De sodio de sulfato de dextrano (DSS), administrada en el agua potable es un modelo murino estableció una lesión inflamatoria de la colitis aguda. Este protocolo describe el método para el tratamiento de DSS y la preparación de los tejidos.
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Artículo de método
Modelado de la colitis murino utilizando sulfato de dextrano sódico (DSS)
En este artículo
Resumen
Resumen
La colitis puede ocurrir por infecciones virales o bacterianas, ataque isquémico, o trastornos autoinmunes, colitis ulcerosa y en especial la variante de colon de la enfermedad de Crohn - Colitis de Crohn. Colitis aguda puede presentarse con dolor y distensión abdominal, mala absorción, diarrea, hematoquezia y moco en las heces. Estamos empezando a comprender las complejas interacciones entre el medio ambiente, la genética y la disfunción de la barrera epitelial en la enfermedad inflamatoria intestinal y los modelos animales de colitis han sido esenciales para avanzar en nuestra comprensión de esta enfermedad. Un modelo popular consiste en complementar el agua de bebida de los ratones con el sulfato de bajo peso molecular dextrano (DSS), que resulta en daño epitelial y una sólida respuesta inflamatoria en el colon de varios días
Protocolo
Parte 1: Modelo de reparación de lesiones Colitis
- Peso inicial se debe obtener para cada ratón antes de comenzar el tratamiento DSS.
- Haga un 3% (w / v) de sulfato de dextrano sódico solución de sal en agua y filtrar con un filtro de acetato de 0,45 m de celulosa.
- Reemplazar el agua potable en la jaula del ratón con la solución de DSS 3% durante cuatro días. Los ratones no deben tener acceso a cualquier otra fuente de agua (es decir, la exclusión consejos colocado en los sistemas de riego automático).
- En el cuarto día, reemplazar la solución de DSS con agua por un período adicional de tres días, lo que permite una cierta recupe....
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Discusión
Este protocolo se puede modificar el modelo de lesión aguda, curación de las heridas, lesiones o procesos crónicos de colon.
Modificación de lesiones agudas:
Tratamiento DSS ad lib durante 4-6 días, seguido por el sacrificio inmediato
Lesión-reparación de Modificación:
Lesión con 4-6 días de tratamiento DSS seguido de un período de recuperación de 3-4 días y el sacrificio (como se describe en el protocolo anteri.......
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Divulgaciones
Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por Vanderbilt IACUC.
Agradecimientos
Financiamiento proporcionado por el NIH (1 K08 DK080221-01) y los fondos de Vanderbilt de desarrollo institucional.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sal de sulfato de dextrano sódico | USB Corp., Affymetrix | 9011-18-1 | peso molecular 40.000-50.000 |
| Formalina fosfato tamponada al 10% | Fisher Scientific | SF100-4 | |
| Isoflurano, USP | Phoenix Pharmaceuticals, Inc. | NDC 57319-474-06 | |
| Casetes TISSUE PATH Macrosette | Fisher Scientific | 15182706 | |
| Jeringa BD de 10 ml | BD Biosciences | 309604 | |
| Alcohol etílico | Pharmco-AAPER | E190 | Diluir al 70 % con agua destilada |
| Aguja recta de alimentación de 20G | VWR international | 20068-612 | |
| Aguja PrecisionGlide de 27G1/2 | BD Biosciences | 305109 | |
| Tijeras de disección con punta fina/romas | VWR international | 82027-588 | |
| Pinzas de Waugh | VWR international | 82027-428 | |
| Sutura no absorbible | LOOK Surgical | SP116 | |
| Papel absorbente Whatman | VWR international | 28298-020 | Cortar según sea necesario |
| Filtro de acetato de celulosa libre de surfactantes (SFCA) Nalgene | Cole-Parmer | EW-06731-2 | |
| Calibre digital de compuestos de fibra de carbono | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Referencias
- Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic e....
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Reimpresiones y permisos
