Kemik metastazının patogenezine, anjiyojenez önemli bir proses ve bu nedenle görüntüleme ve tedavi için bir hedef temsil eder. Burada siteye özel meme kanseri kemik metastazı bir sıçan modeli sunmak ve non-invaziv görüntü anjiyogenez için stratejiler tarif In vivo Manyetik rezonans görüntüleme, volumetrik bilgisayarlı tomografi ve ultrason kullanarak.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Manyetik Rezonans Görüntüleme, Volumetrik Bilgisayarlı Tomografi ve Ultrason Kullanımı Meme Kanseri Kemik metastazı bir Nude Rat Model Angiogenezis Multi-modal Görüntüleme
Bu makalede
Özet
Özet
Anjiogenez kanser büyümesini ve metastazı oluşumu önemli bir özelliğidir. Kemik metastazının olarak, faktör anjiyojenik kemik iliği boşluğu hem de lokal kemik bozulması sonucu tümör hücreleri ve kemik ile etkileşim için tümör hücresi proliferasyon için çok önemli olan. Amacımız invaziv olmayan görüntüleme teknikleri kullanılarak iskelet lezyonları anjiogenezisi in vivo değerlendirme sağlar deneysel kemik metastazı bir model geliştirmekti.
Bu amaçla, ilgili arka bacak 1 dışındaki vücut bölgelerinde metastaz büyümesini engeller yüzeyel epigastrik arter içine 10 5 MDA-MB-231 insan meme kanseri hücreleri enjekte etti. Tümör hücre inokülasyonundan sonra 25-30 gün sonra, siteye özgü kemik metastazı distal femur, tibia ve fibula proksimalinde 1 ile sınırlı, geliştirmek. Anjiyogenez morfolojik ve fonksiyonel açıdan kemik meta uzunlamasına incelenebilirmanyetik rezonans görüntüleme (MRG), volumetrik bilgisayarlı tomografi (VCT) ve ultrason (US) kullanarak stases.
MRG ilk kemik iliği boşluğuna sınırlı ve ilerlerken daha sonra kortikal kemik aşan bir kemik metastazlarının yumuşak doku parçası üzerinde morfolojik bilgileri görüntüler. Dinamik kontrastlı MR bölgesel kan hacmi, perfüzyon ve damar geçirgenliği de dahil olmak üzere (DCE-MRI) fonksiyonel veriler elde edilmiş ve 2-4 belirlenebilir kullanma. Kemik yıkımı morfolojik VCT görüntüleme ile yüksek çözünürlükte yakalanır. MR bulgularına Tamamlayıcı, osteolitik lezyonlar intramedüller tümör büyüme bitişik yerlerde bulunabilir. Kontrast madde uygulamasından sonra, VCT anjiyografi yüksek çözünürlükte kemik metastazlarında macrovessel mimarisi ortaya çıkarır ve DCE-VCT bu lezyonların 5,6 mikrosirkülasyon içgörü sağlar. ABD nedeniyle iskelet lezyonları morfolojik ve fonksiyonel özellikleri değerlendirmek için geçerlidirkortikal kemik yerel osteoliz. B-mod ve Doppler teknikleri kullanarak, yumuşak doku metastazları yapısı ve perfüzyon sırasıyla değerlendirilebilir. DCE-ABD mikrokabarcık 7 enjeksiyonundan sonra kemik metastazlarında vaskülarizasyon gerçek zamanlı görüntüleme sağlar.
Sonuç olarak, siteye özgü meme kanseri kemik bir model, MRG, VCT ve bu iskelet lezyonlarda morfoloji ve anjiogenezin fonksiyonel parametreler üzerine ABD teklif tamamlayıcı bilgiler dahil olmak üzere multi-modal görüntüleme teknikleri metastazı.
Protokol
1. Hücre Kültürü
- Kültür MDA-MB-231 RPMI-1640 insan göğüs kanseri hücreleri (Amerikan Tip Kültür Koleksiyonundan) (Invitrogen, Almanya)% 10 FCS (Sigma, Almanya) ile desteklenmiştir. Tüm standart koşullar altında kültürleri (37 ° C, nemlendirilmiş bir atmosfer,% 5 CO2) ve geçiş hücreleri haftada 2-3 kez bunların logaritmik büyüme tutmak için tutmak. Aşağıda tarif edilen hayvan modeli için, tümör hükmedin oranı% 90'dan fazla 1 olduğu MDA-MB-231 hücreleri, kemik-spesifik sublines kullanımı için bir ihtiyaç vardır.
- PBS-2 mM EDTA ile hasat sonrası alt-konfluent tümör hücreleri (Ca 2 olmadan fosfat-tamponlu salin
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Görüntüleme yöntemleri ile birlikte burada sunulan deneysel kemik metastazı tetikleme yöntemi boydan çıplak sıçanlarda osteolitik lezyonlar takip sağlar. Bizim modelde, MDA-MB-231 insan meme kanseri hücrelerinin pudendoepigastric gövde ve femoral arter yoluyla iliak arter arasında bir anastomoz olduğu DENİZ enjekte edilir. Sonuç olarak, diz arasında sağlanan bir bölgeye kan akışı SEA bağlanmasından sonra korunur. Kıyasla kemik metastazı kurulan modellere göre bu modelin avantajları olarak intrakardiyak enjeksiyon modeli.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Çıkar çatışması ilan etti.
Teşekkürler
Bu çalışma Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB-TR 23 ve SFB-TR 79, TB ve DK) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar, mükemmel teknik yardım için Leotta ve Lisa Seyler Karin, Renate Bangert teşekkür etmek istiyorum.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Reaktif Adı | Şirket | Katalog numarası | |
| MDA-MB-231 insan meme kanseri hücreleri | American Type Culture Collection'dan (ATCC) | HTB-26 | |
| RPMI-1640 | Invitrogen | 61870 | |
| FCS | Invitrogen | 10270 | |
| Tripsin-EDTA | Invitrogen | 25300 | |
| Carprofen Rimadyl | Pfizer | PZN 110.208 | |
| Magnevist | Bayer Schering- | PZN 6961516 | |
| Imeron 400 MCT | Bracco | PZN 228.654 | |
| SonoVue | Bracco | PZN 1567358 | |
| Papave | Alfa Aesar | L 04.152 | |
| İsofluran | Baxter | 9623 galvanizli | |
| Senfoni (Manyetik rezonans görüntüleme) | Siemens | ||
| Cilt BT (bilgisayarlı tomografi Volumetrik) | Siemens | ||
| Acuson Sequioa 512 (Ultrason) | Siemens-Acuson |
Kaynaklar
- Bäuerle, T. Characterization of a rat model with site-specific bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells and its application to the effects of an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Cancer. 115, 177-186 (2005).
- Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W., Bäuerle, T.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
