Summary
Bu çalışmada bir basitleştirilmiş cerrahi müdahale ve kavernöz sinir stimülasyonu sinir-elektrot yalıtım ile gerçekleştirmek için teknik açıklar karmaşık silikon yapıştırıcı ve intracavernous basınç ölçüm kullanarak.
Abstract
Kavernöz sinir (CN) uyarılması ve intracavernous basınç (ICP) ölçümü kullanılan kapsamlı bir şekilde test etmek ve değerlendirmek için erektil disfonksiyon terapiler. Ancak, kullanılan yöntemleri laboratuvarlar arasında değişir ve tuzaklar hareketsiz var olmak. Bu çalışmanın amacı bir güvenilir ve tekrarlanabilir model sağlayacak bir cerrahi teknik açıklamak için oldu. İschiocavernosus kas, kural yumrunun tarihinde ekleme noktasında teşhir ederek penis crus en az diseksiyon ve yapıları erektil işlev ilgili yaralanma ile cannulated. Kaldırma ve kurutma, gerek kalmadan CN tekrarlanan uyarılması elektrot-sinir kompleksi yalıtmak için bir 125 µm manik depresif gümüş elektrot ve Biyouyumlu silikon yapıştırıcı kullanarak sağlanır. Bu yöntem germe ve sinir kurutma azaltarak neuropraxia engeller ve elektrik kaçağı inkâr ve alternatif yollar uyarılması önleme sinirin tam izolasyon sağlar.
Introduction
Vivo çalışmada deneysel hayvanlarda erektil fonksiyonunun 1863 Eckhard1öncü deneysel çalışmaları ile başladı. Elektrostimülasyon pelvik sinir köpeklerde artan ICP ikna etmek için kullanıldı. 20 yy benzer deneysel protokoller kediler ve tavşan, köpek, maymun gibi büyük hayvanlar kullanılmaya başlanmıştır. Bir sıçan erektil işlev değerlendirmek ilk Quinlan ve ark. 19892tarafından geliştirilmiştir. Yöntem beri modifiye edilmiş ve birkaç diğer gruplar34tarafından güncelleştirildi. Bugün, en yaygın kullanılan hayvan modeli patoloji erektil disfonksiyon eğitim ve gelişmekte olan tedavi seçenekleri değerlendirmek için faredir. Sistemik kan basıncı ICP bir artış ikna etmek için Şah damarı, ölçmek ICP penis crus cannulation ve CN uyarılması bir satırını kullanarak kayıt yordamı ana adımları içerir. Çeşitli araştırmacılar model iyileştirdiyseniz rağmen onun tekrarlanabilirlik bir sorun olmaya devam etmektedir ve değişken sonuçları farklı Laboratuvarları tarafından bildirilmiştir. Çeşitli tuzaklar, devam.
Önceki Makaleler5,6,7,8,9,10 penis kavernöz vücut cannulation için degloving ile tam penis pozlama kullanımını açıklar. Bu manipülasyon olarak en iyi bir yaklaşım değildir ve yıkıcı diseksiyon erektil işlev için gerekli olan yapılar için yaralanma neden olur. CN diseksiyon de açıklanan10,11oldu, ama sinir stimülasyonu deneysel sonuçları etkileyebilecek Multipl faktörler nedeniyle en uygun değil. CN stimülasyon tekniği çevreleyen doku sinir sinir konumlandırılmış, bipolar kanca elektrodu, çekerek ve her stimülasyon önce sinir kurutma tarafından kaldırma içerir. Bu sinir hasarı ve elektrik geçerli sızıntı, azalmış yanıt veya ICP alternatif yolları örneğin, Pelvik Taban kasları, mesane uyarılması yoluyla yanlış artış elde edilen ve gastrointestinal değişik derecelerde açabilir yolu12. Tüm bu faktörlerin tekrarlanabilirlik sınırlayın.
Bizim çalışma sırasında derinlik ve anestezi türünü ICP üzerinde büyük bir etkiye sahip görülmektedir. Anestezikler kullanılan sodyum Fentobarbital, ketamin/xylazine veya ketamin/midazolam enjeksiyon veya isoflurane/oksijen zehirlenmesi olabilir.
Burada biz basitleştirilmiş bir cerrahi yöntem tanımlamak ve veri deneysel protokol standardizasyon destek sağlamak.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Hayvanlar, Güney Danimarka Üniversitesi hayvan bakım tesisi kurumsal yönergelere göre yer. Tüm hayvan deneyleri Ulusal Sağlık Enstitüleri Kılavuzu bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Bu akut, Sigara survival cerrahi bir işlemdir.
1. hazırlanması boru, elektrot ve cerrahi işlem için aygıtlar
- Mikrocerrahi cihazlar kullanın: Cerrahi makas, açılı mikro makas, doku forseps, Dumont #7 çifti ve #5 eğri mikro forseps, mikro iğne bağı ve traktör.
Not: Bu akut bir yordam olarak, aletleri sterilize gerek yoktur. Kullanın sonra temiz ve ipuçları % 70 etanol ile silin. - Tüp % 70 etanol içinde ıslatın ve sonra steril %0,9 ile flush NaCl ile 100 U/mL heparin kullanmadan önce. Hava kabarcıkları içine belgili tanımlık sistem tanıtımı önlemek için dolu boru bırakın.
- Polietilen (PE)-50 boru bir kateter ICP ölçüm için yapmak için bir 20-30 cm uzunluk parça kesti. Tüp basıncı nemlendirme azaltmak olabildiğince kısa olduğundan emin olun.
- İğne ortada tatili kadar bir steril 24 G iğne yan-yan viraj. Parça eğimi PE boru penis crus içine eklenmek distal ucuna bağlayın. Diğer yarısı bağlantı için basınç detektörler hub'ına ekleyin. Sistem heparinized serum (100 U/mL) doldurun.
- İki kutuplu Teflon kaplı elektrot yapmak için eşit uzunlukta kesilmiş iki 125 µm gümüş teller. Masanın kenarına teller takın ve onları birlikte iş parçacığı için bir parça bant kullanın. Daha sonra elektrot bir siyah plaka ekleyin.
- Teflon içine küçük bir kesi yapmak ve Teflon kaplama elektrot uçları kapalı 4-5 mm uzunluğunda şerit için #5 mikro forseps kullanın. İpuçları bile uzunluğu ulaşmak ve uçları künt kenarında bir neşter bıçak bükme tarafından kanca oluşturmak için bir neşter ile kesti.
- Biraz yukarı doğru işaret kanca ile siyah plaka kenarına uzanan ucuyla elektrot teyp. 10 s ve şal bir tutkal kabarcık elektrot kanca 1-2 mm çapında için plastik tabakta silikon yapıştırıcı karışımı.
- Yaklaşık 5 dakika kullanım (şekil 1) önce kurumasını bekleyin. Şerit Stimülatörü bağlantı için izin vermek için Teflon diğer ucunda, daha uzun bir bölümünden.
Not: Distal ucunda kanca yeniden yapıyor ile elektrot birçok kez yeniden kullanılabilir.
2. hayvan hazırlanması
- Hayvan anesthetizing sonra karın, boyun ve perine alt yarısının tıraş. Hayvan povidone-iyot tarafından üç kez takip % 70 alkol ile fırçalayın. Fareyi bir sırtüstü pozisyonda bir ısıtmalı cerrahi pedi yerleştirin. Veteriner göz merhem uygulamak ve % 2.5 isoflurane ve 0, 8 L/dak oksijen taşıyıcı olarak ile burun konisi için anestezi geçmek.
Not: İsoflurane ve anestezi kabul edilebilir bir düzeyde sağlamak için oksijen düzeyini ayarlayın.
3. presurgical hazırlık
- Çalışma bir mikroskop altında tüm cerrahi işlem gerçekleştirmek: 3,15 X 20 X arasında değişen bir büyütme yeterlidir. Kullanım eldiven ve ameliyat boyunca temiz bir ortam sağlamak. Fareyi bir örtüsü yerleştirin.
4. Ischiocavernosus kas diseksiyon ICP ölçümü için
- Bir neşter, düz makas kullanın ve Dumont #7 kavisli 1 cm dikey yapmak için mikro forseps cilt kesi 5 mm lateral penis tabanı düzeyinde başlayan ve aşağıya doğru (şekil 2A) uzanan orta hat için. Bir pamuklu çubukla kullanın ve fasya lateral skrotum (şekil 2B) için dikkatlice ayırın. Fasya anatomi sonra makaralara eklemek ve bir pamuk-uçlu-kural yumrunun (şekil 2C) bulmak için takas ile muayene et.
- İschiocavernosus kas görüntülenir kadar bu noktada yağ dokusu medial teşrih (şekil 3A). Dumont #7 eğri mikro forseps bir çift kullanın ve boyuna kas ayrı. Tunica albuginea parlak beyaz yapı (şekil 3B) olarak görünür. Mikro forseps ve mikro makas kullanarak, yeterince onun ders (şekil 3 c) görmek için tunica albuginea ortaya çıkarmak.
- Sistem ayarlarını kalibrasyon sonra tüp penis crus (şekil 4) paralel gidiyor emin perine üzerinde deri yoluyla yerleştirin. Çizginin yerinde bırakmak ve belgili tanımlık kesme serum fizyolojik ile nemli tutmak.
5. CN diseksiyon uyarılması için
- 2 cm daha düşük, karın Ensizyon, ilk olarak, bir neşter ve bir çift düz makas ve mikro forseps kullanarak deri yoluyla olun. Linea boyunca fasya ile eşleşen bir giriş oluşturmak alba ve temel kas doku mesane ve prostat duyurmak.
- Çok iyi bir pozlama elde etmek için kullanın. Prostat açık görsel olarak büyük pelvik sinir düğümü (MPG) elde etmek için yağ dokusundan ayırmak için pamuk-uç temizleme bezi kullanın ve CN, prostat (şekil 5) dorsolateral yönü üzerinde çalışan.
- Sonra görselleştirme MPG ve CN, dikkatli bir şekilde sinir 2-5 mm için MPG distal açılı mikro makasla (şekil 6a) örten fasya deşmek. #5 mikro forseps kullanımı ile her iki tarafta bir sinir ve bir 4-mm uzun bölümü (şekil 6b) ücretsiz için altında doku Yayılı ve sinir (şekil 6 c) altında 9-0 dikiş kaydırın.
- Sinir sinir (şekil 7b) çevresinde İki kutuplu elektrot kanca yerleşimini kolaylaştırmak için dikiş (şekil 7a) yardımıyla hafifçe yükseltmek. Sinir için 5 s. kuru iğne ve Tutkal kanca ve sinir (Şekil 7 c, d) çevresi için geçerli bir asistan karışım iki bileşenli silikon yapıştırıcı bir insülin ucu ile izin. Biraz kuru tutkal izin vermek yaklaşık 1 dakika için elektrot çekerek sinir yukarıda tut.
- Dışında herhangi bir çekmek veya elektrot büküm önlemek için sağ tarafta Traktör Traktör kaldırın. Maruz kalan organların serum içinde belgili tanımlık kesme üzerinde batırılmış tuzlu ve yatıyordu gazlı bez ile ıslak.
6. kavernöz vücut Cannulation ICP ölçümü için
- Ekartör kullanarak tunica albuginea görselleştirme geri. Crus tahrif edecek gibi traktör ischiocavernosus kas değil eklemek emin olun.
- İğne takın ve tunica albuginea tanıtımı önce boru heparinized serum fizyolojik ile yıkayın. Gergin, bir elinde Dumont #7 eğri mikro forseps kullanarak tunica albuginea (non-baskın), tunica albuginea ve üstteki kas geri kalanı ekleme noktasına distal basılı tutmak. İğneyi diğer baskın elinde düz mikro Forseps ile sık ve onu tanıtmak kavernöz vücut (şekil 8) ders ile paralel.
- 5-8 mm iğne kavernöz vücudun içine itin. Tüp Temizleme ve crus üzerinde yolun (Şekil 9) test etmek için tuşuna basın. Hiçbir sızıntı olduğundan emin olun. Hatta yanlışlıkla çekerek önlemek için bant ile tabloya boru vidaları sıkıştırın. Ekartör kaldırın.
7. CN uyarılması
- Kayıt programı (örneğin, Spike 2) ile çalışan, sürekli olarak her iki intracavernous ve ortalama arter basıncı kaydetmek.
- Bir uyarıcı (örneğin, SD9 çim aletleri, bkz: Malzemeler tablo) CN uyarılması için aşağıdaki parametreleri ayarlayın: 1,5 mA, frekans 16 Hz, 3 V gerilim ve darbe genişliği 1 dk stimülasyon en az 5 Bayan uygulamak 50 s, geçerli Elektrodlar arasında bekletin.
Not: İlk elektrodlar genellikle azalmış yanıtın (şekil 10) yol.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kullanılması önerilen stimülasyon ayarları bu protokolle inhalasyon anestezi isoflurane %2.0 oksijen ile altında 0, 8 L/dak, üretmek sonuçları Şekil 11 ve şekil12', gösterildiği gibi olmadığı bir yerde birden fazla arka arkaya Elektrodlar arasında 75-80 mm Hg. şekil 13 gösterir aynı kararlı yanıt 20 dk stimülasyon yanıtı ile üzerinde istikrarlı 73-77 mm Hg. Test hattı ICP ölçüm için tüp kızarma ve crus (Şekil 9) dokunarak tarafından. Hızlı yanıt temel için geri iyi yerleştirilmiş bir satır özelliğidir. Tunica albuginea bütünlüğünü bozuksa, test daha düşük en yüksek basınç ve temel kızarma ve dokunarak sonra başa yavaş yanıt ve azalmış bir yanıt (Şekil 14) uyarıcı ne zaman sonuçlanır. Ne zaman kızarma ve elektrodlar sırasında kanama heparinized NaCl kaçağı da olacağını.
Türleri ve anestezi düzeyde yanı sıra oksijen kullanımı ICP üzerinde önemli bir etkisi vardı. Şekil 15 gösterir etkisi isoflurane farklı düzeylerde ICP, azalan bir yanıt ve daha az istikrarlı Yaylası. %2 İsoflurane ile vardı istikrarlı bir yanıt 78 mm Hg. isoflurane %3,5, ancak, birden çok, 34 mm Hg için hızlı bir % 50 düşüş sonuçlandı konsantrasyonu artan üzerinde birden fazla elektrodlar ile ICP ölçümdeki sonraki elektrodlar. Aynı etkiyi %2.0 isoflurane %3.0 geçiş, nerede bir %19 yanıt olarak azalma gözlendi ve %2.5 %5, nerede bir daha hızlı azalma % 70 yanıt olarak görülmüş gözlendi. Kan basıncı tüm elektrodlar sabit kalmıştır. İsoflurane/oksijen anestezi ameliyat ve fentanil/midazolam (isoflurane kesildi iken) önerilen doz % 25'i alınan ilk elektrodlar, sırasında kullanarak anestezi de, fareler, benzer şekilde kararlı bir tepki, ama o vardı isoflurane (şekil 16) karşılaştırıldığında fentanil/midazolam anestezi sırasında 25 oranında arttı.
Yönetim oksijen burun konisi üzerinden yaklaşık %20 99-100 61-%75 kandaki oksijen doygunluğu artmış s. Oksijenlenme durdurulduğunda, aynı azalma yaklaşık 1 dk. tansiyon elektrodlar istikrarlı, ama burun konisi (0, 8 L/dak) üzerinden oksijen yönetimi tarafından azaltarak maksimum ICP ölçüm üzerinde büyük bir etkisi vardı görüldü 35-%45 arka arkaya elektrodlar (şekil 17).
Resim 1 . İki kutuplu Teflon kaplamalı gümüş elektrot. (A)tutkal kabarcık kaplanmış ve kaplanmamış elektrot arasında geçiş bölgesinde. (B) Distal elektrot 2 cm sıkıca braded. (C) paralel kaplamasız kanca 1 mm ayrı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 . Kavernöz ceset Diseksiyon - yerler. (A) 1 cm dikey cilt kesi, aşağıya doğru başlangıç 2 mm lateral penis tabanından. (B) şerit lateral testis için ayrılmış pamuk uçlu temizleme bezi kullanarak. (C) görünümü sonra makaralara yerleşimini çalışma alanının (pm: pyramidalis kas, bu: crus için kural yumrunun ekleme noktası). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 . Tunica albuginea teşhir. (A) ischiocavernosus kas (ok). (B) Tunica albuginea (ok). (C) düşük güç büyütme sahası kavernöz vücudun gösterilen. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 . Satırı kavernöz basınç kayıt için. İğne ile kavernöz vücut (ok) paralel perine üzerinde deri yoluyla tanıttı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 . Pozlama MPG işaretlenmiş ok ve prostat dorsolateral yönü üzerinde dikey çalışan CN. Büyük pelvik gangliyon (MPG) oku, kavernöz sinir (CN) olarak işaretlenmiş. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6 . Diseksiyon kavernöz sinir. (A)fasya örten kavernöz sinir mikro makasla kesme. (B) sinir mikro forseps kullanarak temel dokudan ayıran. (C) 9-0 bağ sinir altına yerleştirerek. Büyük pelvik gangliyon (MPG) oku, kavernöz sinir (CN) olarak işaretlenmiş. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 7 . Bu ne küstahlık çengel. (A)sinir dikişi üzerinde hafifçe çekerek yükselen. (B) sinir elektrot kanca içinde dinleniyor. (C) sinir ve elektrot karmaşık Biyouyumlu silikon yapıştırıcı ile izole. (D) ek tutkal kabarcık tamamen sinir-elektrot karmaşık izole etmek için eklendi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 8 . Tunica albuginea cannulation. 23 G iğne PE-50 boru tunica albuginea eklenen bağlı. Okla işaretli ekleme noktası. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 9 . İntracavernous hattı sınamakta. Yanıt bir doğru çizgi yerleşimi ile gördüm. Not satır ve cevaben pıtırtı üstünde crus kızarma. Ayrıca, hızlı basınç düşüşü başa temel unutmayın. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 10 . İlk yanıt kavernöz sinir stimülasyonu için. Azalmış ilk yanıt. İlk 50 mm Hg uyarılması ve dalgalanan bir plato. İkinci ve üçüncü 66 mm Hg uyarılması. Aşağıdaki ölçümler 73 mm Hg. normal düzeyde kaydedildi Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 11 . Kavernöz sinir stimülasyonu ve intracavernous basınç kayıt tekrarladı. Bu iletişim kuralını kullanan sonuçlar kararlılığını gösteriyor. On arka arkaya elektrodlar arasında 75-78 mm Hg. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 12 . Kavernöz sinir stimülasyonu ve basınç kaydı. Yaklaşık 30 arka arkaya elektrodlar ile < 6 mm Hg değişkenlik basınç. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 13 . Sürekli stimülasyon 20 dk. süren Sonunda, ancak sonraki elektrodlar, artan dalgalanma 1 dk dinlen sonra istikrarlı bir yanıt üretti. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 14 . Tunica albuginea sızıntı. Uzun süreli yanıt-e doğru geri temel kızarma ve dokunarak sonra. Azalan yanıt stimülasyon sonra. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 15 . İntracavernous basıncı anestezi doz etkisi. Azalmış ve isoflurane artırarak daha dalgalanan yanıt istikrarlı yanıt %2 ilk iki ve son üç elektrodlar ile karşılaştırıldığında. Sürekli gösterilen üstte mavi izleme arteriyel basınç demek. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 16 . İntracavernous basıncı anestezi türü etkisi. İlk elektrodlar isoflurane anestezi göster'in altında gerçekleştirilen bir basınç artışı 80 mm Hg, fentanil/midazolam verildi sonra 110 mm Hg. karşılık olarak bir artış vardı Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 17 . Burun konisi üzerinden oksijen yönetimi etkisi. Burun konisi üzerinden oksijen yönetimi sona erdirme kavernöz sinir stimülasyonu ile kavernöz basınç artışı önemli bir azalma sonuçlandı. Ortalama arter basıncı etkisi belirtilmişti (mavi izleme yukarıda). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 18 . Gerilim etkisi stimülasyon basınç yanıt. 1.5-6 V arasındaki gerilim bir aynı basınç yanıt üretti. Yanıt azalmış 1,5 aşağıda Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Penis crus cannulation ICP kayıt için basitleştirilmiş bir cerrahi teknik ve yalıtım CN elektrostimülasyon için açıklamak için bu çalışmanın asıl hedefi oldu. Biz ameliyat basitleştirmek ve CN stimülasyon ile tekrarlanabilir kayıtları ICP artış sağlamak kavernöz vücut diseksiyon değişiklikler tanıttı. 1 cm dikey cilt kesi ile aşikar kural yumrunun kılavuz kullanarak penis tabanına yanal ischiocavernosus kas ve tunica albuginea iyi bir pozlama elde. Bu yordamı daha hızlıdır (küçük 15 dk) edebiyat ve nedenleri minimal doku bozulması2,3,4' te açıklanan daha.
Çengel, kaldırma, CN stimülasyon şu anda kullanılan tekniğin içerir ve her elektrostimülasyon önce CN kurutma uygulanan10. Bu teknik koşulları her uyarılması için aynı kalır garanti etmez. Ayrıca, sinir kaldırma bir micromanipulator kullanımını gerektirir ve germe ve neuropraxia için yol açabilecek sinir bırakmadan tekrarladı. Geçerli CN stimülasyon tekniği için karşılaştırıldığında, sinir-elektrot karmaşık yalıtmak için Biyouyumlu silikon yapıştırıcı kullanımı iki örneklerine uzanan sinir sıklığını azaltır; kez manik depresif elektrot sinir çevresinde yer ve sinir ve tutkal kullanarak elektrot yalıtmak için bir kez. Daha sonra birden çok neurostimulations sinir manipülasyonlar için gerek kalmadan gerçekleştirilebilir.
Basınç kayıt için kavernöz vücut içine iğne ekleme önemli bir adım teşkil eder. Yeni kullanıcılar bu tekniğin deneyler başlamadan önce bu bölümü çalışmalısın. İğne crus dağıtırken, bu crus esnetileceğini ve iğne dağıtılır önemlidir onun ders için paralel. Diğer kritik çevreleyen doku ve yerleştirme elektrot altında onun diseksiyon sırasında işleme sinir adımdır. Diseksiyon kendisini zor bir görev değildir, ancak herhangi bir streç veya sinir ezmek zarar görmesine neden. Bizim bu adımı bir micromanipulator ihtiyacını gereksiz kılar ve sinir işleme basitleştirir. Sinir yalıtmak ve sinir ve elektrot arasında istikrarlı ve güvenilir temas sağlamak için Biyouyumlu silikon yapıştırıcı kullanımı gerekli manipülasyon azaltır. Silikon yapıştırıcı de vivo içinde neurostimulation uygulandığı diğer hayvan modellerinde kullanılabilir.
Çok sayıda çalışmalarda listelenen stimülasyon parametreler 14-20 Hz ve 1.5-12 V11,13,14farklı. Bu teknik bir 1,5 kullanarak o stimülasyon gösterdi anne, 16 Hz, 3 V ve 5 ms darbe üretilen tam bir yanıt. Stimülasyon parametreleri ile artan, ICP (Şekil 18) artırmaz. Bu eşiğin arter (kavernöz arter), arterioler ve sinüsoidal düz kas gevşeme, uyarının harekete geçirilmesine karşılık için olan tüm parametreleri kullanarak stimülasyon refleks tetiklemek yeterli ve tam bir fizyolojik yol açacağı göstermektedir yanıt. Frekans, genlik veya darbe genişliği sonraki artış daha güçlü fizyolojik yanıt yol açmaz ve nörotransmitter tüketmek veya bile sinir yaralanmalara neden olabilir. Yukarıda açıklanan parametreleri ile biz 30 kısa bir dinlenme süresi ile tekrarlanabilir bir yanıt elde edebildik s 40'tan fazla kez üst üste.
Anestezi derinliği açıkça fizyolojik yanıt etkiler. İnhalasyon anestezi ile bu de kontrol edilebilir, ancak en yüksek % 25 daha düşük, fentanil/midazolam anestezi enjeksiyonu ile yönetilen karşılaştırıldığında yanıttır. Biz isoflurane doz ayak çimdik yanıt ortadan kaldırmak gerekli minimum isoflurane konsantrasyon tarafından belirlenen düzeyde muhafaza olabilir görülmektedir. Çoğu müfettişler, sodyum Fentobarbital, fentanil/midazolam, ketamin/xylazine veya ketamin/midazolam15ile enjeksiyon anestezi kullanın.
Yayımlanan makaleler hiçbiri kontrollü oksijen kullanımı bahsetti. Bu çalışmada sonuç bu ICP üzerinde önemli bir etkisi olduğunu göster. Bu nedenle, kullanılan anestezi türü ne olursa olsun, hayvan burun konisi oksijeni almasını önemlidir.
Fare kullanımı onların boyutu ve esneklik nedeniyle avantajlıdır. Önceden yayınlanmış çalışmalarda her ikisi de ve bu araştırmada doğruladı, Sprague Dawley Rat 6-12 hafta yaşlı aralığında CN uyarılması için sağlam bir tepki için gösterilmiştir ve 200-550 g. kullanma fare ağırlığında daha zor ama yararlı nedeniyle transgenik teknoloji12kullanılabilirliği.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment - Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA |
References
- Eckhard, C. Untersuchungen über die Erektion des Hundes In: Beiträge zur Anatomie und Physiologie. , Vol. Band III Giessen: Ferber 123-166 (1863).
- Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
- Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
- Martinez-Pineiro, L., et al. Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters. Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).
- Hayashi, N., et al. The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model. J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).
- Burnett, A. L., Becker, R. E. Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury. J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).
- Yamashita, S., et al. Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model. Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).
- Burnett, A. L., et al. GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction. J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).
- Lin, H., et al. Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury. J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).
- Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
- Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
- Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article. J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).
- Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
- Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency. J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).
- Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).
