29 октября 2014 г.
Илеоколическая резекция обычно выполняется при нескольких заболеваниях человека, однако мало что известно о влиянии резекции кишечника на хирургические заболевания. В этой статье представлены инструкции по проведению процедуры на мышах с высоким успехом, что дает возможность изучить эффекты илеоколической резекции на моделях заболевания.
Общей целью этой процедуры является резекция терминального отдела подвздошной кишки и слепой кишки и выполнение ИОК-коликабельного анастомоза. Это достигается путем первичного лигирования, илеоцекального кровоснабжения. Вторым этапом является удаление ишемизированной части кишечника.
Далее конструируется коликовый анастомоз МОК. Заключительным этапом является осмотр анастомоза на целостность и проходимость. В конечном счете, последствия МОК колики.
Резекция может быть определена при различных моделях заболевания. Таким образом, визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, потому что резекция и анастомоз требуют высокого уровня анатомической детализации. Для начала перевода животных в новую чистую клетку, отсутствующую от всего твердого корма в течение 24 часов, разрешить свободный доступ воды и жидкого рациона до момента проведения процедуры.
Заранее автоклавируйте все необходимые для процедуры инструменты и очистите операционную поверхность и обезболивающий носовой конус с 70% этанолом. Далее расположите операционный микроскоп, наркозный аппарат и хирургические принадлежности удобно в рабочей зоне. Инструменты, швы, ватные палочки и шприц объемом 10 миллилитров должны быть размещены в месте, обеспечивающем легкий доступ во время работы.
Установите верхнюю тепловую лампу, чтобы обеспечить тепло во время процедуры и освещение рабочей поверхности. Наконец, наполните 50-миллилитровую коническую трубку 0,9%-ным физиологическим раствором и 1,5-миллилитровую трубку вазелином и поместите возле рабочей поверхности. Когда вы будете готовы начать, подтвердите глубину седации у мыши, находящейся под наркозом.
После полного обезболивания уменьшите скорость потока изофтора и кислорода. Периодически проверяйте болевую реакцию во время процедуры и соответствующим образом регулируйте скорость потока изофтора. После нанесения вазелина на глаза обездвижите мышь в положении лежа на спине, зафиксировав конечность с помощью прозрачного пластыря.
Далее очистите брюшную полость раствором повидон-йода. После этого переоденьтесь в новые стерильные перчатки. Сделайте 1,5-сантиметровый разрез по верхней средней линии живота, чтобы обнажить фасцию и брюшину после обнажения, разрежьте линейную белую кость, чтобы обнажить содержимое брюшины.
В отличие от человека, мышиная сыворотка обычно находится в левом верхнем квадранте брюшной полости. После определения аккуратно захватите слепую кишку щипцами и проведите ее через разрез. Положите стерильную марлю на поверхность живота и с помощью смоченных ватных тампонов разверните примерно три сантиметра терминального отдела подвздошной кишки, отходящего от слепой кишки.
Убедитесь, что открытый кишечник остается влажным с 0,9% физиологическим раствором в течение всей процедуры. С помощью операционного микроскопа определите илеоцекальную артерию, ответвляющуюся от верхней брыжеечной артерии по ободочной кишке. Рассеките аваскулярные ткани, прилегающие к илеоцекальной артерии.
После изоляции обведите и перевязайте артерию шелковой завязкой 5.0. Затем найдите регионарное кровоснабжение терминального подвздошного отдела и выберите пересечение на 0,1-0,5-2 сантиметра проксимальнее илеоцекального перехода. Перевязайте ветви к этому участку подвздошной кишки, как показано ранее, разделите артерии микрорассекающими ножницами.
Удалите ишемизированные участки подвздошной и толстой кишки и убедитесь в достаточном кровоснабжении пересеченных концов. Часто бывает полезно провести лопатку подвздошной кишки, разделив ее под углом 30 градусов, чтобы увеличить диаметр просвета, чтобы он более плотно соответствовал толстой кишке. Затем выровняйте перерезанные концы подвздошной кишки и толстой кишки на марле, убедившись, что границы брыжейки каждого из них выровнены.
Постройте анастомоз, аппроксимируя пересеченный конец подвздошной кишки к пересеченному концу толстой кишки. Используя прерывистые восемь полипропиленовых швов, первый шов следует наложить на брыжеечную границу, а последующие швы накладывать через каждые 0,5 миллиметра до возникновения колик IOC. Анастомоз водонепроницаем.
При прохождении иглы шва через подвздошную и толстую кишку следите за тем, чтобы край среза не был закатан, а места укусов игл находились на расстоянии 0,5 миллиметра от разрезанных краев кишечника. Типичный анастомоз потребует наложения от 14 до 16 прерывистых швов. Проверьте целостность и проходимость анастомоза по завершению, прокатав ватным тампоном проксимальнее дистального отдела подвздошной кишки.
Для проталкивания содержимого через тонкий кишечник содержимое должно свободно проходить в толстую кишку без утечки анастомоза. Промойте обнаженную кишку тремя-четырьмя миллилитрами 0,9% физиологического раствора из 10-миллилитрового шприца, чтобы смыть стул с поверхности кишечника, прежде чем доставить кишечник обратно в брюшную полость. Используется два миллилитра 0,9%-ного физиологического раствора.
Промойте брюшную полость. Слейте эту жидкость, слегка надавливая на брюшную стенку сбоку. Закройте разрез шелковым беговым швом 3.0.
Прекратите подачу изофлурана и введите анальгетик для контроля послеоперационной боли. Наблюдайте за животными под тепловой лампой, пока они не станут подвижными, затем пересадите их в постоянно обогреваемую клетку. Следите за животными в постоянно утепляемой клетке на предмет признаков стресса.
На оставшуюся часть дня переведите животных обратно в учреждение по уходу за животными в новую стерильную клетку с доступом к жидкому рациону и воде, добавьте либидо. Проверьте животных утром первого дня после операции. Если они выглядят некомфортно, введите еще одну дозу бупренорфина на второй день после операции.
Они должны выглядеть полностью выздоровевшими. Стул и употребление пищи являются положительными признаками выздоровления. Если это соблюдается, то они могут возобновить плотную диету чау.
Опять же, масса тела существенно не различалась между группами при сравнении исходного уровня с 14-м и 28-м днем после операции. Окрашенные h и d гистологические срезы подвздошной кишки и толстой кишки выстраиваются в линию, чтобы продемонстрировать траекторию шовной иглы через ткани, начиная с точки А через точку В. Узел должен быть завязан в точке С, поэтому после освоения эта техника может быть выполнена примерно за 45 минут при правильном проведении.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье представлено детальное описание процедуры проведения илеоколической резекции у мышей — метода, имеющего важное значение для изучения последствий резекции кишечника при различных заболеваниях. Целью данного метода является углубление понимания патологических процессов, связанных с хирургическим вмешательством при резекции кишечника.
Данная хирургическая модель позволяет проводить доклиническую оценку последствий резекции кишечника в системах, релевантных для конкретных заболеваний, что способствует валидации мишеней и снижению механистических рисков при разработке препаратов для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта. Обеспечивая воспроизводимую процедуру на мышах, этот метод упрощает количественную оценку патофизиологических последствий, помогая в идентификации перспективных соединений и повышении прогностической уверенности в отношении кандидатов в лекарственные препараты. Данный метод восполняет критический пробел в моделировании результатов резекции кишечника у человека, улучшая трансляционный переход от этапа поиска к доклиническим стадиям.
Данный метод интегрируется в рабочие процессы поисковой биологии, позволяя проверять гипотезы о влиянии резекции кишечника, способствуя идентификации перспективных соединений посредством фенотипического скрининга показателей восстановления, а также предоставляя основу для принятия доклинических решений на базе количественных гистопатологических и функциональных данных.