Detección en tiempo real de la afinidad dinámica entre biomoléculas mediante la tecnología de resonancia de plasmones de superficie (SPR)

Wenqiao An; Zhihao Sun; Pengmei Guo; Xiaobo Wang; Sanyin Zhang

doi:10.3791/65946

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Artículo de método

Detección en tiempo real de la afinidad dinámica entre biomoléculas mediante la tecnología de resonancia de plasmones de superficie (SPR)

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DOI:

10.3791/65946

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29 de septiembre de 2023

Wenqiao An^*¹ , Zhihao Sun^*¹ , Pengmei Guo² , Xiaobo Wang²^,³ , Sanyin Zhang²^,³

¹School of Basic Medical Sciences, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ³Research Institute of Integrated Traditional Chinese Medicine and Western Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

El presente estudio tiene como objetivo dilucidar el principio y la metodología de la tecnología de resonancia de plasmones de superficie (SPR), que encuentra aplicaciones versátiles en múltiples dominios. Este artículo describe la tecnología SPR, su simplicidad operativa y su notable eficacia, con el objetivo de fomentar una mayor conciencia y adopción de esta tecnología entre los lectores.

Resumen

La tecnología de resonancia de plasmón de superficie (SPR) es un método sensible y preciso para detectar virus, proteínas moleculares patógenas y receptores, determinar grupos sanguíneos y detectar adulteración de alimentos, entre otras detecciones biomoleculares. Esta tecnología permite la identificación rápida de posibles enlaces entre biomoléculas, lo que facilita un cribado rápido, fácil de usar y no invasivo de varios indicadores sin necesidad de etiquetado. Además, la tecnología SPR facilita la detección en tiempo real para el cribado de fármacos de alto rendimiento. En este programa, se presenta brevemente el campo de aplicación y los principios básicos de la tecnología SPR. El proceso de operación se describe en detalle, comenzando con la calibración del instrumento y la operación básica del sistema, seguido de la captura de ligandos y el análisis multiciclo del analito. Se elaboró la curva en tiempo real y los resultados experimentales de la unión de quercetina y calicosina a la proteína KCNJ2. En general, la tecnología SPR proporciona un método altamente específico, simple, sensible y rápido para el cribado de medicamentos, la detección en tiempo real de la farmacocinética relacionada, la detección de virus y la identificación ambiental y de seguridad alimentaria.

Introducción

La tecnología de resonancia de plasmón de superficie (SPR) es una técnica de detección óptica que elimina la necesidad de etiquetar el analito. Permite el monitoreo dinámico y en tiempo real de la afinidad de unión cuantitativa, la cinética y la termodinámica. Esta capacidad de alto rendimiento es altamente sensible y reproducible, lo que permite la medición de varias tasas de apertura, tasas de apagado y afinidad. Además, la pequeña cantidad de muestra requerida mejora aún más la utilidad de este método ^1,2. El método de detección biomolecular de respues....