Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

2-Gemi Tıkanıklığı / Hipotansiyon: Küresel Beyin İskemi Rat Modeli

19.8K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/50173

⸱

22 Haziran 2013

 , 

Bu makalede

Özet

Sistemik hipotansiyon ile birlikte iki taraflı karotis tıkanıklığı tekrarlanabilir şiddeti ile hipokampus hasar görebilir, sıçan küresel beyin iskemi üretir. Hayvanlar üzerinde beyin hasarı tahmin modelleri ile engelli, onlar expediently kurtarmak ve ölüm oranları nispeten düşüktür.

Özet

Resüsitasyon takip Kardiyak arrest genellikle iskemi ve beynin sonraki reperfüzyon kaynaklanan dramatik beyin hasarı ile sonuçlanır. Küresel beyin iskemi iskemi 1 son derece duyarlı olduğu gösterilmiştir belirli beyin bölgelerinin zarar üretir. Hipokampal nöronlar özellikle diğer hücre popülasyonlarının ve göre iskemik hakaret daha yüksek duyarlılığa sahip, hipokampus CA1 bölgesinde iskemi / reperfüzyon 2 özellikle savunmasızdır.

Terapötik girişimlerin, ya da beyin hasarı dahil mekanizmalarının çalışması, tasarımı klinik durumu benzer ve tekrarlanabilir bir şekilde zarar üreten bir model gerektirir. Hipotansiyon ile iki taraflı karotis damar tıkanıklığı (2VOH) kardiyak arrest ve resüsitasyon sırasında oluşabilir serebral olaylar taklit, geri ön beyin iskemi üreten bir modeldir. Biz, Smith ve ark değiştirilmiş bir modeli açıklar. (1984) 2, Ilk olarak Sanderson ve ark. (2008) 3, seçici hassas beyin bölgelerinde 3-6 tekrarlanabilir yaralanma üreten mevcut haliyle sunulmaktadır. Bu modelin güvenilirliği uygulanan hipotansiyon, iskemi süresi, yakın sıcaklık kontrolü, belirli bir anestezi rejimi ve çalışkan ameliyat sonrası bakım sırasında sistemik kan basıncı hassas kontrolü ile belirlenir. Daha az hassas beyin bölgelerinde kurtulmuş ise 8 dakikalık bir iskemik hakaret, reperfüzyon 6 ile 24 saat boyunca ilerler CA1 hipokampal nöron hücre ölümü üretir. Bu aşamalı hücre ölümü kolayca CA1 nöronlarının yakın tam kaybı bu zamanda belirgin olduğu gibi, reperfüzyon ile 7-14 gün sonra ölçülür.

Bu beyin hasarı modele ek olarak, basit ama kapsamlı, metodoloji kullanılarak CA1 zarar miktarının tayini için bir yöntem mevcut. Önemlisi, miktar bir, basit bir kamera monte mikroskop kullanılarak gerçekleştirilebilirda ücretsiz ImageJ (NIH) yazılım eklentisi, maliyet-engelleyici stereology yazılım programları için ihtiyaç ve hasar tespit için motorlu bir mikroskobik sahne kalmayabilir.

Giriş

Kalp durması ve inme bir sonucu olarak beyin hasarı ölüm ve uzun süreli sakatlık önde gelen nedenidir. Kardiyak arrest kurbanları için kardiyopulmoner resüsitasyon bu hastaların% 60 daha sonra hastanede ölen en az kapsamlı beyin hasarı sonucunda ABD'de 7,8 yılda yaklaşık 70.000 hastalarda spontan dolaşımı sağlayacak başarılı ve ise sadece 3-10% yeniden hayata hastaların 9,10 eski yaşam devam edebilirsiniz. Açıkçası, küresel beyin iskemi sonrasında ve nörolojik travma en aza indirmek için tedavi yaklaşımları tasarımı beyin hasarına yol mekanizmalarını anlamak kritik önem taşımaktadır.

Beyin iskemi birden çok yönte....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. Hazırlık

Tüm hayvan deneyleri kurumsal kurallarına uygun ve önce başlatılması için ilgili hayvan bakım komitesi tarafından onay almak gerekir. Burada sunulan tüm işlemler Wayne State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım tarafından onaylanmış ve Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım ve için ABD Hükümeti İlkeleri Kılavuzu'nda ortaya koymak olarak Komitesi kullanın ve hayvanların etik tedavi yönergeleri izleyin edilmiştir Test, Araştırma ve Eğitim Kullanılan Omurgalı Hayvanların Kullanımı ve Bakımı. Ameliyat başlamadan önce, gerekli cerrahi malzeme ve bir ameliyat kurtarma kafes hazırlar. Bu prosedür, bir hayatta kalma cerrahi ve bu yü....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Genel bir beyin iskemi / reperfüzyon 2VOH modeli hipokampusun CA1 bölgesinde nöronal ölüme neden olur. Şekil 2, 14 gün sonra, reperfüzyon işleme genel bir beyin iskemisi 8 dak, tarafından üretilen hasarı temsil eder. Şekiller 2A ve 2B, plasebo arasındaki hipokampi karşılaştırarak kresil violet ile boyandı sonrası iskemik beyin,. Şekil 2A sağlam CA1 dahil olmak üzere, normal morfoloji sergileyen bir sahte operasyona sıçan bir hipokampus gösterir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Burada açıklanan modeli insanlarda bulunan benzer bir yaralanma sağlayan, kalp durması ve canlandırma bir sonucu olarak ortaya çıkabilir beyin İşemi üretir. Genel beyin iskemisinde üretmek için bu yöntem birden fazla protokol biridir. Biz, nispeten düşük ölüm oranı, hızlı iyileşme ve tekrarlanabilir sonuçlar için en önemli bu protokolü kullanır. Kardiyak arrest / resüsitasyon modeli ancak teknik olarak, belki sürekli yeniden en zor klinik olarak en uygun modeldir. Küresel beyin iskemi 4VO modeli dört katkıda gemi iskemi.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ç mali çatışmalar var.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Malzeme Adı
5-0 VICRYL sütür, ters kesme EthiconJ391H
Neşter, No.10Swann-Morton6601
Gazlı Bez SüngerlerFisher22-362-178
18G x 1 ½ iğnedeBD305201
23G x 1 iğnedeBD305145
26 G x 3/8 inç iğneBD305110
18 G x 1 &# 188; kateterEXEL26735
1 ml şırıngaBD309659
10 ml şırıngaBD309604
60 ml şırıngaBD309653
SurgilubeHenry Schein1152666.9
Salin, plastik IV çantaHenry Schein1537468
Sütür 3-0 İpekHenry Schein1007842
Puralube Oftalmik MerhemHenry Schein3390017
BetadineHenry Schein6903564
Steril Havlu ÖrtüsüMoore Medical14170
Polietilen Boru, 50Intramedic427411
Stopcock, 3Smiths medicalMX9311L
İlaç Adı
AERRANE (izofluran)Henry Schein2091966
Mapap Sıvı (Tylenol)Başlıca İlaç1556
Kedavet (ketamin)Ketathesia ButneyNDC 50989-996-06
Butorfik (butorphanol)Lloyd Labs4881
HeparinAPP İlaç504011
Chemical Ad
>Paraformalaldehyde prillsElecron Microscopy Sci.19202
2-metilbütanSigma270342
Kresil Menekşe AsetatSigmaC5042
SükrozSigmaS9378
Software
ImageJNIH
%

Kaynaklar

  1. Kirino, T., Sano, K. Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia. Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).
  2. Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. The density and distribution of....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Karotis Arter OklüzyonuFemoral Arter KanülasyonuSistemik HipotansiyonCA1 Hipokampal NöronlarNöronal Hasar KantifikasyonuImageJ Hücre SayacıHemodinamik İzlemeİskemi Sonrası Reperfüzyon