Полный и обновленный "Коловратки поликультуры Метод" для выращивания первого кормления данио рерио

Общая цель метода поликультуры коловраток заключается в том, чтобы использовать естественную продуктивность и биологические характеристики морских коловраток для создания среды, способствующей быстрому росту и максимальной выживаемости личинок данио-рерио при первом кормлении. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он значительно сокращает количество времени и пространства, необходимых для успешного выращивания большого количества личинок данио-рерио для использования в исследовательских экспериментах. Начните обслуживание коловраток с заполнения емкости для кормления (FCV) до 90 процентов чистой дехлорированной пресной водой с концентрацией 10 граммов аквариумной соли на литр.

Убедитесь, что вода тщательно перемешана и вся соль полностью растворилась. Затем установите поток воздуха в сосуд так, чтобы он поддерживал кипение. Измерьте соленость жидкости с помощью рефрактометра.

Далее возьмите образцы коловраток в сосуде для культивирования, или CV.Убедитесь, что культура хорошо перемешана. Затем соберите три образца объемом два-три миллилитра с помощью переводной пипетки из разных частей культуры и объедините образцы в пробирке. Переложите один-два миллилитра объединенной пробы на чашку Петри.

Визуализируйте образец под препарирующим микроскопом, и проверьте качество культуры. Добавьте в образец 100 микролитров 50-процентного раствора йода Люголя, чтобы обездвижить коловраток и посчитать их. Немедленно возьмите подобразец объемом два миллилитра с помощью пластиковой пипетки и выдайте один миллилитр в счетное стекло Седжвикского стропила.

Используя препарирующий микроскоп, подсчитайте столько площади предметного стекла, сколько необходимо, чтобы насчитать до 100 неповрежденных коловраток и общее количество яиц, прикрепленных к коловраткам. Затем рассчитайте количество коловраток на миллилитр для последующего использования. Начните сбор урожая, сняв фильтр подачи воздуха и зубной нити.

Медленно откройте клапан в нижней части CV и дайте воде плавно течь в планктонный коллектор с сетчатым экраном 53 микрона. Собирайте воду, вытекающую из дна коллектора, после фильтрации в ведро или слива. Далее наполните бутылку от 10 до 15 грамм на литр чистой соленой воды.

Переверните сито над FCV и промойте коловратки в FCV слабой струей соленой воды. Запустите программируемый таймер дозирования или ФЭУ для подачи сырья в FCV. Затем потрите всю внутреннюю часть резюме чистым салфеткой.

Создайте новую смесь 15 граммов на литр в пятигаллонном ведре, чтобы компенсировать объем воды, потерянной при сборе урожая. Энергично перемешайте раствор до полного растворения смеси. Затем добавьте раствор в CV.Далее промойте фильтр для зубной нити распылителем высокого давления.

Когда фильтр зубной нити не содержит мусора, верните его в CV.Отрегулируйте скорость подачи водорослей, поступающих в CV, изменяя продолжительность каждого дозирования. Через 24 часа повторите процесс, приступив к уборке оставшихся в FCV коловраток. Сконцентрируйте коловраток в двух литрах свежей, чистой, дехлорированной воды с пятью граммами на литр соли.

Они могут храниться при температуре четыре градуса Цельсия в качестве резервного запаса или использоваться для кормления рыбы на более поздних стадиях, чем описано в этом протоколе. Соберите эмбрионы рыбок данио-рерио во время нереста, высыпая нерестящиеся эмбрионы через ситечко для чая. А затем, аккуратно смыв стерильной рыбьей водой из бутылки для мытья в чашки Петри.

Как только все эмбрионы будут собраны, инкубируйте их. Фаза поликультуры начинается, когда более 90 процентов вылупившихся личинок активно всплывают в толще воды. Добавьте 500 миллилитров коловраточной культуры непосредственно из FCV в 3,5-литровый бак для рассады.

Далее аккуратно высыпаем личинок из одной чашки Петри в ясельную емкость. Следите за тем, чтобы в блюде не осталось личинок. Добавьте в аквариум 500 миллилитров чистой, кондиционированной воды для рыб из специального источника воды до конечного объема в один литр и 5 граммов на литр конечной солености.

Наблюдайте за поликультурным аквариумом не реже одного раза в день, чтобы убедиться, что коловратки и рыбы присутствуют и растут. Убедитесь, что коловратки видны по всей толще воды. Убедитесь, что рыбы также видны в толще воды и что они плавают среди коловраток.

Очень важно ежедневно оценивать состояние каждого аквариума, чтобы убедиться, что они живы и плавают, а коловратки доступны для всех личинок рыб. Убедившись, что коловратки и рыбы растут, начните нормальный поток воды через аквариум. Наконец, установите сетку над сливным отверстием, чтобы личинки не были вымыты из резервуара.

Типичная производительность культуры коловраток контролировалась в течение 30-дневного периода, и средняя плотность культуры составила 932 коловратки на миллилитр. И максимум 1, 330 коловраток на миллилитр. Популяция коловраток в поликультурном аквариуме с рыбками данио имеет среднюю плотность коловраток 589,4 коловраток на миллилитр.

Минимальное значение 481 коловратки на миллилитр в 10 раз лучше, чем у ранее опубликованных работ. Рыбки данио демонстрировали устойчивый рост каждый день в течение пятидневного периода от средней общей длины 3,9 миллиметра до 5,4 миллиметра. После просмотра этого видео вы должны иметь хорошее представление о том, как выращивать коловраток для использования в поликультурной системе, разработанной для удовлетворения потребностей в питательных веществах рыбок данио-рерио при первом кормлении.