13 июня 2025 г.
В протоколе описано, как измерить гипералгезию коленного сустава у мышей. Мы показываем примеры на мышиных моделях острой боли в колене, а также на моделях остеоартрита (ОА).
Мы разработали трансляционно релевантные анализы боли у мышей с прогрессирующим экспериментальным остеоартритом колена, чтобы лучше понять механизмы, лежащие в основе боли в суставах. У человека с остеоартритом также понижены пороги давления боли. Метод является надёжным и воспроизводимым, а также предлагает среднепроизводительный подход для проверки потенциальных аналогических эффектов системно или внутрисуставно вводимых новых соединений.
Меня интересует изучение тревожности, связанной с прогрессирующим экспериментальным ОА. Мы разрабатываем анализы для изучения связи тревожности с болью при ОА и для изучения основных механизмов. Для начала подключите кабель от PAM-устройства к компьютеру. Подключите второй кабель от устройства к силовому преобразователю.
Теперь включите компьютер и запустите программу PAM. Установите максимальное давление в программе на 450 грамм. Далее оставьте мышей в тестовой комнате на 15–30 минут, пока они не привыкнут и не успокоятся.
Убедитесь, что мышь спокойна и неподвижна, когда связана. Если нет, верните её в клетку и отложите тестирование на несколько дней. Держите мышь в левой руке, удерживая заднюю часть и крепко удерживая хвост четвёртым и пятым пальцами.
Проведите указательный палец правой руки через завязку преобразователя и вставьте палец с преобразователем в прозрачный пластиковый пакет. Теперь правым большим и средним пальцами держите правую ногу. Аккуратно прижали лапу к тенару левой руки средним пальцем.
Убедитесь, что колено расположено примерно под углом сгибания 90 градусов в начале теста. Далее коснитесь латеральной стороны колена большим пальцем правой руки и медиальной стороны датчика указательным пальцем. Медленно прижимайте колено, затем увеличивайте силу со скоростью 30 грамм в секунду.
Продолжайте постоянно увеличивать давление до достижения 450 грамм в секунду или до тех пор, пока мышь не проявит болевание, такое как вокализация, подёргивания мышц, извивание тела или движение усов. Когда достигнут порог, втяните палец с помощью трансдюсера. Запишите давление, отображаемое на экране.
Внутрисуставная инъекция Pam3CSK4 мышам привела к гипералгезии колена в зависимости от дозы, достигая пика через четыре часа после инъекции и возвращавшейся к исходному состоянию через 24 часа. Внутрисуставная инъекция лидокаина в четырёхчасовой пиковой зоне обратила гипералгезию колена, вызванную Pam3CSK4, в течение 30 минут. Операция ДММ вызвала выраженную гипералгезию колена через две недели после операции, и она медленно восстанавливалась до 16-й недели.
У мышей, оперируемых имитацией, также развилась выраженная гипералгезия колена после операции, но гипералгезия колена восстанавливалась быстрее. Внутрисуставная инъекция лидокаина через четыре недели после операции на ДММ привела к немедленному обращению гипералгезии колена в течение 30 минут с уменьшением эффекта на четыре часа.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Это исследование представляет протокол для измерения гиперальгезии коленного сустава в модельных мышах, особенно сосредотачиваясь на острой боли в коленях и остеоартрите (ОА). Разработанные методы обеспечивают понимание механизмов, лежащих в основе боли в суставах, и позволяют тестировать новые соединения.
Quantitative assessment of knee hyperalgesia in mice using pressure application measurement (PAM) enables robust evaluation of peripheral sensitization and pain-related behaviors in preclinical arthritis models. This standardized assay supports predictive confidence in pain mechanism studies and pharmacological intervention testing, directly informing early-stage analgesic discovery and target validation. Its reproducibility and sensitivity to drug effects position it as a critical tool for portfolio triage and translational alignment in pain and osteoarthritis research.
The PAM-based knee hyperalgesia assay integrates into the discovery-to-preclinical continuum, supporting both early mechanistic studies and downstream compound evaluation.