Homing av hematopoetiska celler i benmärgen

Summary

Denna artikel beskriver ett protokoll som används för att studera målsökande av hematopoetiska celler till sina nischer i benmärgen.

Abstract

Homing är det fenomen som innebär att transplanterade hematopoetiska celler kan resa till och ympas eller fastställa bostad i benmärgen. Olika chemomkines och receptorer är inblandade i målsökande av hematopoetiska stamceller. [1, 2]

Detta dokument beskriver den klassiska returnera protokoll som används i hematopoetisk studier stamceller. I allmänhet innebär detta att isolera cellen befolkningen vars målsökande behöver utredas, färgning denna grupp med ett färgämne av intresse och injicera dessa celler i blodet av en mottagare djur. Mottagaren djuret är då offras vid en förutbestämd tid efter injektionen och benmärgen utvärderades för procenttal eller absoluta antalet celler som är positiva för färgen av intresse. I en av de vanligaste experimentella system, målsökande effektiviteten i hematopoetiska celler från två genetiskt skilda djur (en vild typ djur och motsvarande knock-out) jämförs. Den här artikeln beskrivs hematopoietisk cell returnera protokoll inom ramen för till exempel experiment.

Protocol

Vi börjar målsökande experiment genom att extrahera celler som skall användas i experimentet. För detta aktuella experimentet är vi intresserade av att veta om det målsökande av hela benmärgen att de nischer de långa benen av mottagare djur är olika för benmärgsceller ur WT djur som C57BL/6J (WT) och de som är transgena knockouts för Lysophosphatidic Receptor 1 (LPAR1) (KO). Innan vi börjar experimentet kommer vi att samla det material vi behöver för detta experiment. I vårt labb alla möss dissektioner utf…

Discussion

Homing är den process där benmärgsceller, inklusive stamceller, celler stamceller och differentierade celler, sin väg in i benmärgen efter att injiceras i blodbanan eller benmärg hålighet av möss. Som framgår av den definitionen, kan en forskare valde att studera de målsökande av hematopoetiska stamceller, progenitorceller eller differentierade celler identifieras av immunfenotypning och isoleras genom cell sortering. Typiskt vetenskapsmän injicera benmärgsceller utarmat för härstamning markörer och där…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline		Mediatech, Inc	21-031-CV
Sterile Fetal Bovine Serum		Valley Biomedical, Inc	BS3033
0.5M EDTA (pH 8.0)		Boston BioProducts	BM-150
Tryphan Blue solution		Mediatech, Inc	25-900-CI
ACK Lysing Buffer		Lonza	10-548E
Isopropranolol U.S.P.		Denison Pharmaceuticals, Inc
Vybrant DiD cell-labelling solution		Invitrogen	V22887
Vybrant DiI cell-labelling solution		Invitrogen	V22885