятиминутных и 24-часовых интервалов задержки, в то время как облученные животные этого не делали. В лабиринте на возвышенностях плюс контроль и облученные животные тратили меньше времени, исследуя распростертые объятия, чем можно было бы ожидать случайно. Процент замерзания во время первоначального воздействия камеры был очень низким по сравнению с периодом после тренировки на следующий день.

Поведение при замораживании по-прежнему увеличивалось в знакомом контексте, хотя и в гораздо меньшей степени у облученных животных, когда оно помещалось в новый контекст, поведение при замораживании возвращалось к исходному уровню, но снова повышалось при представлении тона в водном лабиринте Морриса. В ходе последующих испытаний Task Control Animals быстрее обнаруживали платформу для побега по сравнению с облученными животными. Облученным животным также потребовалось больше времени и более длинный путь к платформе в ходе пробного испытания, через 24 часа во время теста на обратное обучение, когда местоположение платформы переключается, нормальные животные постепенно прекращают поиск в старом квадранте и узнают новое местоположение платформы, в то время как облученные животные этого не делают.

При выполнении этих задач важно делать подробные заметки о любых аномальных событиях или поведении, а также о любых возникающих проблемах отслеживания, которые необходимо решить перед анализом данных. Не забывайте, что работа с подопытными животными может быть опасной, и при проведении этих процедур всегда следует соблюдать меры предосторожности, такие как использование средств индивидуальной защиты. Также крайне важно получить одобрение учреждения и следовать институциональным и федеральным рекомендациям по безопасному и этичному использованию животных.