Un protocolo para adquirir la Tenocyte degenerativa de los seres humanos

Soo-Hong Han; Hyung Kyung Kim; Jong-Ho Ahn; Dong Hyeon Lee; Minjung Baek; Geunhee Ye; Joong-Myung Lee; Kyunghoon Min; Chihoon Oh; Soonchul Lee

doi:10.3791/57634

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Artículo de método

Un protocolo para adquirir la Tenocyte degenerativa de los seres humanos

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DOI:

10.3791/57634

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9 de junio de 2018

Soo-Hong Han^*¹ , Hyung Kyung Kim^*² , Jong-Ho Ahn^*¹ , Dong Hyeon Lee³ , Minjung Baek¹ , Geunhee Ye¹ , Joong-Myung Lee¹ , Kyunghoon Min⁴ , Chihoon Oh¹ , Soonchul Lee¹

¹Department of Orthopaedic Surgery, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine, ²Department of Pathology, Kyung Hee University Hospital at Gangdong, Kyung Hee University School of Medicine, ³Department of Physiology, CHA University School of Medicine, ⁴Department of Rehabilitation, CHA Bundang Medical Center, CHA University School of Medicine

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

In vitro uso de tenocytes degenerativa es indispensable la investigación de la eficacia del novedoso tratamiento de la Tendinopatía. Sin embargo, la mayoría estudios utilizan solamente el modelo animal o una tenocyte saludable. Proponemos el siguiente protocolo para aislar tenocytes degenerativa humana durante la cirugía.

Resumen

Tendinopatía, una condición dolorosa que se desarrolla en respuesta a la degeneración del tendón, va en aumento en los países desarrollados debido al aumento de la actividad física y mayor esperanza de vida. A pesar de su creciente prevalencia, la patogenia subyacente sigue siendo confusa, y el tratamiento es generalmente sintomático. Recientemente, se investigaron numerosas opciones terapéuticas, incluyendo factores de crecimiento, células madre y terapia génica, con la esperanza de mejorar la potencia curativa del tendón degenerativo. Sin embargo, la mayoría de estos estudios se llevaron a cabo sólo en modelos animales o tenocytes humana saludable. A pesar de algunos estudios utilizando tenocytes patológica, al mejor de nuestro conocimiento no existe ningún protocolo que describe cómo obtener tenocytes degenerativa humana. El objetivo de este estudio es describir un protocolo estándar para la adquisición de tenocytes degenerativa humana. Inicialmente, el tejido del tendón fue cosechado de un paciente con epicondilitis lateral durante la cirugía. Luego se tomaron muestras de biopsia del tendón extensor carpi radialis brevis correspondiente a los cambios estructurales observados en el momento de la cirugía. Todos los tendones cosechados parecen opaco, gris, friable y edematosa, que hacía visualmente distinta de los sanos. Tenocytes eran cultivados y utilizados para experimentos. Mientras tanto, la mitad de los tejidos cosechados fueron analizada histológicamente, y se ha demostrado que compartían las mismas características claves de Tendinopatía (angiofibroblastic displasia o hiperplasia). Un análisis secundario por immunocytochemistry confirmó que las células cultivadas tenocytes con la mayoría de las células que tienen las manchas positivas para mohawk y tenomodulin las proteínas. Luego se determinaron las cualidades de la naturaleza degenerativa de tenocytes comparando las células con el control sano con un ensayo de proliferación o qRT-PCR. La tenocyte degenerativa muestra una mayor tasa de proliferación y similares patrones de expresión de gene de la Tendinopatía que coincidió con los informes anteriores. En general, este nuevo protocolo podría proporcionar una herramienta útil para futuros estudios de Tendinopatía.

Introducción

Tendinopatía es una condición músculo-esquelética degenerativa crónica que se desarrolla en varias partes del cuerpo. Recientemente, el número de casos de tendinopathy ha aumentado considerablemente en el mundo desarrollado debido a la creciente participación en los deportes recreativos y mayor esperanza de vida¹^,². La causa de la Tendinopatía es considerada multifactorial y estas causas incluyen la isquemia, lesiones de radicales libres de oxígeno, un desequilibrio entre inervaciones vasoconstrictor y vasodilatador, interno micro-se rasga y los cambios neuro-regulación³ ^,