Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Farelerde Karın Adezyonların Oluşturulması

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

Karın yapışıklıklar genellikle cerrahi veya karın içi enfeksiyonu takiben, inflamasyon yanıt olarak karın içinde formu skar dokusu bir form vardır. Yapışıklıklar kronik karın ağrısı ve kısırlık başlıca nedenidir ve ince bağırsak tıkanması 1 en sık nedenidir. Yapışıklıklar varlığı, ikinci bir karın operasyonu daha zor performans ve komplikasyonların 2 olasılığını artırır yapar.

Yıllar süren araştırmalara rağmen, yapışıklık oluşumunu altında yatan mekanizmaları yeterince anlaşılamamıştır. Peritoneal bir başlangıç ​​yaralanma ardından barsak ve karın duvarı birlikte, 3 yüzeylerini bağlayan bir pıhtı oluşturan fibrin bakımından zengin sıvının, bir eksudasyon neden olduğu bilinmektedir. Daha sonra, fibroblastlar ve diğer hücreler yapışkan uzaya göç ve bağ dokusunu 4 salgılar. yıllara aylarda yapışma kan damarlarını ve sinirleri geliştirerek olgunlaşır

Çeşitli ticari ürünler abdominal cerrahi (örneğin, Seprafilm) sonrasında doku kaynaşması oluşumunu azaltmak için tasarlanmış ürünler mevcuttur. Tüm bu ürünlerin mekanik bariyerler olarak hareket ve bağırsak döngüler ve karın duvarı 6,7 arasındaki fiziksel teması engelleyerek yapışma oluşumunu durdurmak. Cerrahi adhezyon bariyeri yapışıklık 8 oluşumunu azaltır kontrollü çalışmadan kanıtlara rağmen, pek çok cerrah anekdotal mekanik bariyer ürünlerin etkinliği ile hayal kırıklığı olmuştur.

Şu anda yapışıklık oluşumunda rol kesin süreçler tam olarak anlaşılamamıştır olduğu gerçeğini yansıtır herhangi bir ilaç tabanlı anti-yapışma tedaviler vardır. Özellikle yapışma oluşumunda yer olayların gelişmiş bir anlayış gerektirir yapışıklıkların oluşumuna katılan hücresel veya moleküler ajanlar hedefleyen bir terapi geliştirilmesi. çeşitli grups yapışıklık oluşumu 9-11 için önemli olabilir moleküler yollar belirledik. Hayvan modelleri yapışıklıklar oluşumunu incelemek için mükemmel bir ortam sağlar. Birçok çalışma, çok sayıda hayvan, özellikle de sıçan ve fare 6,12-14 yapışkanlıktaki cerrahi oluşturulmasını tarif yayınlanmıştır. Fare ve transgenik fareler ve fare tabanlı antikorların geniş yer fibrozis okuyan bizim deneyim göz önüne alındığında, yapışıklıklar çalışma için model olarak fare seçti. Bu yazıda, biz tekrarlanabilir ve güvenilir fare karın yapışıklıklar oluşturmak için geliştirilen tekniği rapor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Aşağıdaki protokol Stanford Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış ve araştırma hayvanların kullanımı ile ilgili tüm kurumsal etik kurallara uygun olmuştur.

Karın Adezyonların 1. Yaratılış

  1. bir hafta önce prosedüre antibiyotik chow diyet fare başlatın.
  2. cerrahi aletler ve öncesi ılık tuzlu su sulama çözümü Otoklav.
  3. % 2 solunan izofluran kullanarak fare anestezisi.
  4. Hızlı bir uygulama tarafından izlenen bir saç kesme makinesi kullanılarak - tüy dökücü ajan (5 10 sn), karın yüzeyinin çoğunluğu saç kaldırmak. İyice yavaşça dikkatle ılık suya fare alt yarısını dunking, opsiyonel olarak ıslak gazlı bez ve silerek tüy dökücü ajan kaldırın. İyice hayvan kurulayın.
  5. anestezik burun konisi içine hayvanın burun yerleştirin. Tüm Ameliyat sırasında dikkatlice r izlemekGerektiğinde hayvanın espiratory hızı ve anestezik akış hızı titre edilir.
  6. hipotermiyi önlemek için, bu tür bir ısıtma yastığı veya ısıtıcı bir lamba gibi ısıtıcı bir cihazın kullanımı.
  7. Önce karın prepping için, ameliyat sırasında kaymasını önlemek için fareyi karın üstünde ve altında yer bant şeritler ile fare sabitleyin. betadin ile karın dezenfekte edin, sonra% 70 etanol ile takip edin. traş edilmiş bölgeye kenarlarında saç dahil hazırlık mümkün olduğu kadar alanı içerir. fare üzerinde bir steril örtüyü yerleştirin. (Şekil 1)
  8. Subkutan 0.1 mg / kg buprenorfin veya 30 g fare için 3 mikrogram enjekte.
  9. cilt kesi olun.
    1. alt karın orta hatta başlayarak, forseps ile cilt kavramak ve keskin bir makas kullanarak deride sığ dikey kesim yapmak.
    2. makasla xiphoid superiorda kesim taşıyın. sadece cildi girmek için özen gösterin.
  10. karın kaslarının n olarakiç organları kaplayan ow görünür, forseps ile kas orta hat kavramak ve çok dikkatli bir şekilde keskin bir makas kullanarak içine küçük bir kesim yapmak. yanlışlıkla bir abdominal organ içine kesmek için değil emin olun.
  11. Küçük bir kesim ile periton alana giren ve kas tabakası abdominal organlar uzak çekin gördükten sonra ağzına makas ekleme ve dikkatle her iki yönde keserek superior ve altta kesim uzatmak. xiphoid gelen superior için inferiora mesane üzerinde kesi uzatın. (Şekil 2)
  12. Şimdi bağırsak maruz kaldığı, çekum bulun ve hafifçe exteriorize. Dişli veya keskin forseps ile çekum tutmaktan kaçının. Bunun yerine, böyle bir Adson dişli forseps gibi atravmatik forseps kullanabilir.
  13. zımpara kağıdı ile çekum aşındırmak.
    1. yüzey daha az parlak ve peteşiler appea oluncaya kadar 60 saniye - Yavaşça 30 100 zımpara kağıdı ile çekum iki tarafın tüm yüzeyini aşındırmakyüzeyde r. Cerrah sağ elini ise, sağa dönük ucu ile çekum yönlendirmek ve cerrahın sol işaret parmağı üzerinde çekum asmak için yardımcı olur. (Şekil 3)
    2. yanlışlıkla ince sekum duvarının bir perforasyona neden kolay olduğu gibi, yavaşça zımpara yapın. zımpara çekal yüzeyi boyunca hareket ettirildiğinde grittiness az miktarda hissedilebilir olmalıdır. zımpara çekum üzerinde alıcı art arda hissedilir, bu büyük olasılıkla çekal duvardaki bir gözyaşı neden olacaktır. zımpara tanecikleri çıkarmak ve bu aşırı yabancı cisim reaksiyonuna neden olabilir, karın kalmaz emin olmak için dikkatle izleyin.
    3. çekal duvardaki bir gözyaşı oluşursa, işlemi sonlandırmak ve hayvan euthanize.
    4. Bir çekal kan damarı zımpara tarafından kesilmesi ve kanama neden olur ise, gazlı bez ile en fazla iki dakika basıncı tutun. kanama, bu saatten sonra devam ederse Ancak, etrafında bir figür-of-sekiz 7-0 monofilament sütür koyunKanama nokta. Bu güvenilir hemen hemen her durumda kanamayı durduracak. Bu duvarın dahil kısmının nekroz sebep olma riski olarak, sütür içine çekal duvarın büyük miktarda dahil özen gösterin.
  14. sağ karın yan duvar zarar.
    1. sağ karın yan duvarın kas periton yüzeyine aşındırmak için zımpara şeridi kullanın. zımparalama ile burada daha çekum daha agresif olun ve sağ karın yan duvarın tüm yüzeyi tartakladığı görünene kadar devam eder. Cilt kas tabakasında deliklerden görünür şekilde sert zımpara kaçının. (Şekil 4)
    2. Bir Castro-Viejo iğne sürücüsünü kullanma, sağ karın yan duvarın kas tabakası içine 4-0 figure-of-sekiz iki ila dört ipek dikiş yerleştirin. yaklaşık 5 mm uzunluğunda kuyrukları bırakın. yanlışlıkla sütür içine bağırsak duvarı yakalamak için özen gösterin. (Şekil 5)
  15. W doldurulmuş bir 10 ml şırınga kullanılaraki, tuz ısındı bağırsakları birkaç kez sulanması. yanı sıra içini sulamak için karın boşluğuna tuzlu akışı yönlendirin. Fare altında yüzey batırılmış hale gelirse, fareyi üzerinde taşımak veya hipotermi önlemek için, yüzey değiştirin.
  16. Aşırı sulama emmek için kesi üzerine yerleştirilen bir steril gazlı bez kullanın.
  17. nişasta bir tutam alın ve sağ karın yan duvarın yüzeyine ve çekum her iki tarafında üzerine serpin. (Şekil 6)
  18. aktif kanama olmadığından emin olun. varsa, durana kadar kanama noktasına doğrudan baskı uygulamak için bir gazlı bez sünger kullanın. Kanama kolaylıkla durmaz, yukarıda tarif edildiği gibi bir hemostatik dikiş yerleştirin.
  19. forseps ve parmak künt ucunu kullanarak, yavaşça karın boşluğuna geri bağırsak itin. adezyon oluşumunu maksimize etmek için hemen yanında karın yanağında dikişlerle için çekum yerleştirin.
  20. CKarın kesi kaybedersiniz.
    1. 6-0 emilebilir örgülü sütür kullanılarak, kesi üstündeki kas tabakası içine çalışan bir dikiş yerleştirin.
    2. kas tabakasını bir araya getirerek, aşağı insizyon altına doğru dikiş çalıştırın. yaklaşık 3 mm seyahat ve her yeni dikiş ile 3 mm sokması alır. sütürler yerleştirirken özen yanlışlıkla bağırsağın bir ısırık almak değil.
    3. kesi alt kısmında, önceki ısırık sütür bir döngü bırakmak ve dikiş kravat enstrüman için bunu kullanabilirsiniz. 5 mm kuyrukları bırakarak dikiş kesin.
    4. Cildi kapatmak için 6-0 naylon monofilament sütür ile yukarıdaki üç adımları tekrarlayın.
  21. 20 ml / kg deri altı serum fizyolojik bolus (30 g fare için yaklaşık 0.5 ml) uygulayınız.
  22. dorsal kürk sulama sırasında ıslak olsun eğilimi gibi kuru gazlı bez kullanarak, iyice tüm hayvan kurutun.
  23. Gevşek kesi karşılamak için karın etrafında soyunma bir yapıştırıcı sarın. a sınırlamak vermemeye özenNimal bacakları ya da sargı ile nefes mekaniği.
  24. anestezi kurtarır dikkatle hayvan izlemek. Ağrı kontrolü için işlem sonrası buprenorfin 2-3 gün boyunca her 12 saat uygulayın.

2. Hasat Yapışma Doku

  1. İlk ameliyattan sonra yedi gün en az bekleyin. Yine, cerrahi aletler otoklav ve izofluran ile fare uyutmak.
  2. % 70 etanol, ardından betadin ile karın sterilize edin. Tıraş ve histoloji zorlaştıran cildi içeren yapışma örnek saç kaplı olmayacak şekilde karın, sağ tarafında başka saç atmaktadır.
  3. bağırsak genellikle orijinal kesi yapışmış olduğundan, bir sol paramedian kesi kullanın. karın alt ucunda başlayarak, orijinal kesi alt solunda yaklaşık 5 mm, küçük dişli forseps ile cilt kavramak ve keskin bir makas ile deri içine kesti. Bu üstün kesim uzatıngöğüs kafesi için ly. (Şekil 7)
  4. makas kullanarak, kas tabakası içine ve periton boşluğu girdikten sonra kesilmiş, kesi üst ve alt kesim uzatmak. Orijinal kesi muhtemelen de karnın sağ yan duvarına yapışır ve çekum ve ince bağırsak neden yapışkan doku olacaktır. (Şekil 8)
  5. Çekum seviyesinden, makas kullanılarak ve insizyon kenarında başlayan, bağırsak yapışık olduğu alanın çevresinde bir daire karın duvarı içine kesme başlar.
  6. Yukarıda Alternatif ve çekum seviyesinin altında, yavaş yavaş barsak deri ve karın duvarı yapışık bir "ada", sonuçta tüm yol yapışma etrafını kesin ve daire tamamlayın. (Şekil 9)
  7. Yine deri ve karın duvarı oluşan bir doku sandviç vererek, barsak oyulmuş ve barsak geri kalanından yapışık kısmını ayırmak, makas kullanarakbir tarafta, diğer tarafta bağırsak ve yapışkan dokuya arasındaki iki bağlantı. (Şekil 10)
  8. İsteğe bağlı olarak, keskin karın duvarı kas cilt ayırmak için sivri makas kullanın. histoloji için ekli cildi düşünün, ama sindirim ve hücre izolasyonu için cilt kaldırılabilir. doku histolojisi için kullanılacaksa, aşırı yapışkan arayüzü bozmadan mümkün olduğunca sütür materyali kaldırmak için emin olun. sindirim ve hücre izolasyonu için o kadar uzun sindirmek süzülür doku olarak yerine sütür bırakmak kabul edilebilir.
  9. yapışma dokusu eksize sonra, kurumsal hayvan kullanımı komitesi tarafından onaylanmış bir insani yöntemi kullanarak fare euthanize.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

cerrahi, çekum ve muhtemelen artan kolon, karaciğer ve ince bağırsağın döngüler sonra yedi gün sağ taraflı karın duvarına yapışık olmalıdır. (Şekil 8) Kesilen doku gömüldü, kesit ve mükemmel histolojik slaytlar verecektir edilebilir. (Şekil 11, 12)

Prosedür doğru gerçekleştirildiğinde, farelerin% 100 yedi gün sonra dikkate değer adezyonlar olmalıdır. Ölüm% 5 daha az olmalıdır.

Şekil 1
Şekil 1: Cerrahi Hazırlık (a) Hayvan bant ve betadin prepped karın güvence altına alınmıştır (b) betadine alkollü bir bezle temizlendi ve steril örtüyü yerleştirildi...om / files / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

şekil 2
Şekil 2:.. İnsizyon kesi xiphoid mesaneden seviyesinden uzanmalıdır bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,
Şekil 3:. Çekum Aşınma (a) sağ işaret ucu ile sol işaret parmağı üzerinde çekum Drapaj çekum baz sol başparmak ile stabilize sağlar (b) zımpara uygun bir seviyede bırakır. pürüzlü bir yüzeye buna körbarsak daha önce ve kanama birkaç peteşial puan ile daha az parlak. Gemiler burada en briskly kanayacak kadar ekstra bakım, mezenterik kenarına yakın zımparalama sırasında alınmalıdır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 4,
Şekil 4:. Karın Duvarı Aşınma organlar kenara ve kaba görünene kadar kas duvarının periton yüzey zımparalanır. Kan damarı sadece sık rastlanan bir karın duvarında zımpara yukarıda gördüğümüz ama. Önemli ölçüde kanamaya olmaz bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

1 "> Şekil 5,
Şekil 5:.. Şekil-of-eight Sütür Yerleştirme kas duvarına yerleştirilen bir ipek figure-of-eight dikiş, aşağı bağlı olmak önce bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 6,
Şekil 6:. Nişasta Uygulama nişasta hafif tabakası karın yan duvar ve bağırsak üzerinde serpilir. Dikişler kas duvarında görülen figür sekiz-iki. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 7,
Şekil 7,: İkinci Cerrahi Kesi (a) kesi sadece orijinal kesi solunda başladı (b) yeni kesi göğüs kafesi ile mesane seviyesinden uzanmalıdır... Büyük halini görmek için tıklayınız bu figür.

Şekil 8,
Şekil 8:. Ince bağırsağın (SB) Yapışma Döngüler sağ yan duvara ve birbirlerine yapışık bulunmaktadır. Görülen orijinal orta hat kesi, şimdi iyileşti, (A.Ş.). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 9,
trong> Şekil 9: Yapışma Doku excising. (a) ve (b) altta yatan bağırsak için deri ve karın duvarı yapışık bir "ada" yapışık alanı çevresinde tam bir daire keserek serbest bırakılır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 10,
Şekil 10:. Örnek bağırsak kesen diğer tarafında bir yan (a) ve deri üzerinde barsak dokusu bir sandviç verim (b). Görünür dikiş adet numune histoloji için kullanılacak ise kaldırılmalıdır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

1 ">:" keep-together.within sayfa = fo "jove_content Şekil 11,
Şekil 11:. Histoloji çekum (üst) yapışkan arabirimi üzerinden bağlı cerrahi gösteren deri ve karın duvarının (alt) sonra yedi gün bir yapışma bölümü lekeli bir hematoksilin ve eozin (H & E). Bu erken zaman noktasında çekum olasılıkla başta fibrin ve diğer moleküllerin ile karın duvarına yapıştırılır ve önemli yara dokusu henüz oluşmuş değil. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 12,
Şekil 12: immünofloresan Görüntüleme immunofluorescently α-düz kas ac lekeli ameliyat sonrası yedi gün yapışma bir bölümü.kalay, (solda) cilt saç köklerinin gerçek boyama ve çekal kas duvarı (orta) ve çekal luminal yüzeyindeki (sağda) non-spesifik boyama göstererek. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu prosedürde kritik adımlar şunlardır: iyice, perforasyon neden karın yanağında sütür yerleştirerek, ve nişasta doğru miktarda uygulamadan çekum aşındırma. Sadece çekum, ya da barsak küçük bir özel bölümüne zımpara kağıdı uygulayın. ince bağırsağın büyük miktarlarda zımpara yaygın kullanımı önemli ileus neden olmaktadır. yüzeyi pürüzlü hale yeterli kuvvetle çekum aşındırmak için özen, ancak duvar gözyaşları o kadar çok değil. Bu dengeyi bulmak biraz zaman alabilir. Her zaman dikkatli bir şekilde bağırsak işlemek ve bağırsak işlemek için keskin veya dişli forseps kullanmaktan kaçının. Yanlışlıkla forseps ile ince bağırsak mezenter kapma ya da çok zorla barsak çekerek kanamaya yol kolaydır.

Bir gözyaşı çekal duvarında meydana gelirse, işlem sonlandırılır ve hayvan ötenazi edilmelidir. Bizim tecrübelerimize göre, bir kaç gün sonra hayvanın ölümü ile çekal gözyaşı sonuçları, gözyaşı repa olsa bileiyi IRED. Buna ek olarak, sekum duvarın gözyaşı öngörülemeyen bir şekilde enflamatuar yanıtı etkileyecek dışkı dökülme neden olacaktır.

Hemostaz prosedürün sonunda tamamlanmış olması gerekir. Bazı kanama gemiler açık yeniden ve durmuş görünen sonra kanamaya başlar. Şüphe, kanama noktasının etrafında bir emilebilir monofilament figür sekiz-sütür yerleştirdiğinizde. Bu minimum dirençle doku da çekilebilir, çünkü ameliyat dikiş ipliğinin bu tür ipek veya örgülü absorbe edilebilir sütür tercih edilir. Ancak biz monofilament daha az inflamatuar olduğu gibi ipek veya örgülü emilebilir sütür, yapışıklıklar uyarılacak karın yanağında en etkili olduğunu bulduk.

Prosedürün sonunda nişasta uygulama doku kaynaşması oluşumunu artırmak için yardımcı olur, ancak nişasta aşırı miktarda ölümüne neden olan bir enflamatuar reaksiyonlar oluşur keşfetmişlerdir. nişasta lightl üzerine serpilir olmalıdırY. Bu katı bir tabaka oluşturur o kadar olmamalıdır.

Öncelikle bu işlemi öğrenirken, birkaç fare kaybetmek yaygındır. Bizim tecrübelerimize göre en sık görülen ölüm nedenleri nedeniyle bağırsak delinmesi aşırı kuvvetli bağırsak aşınmaya ve sepsis nedeniyle ileus nedeniyle dehidratasyon vardır. tam hemostaz ameliyat sonunda elde değilse kanama nedeniyle ölüm meydana gelebilir.

yapışma oluşumu yetersiz ise, daha fazla nişasta bırakarak, ya da karın yan duvarı üzerinde daha fazla sütür yerleştirerek, çekum ve sağ yan duvarın daha agresif aşınma kullanmayı düşünün. Bizim tecrübelerimize göre, yeterli yapışıklık oluşumunda daha az karın sonuçları yeniden açılması az bir süre kala bir hafta bekliyor. Ameliyattan sonra farelerin ölüm oranı yüksek ise, diğer yandan, hemostaz için daha yakından incelenmesi ve daha az nişasta uygulayarak, çekum az agresif aşınma kullanmayı düşünün. Dikkatli bir şekilde izlemek için de önemlidirAmeliyat sırasında fare solunum hızı. Bu prosedür ile cerrah kazandığı deneyim sonra, mortalite% 10 daha az olmalıdır.

Bu teknik, öncelikle çekum ve sağ karın yan duvar arasındaki yapışıklıkları oluşturmak için tasarlanmıştır. Yapışıklıklar da genellikle küçük bağırsak, karaciğer ve orta hat kesi arasında oluşturacaktır. Bu tekniği kullanarak genelde karnın sol tarafında yapışıklıklara neden olmaz. Bu tekniğin bir sınırlama bağırsak ve karın duvarı arasında yapışıklıklar bağırsak döngüler arasındaki yapışıklıklar daha oluşturmak için daha muhtemeldir olmasıdır. Buna ek olarak, genellikle birden fazla ameliyat oldu insanlarda görülen yapışkan doku, bir tamamen donmuş karın tam yol açması muhtemel değildir.

Giriş bölümünde tartışıldığı gibi, birçok teknik fareler ve diğer türler, özellikle de sıçanlarda ADEZYONLARIN üretilmesi için, literatürde 6,12-14 tarif edilmiştir. daha az yayınlanmış Protoco vardır Farelerde yapışıklık yaratılması için ls. Biz farelerde yapışıklık yaratma sıçanlarda daha zordur, çünkü çoğu araştırmacı sıçan kendi tekniğini geliştirmek için seçtim spekülasyon. Ancak, transgenik fareler ve anti-fare antikorları yüksek kullanılabilirlik, çünkü biz büyük teknik zorluk rağmen, farelerde yapışma yaratılması için sağlam bir modeli var değerli olduğuna inanıyoruz. Biz yayınlanan sıçan protokolleri birçok denedikten sonra bu protokolü geliştirdi. Biz çekum üzerinde elektrokoter kullanımı gibi sıçan yapışıklıklar, oluşturmak için yöntemler, genellikle fareler ölmesine neden olduğunu buldular. Biz yalnız yan iskemik düğmeleri yerleştirerek, ya da sadece çekum aşındırma gibi tek bir müdahaleyi kullanmak teknikleri ile üretilen yapışıklıklar yoğunluğu memnun değildi. Burada mevcut teknik mortalite ve minimize sürekli ederken yapışıklıkları üretmek için, deneme yanılma yoluyla buldum müdahalelerin bir kombinasyonunu temsil etmektedir.

Bu tekniğin sürekli çekum ve yan duvar arasındaki oluşturmak için yapıştırıcı dokusu sebep olur çünkü içerik ">, biz adezyon oluşumunu azaltmak için tasarlanmış deney müdahalelere idealdir olduğuna inanıyoruz. Ayrıca, bu tekniktir moleküler yollar ve hücre türlerini araştırmak için kullanılabilir yapışıklık oluşumunda çıkıyor. yapışma doku kolayca çıkarıldı ve histoloji için hazırlanan ve verimleri mükemmel histolojik görüntüleri (12, 11 Şekiller) olabilir.

Bazı araştırmacılar yapışıklıklar zaman 100'den az% oluşturduğu bir model isteyebilirler. nişasta uygulanmasını atlama kabaca% 80 yapışma oranını azaltacaktır. sağ karın yan duvarına yerleştirilen ipek dikişlerle sayısının azaltılması daha da yapışma oranını azaltacaktır.

Bizim tecrübelerimize göre, ameliyattan bir gün sonra yedi bağırsak karın duvarına sürekli yapışık ilk kez noktasıdır. Bununla birlikte, diğer zaman noktaları olarak daha uygun olabilirProjenin odak. Örneğin, yapışma uzaya nötrofillerin ve makrofajların göç ilgilenen araştırmacılar ameliyat sonrası ilk beş gün içinde doku hasat isteyebilirsiniz. Öte yandan, fibroblastlar tarafından kollajen depozisyon işlemi ilk hasardan sonra hafta içinde yer alır, ve bunun için ameliyattan sonra birkaç hafta aralıklı zaman noktalarında doku incelenmesi daha uygun olacaktır.

Bu yordamı gerçekleştirirken Cerrahi loupes cerrahi alanın büyütme için çok faydalıdır. Operatif mikroskop da kullanılabilir, ancak farklı açılardan ameliyat alanını incelemek için cerrahın yeteneğini sınırlar olabilir. Prosedür, aynı zamanda, hiç büyütme ile yapılabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları olduğunu beyan ederim.

Acknowledgments

CDM Amerikan Cerrahlar Koleji (AKS) Resident Araştırma Bursu ile desteklenmiştir. MSH California Rejeneratif Tıp Enstitüsü (CIRM) Klinik Fellow eğitim bursu TG2-01159 tarafından desteklenmiştir. MSH, HPL ve MTL Maksillofasiyal Cerrahi American Society (ASMS) / Maksillofasiyal Cerrahlar Vakfı (MSF) Araştırma Bursu Ödülü tarafından desteklendi. HPL NIH hibe R01 GM087609 ve Anthony Shu onuruna Ingrid Lai ve Bill Shu bir hediye ile desteklenmiştir. HPL ve MTL Pediatrik Rejeneratif Tıp Hagey Laboratuvarı ve Meşe Vakfı tarafından desteklenmiştir. MTL Gunn / Olivier Fonu tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
  3. diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
  4. Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
  5. Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
  6. Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
  7. ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
  8. Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
  9. Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
  10. Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
  11. Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
  12. Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
  13. Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
  14. Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).

Tags

Tıp Sayı 114 anatomi cerrahi fare karın yapışma ince bağırsak tıkanması fibrozis skar oluşumu
Farelerde Karın Adezyonların Oluşturulması
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter