Yöntem makalesi

Fare Akciğer Entübasyonun Basit Bir Yöntem

DOI:

10.3791/50318

⸱

21 Mart 2013

 ,  ,  , 
1Department of Environmental Health Sciences, Program in Respiratory Biology and Lung Disease, Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, 2Department of Pediatrics, Oregon Health Sciences University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu yazıda akciğer fonksiyonu ölçümleri veya fareler kurtarmak için ve daha sonraki dönemlerde de incelenebilir sağlar pulmoner instilasyon için fare entübasyon bir striaghforward ve etkili bir yöntem açıklanır. Işlem doğrudan soluk borusu yanması pahalı olmayan bir fiber optik ışık kaynağı içerir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Akciğer fonksiyon ölçümleri için fareler Entübe bir basit bir prosedür sınırlı sayıda ya da pahalı hayvan ile uzunlamasına çalışmalarda çeşitli avantajları olurdu. Bu daha çok rutin olarak yapılan olmadığını nedenlerinden biri var bunu başarmak için yollarını tanımlamak birçok yayınlanmış çalışmaları olmasına rağmen, nispeten zor olmasıdır. Bu yazıda bu entübasyon ile ilişkili en önemli engellerden biri, entübasyon tüm süre boyunca trakea görselleştirme olduğunu ortadan kaldıran bir yordam göstermek. Yaklaşım fare trakea içine entübasyon kanül doğrudan bir uygulayıcıya olarak hizmet veren bir 0,5 mm fiberoptik ışık kaynağı kullanır. Biz bunu en az birkaç hafta süre boyunca bireysel farelerde akciğer mekaniği ölçmek için bu yordamı kullanmanız mümkün olduğunu göstermektedir. Tekniği nispeten daha az masraf ve uzmanlığı ile ayarlanabilir, ve rutin nispeten az eğitim ile gerçekleştirilebilir. Bu mak gerekirmümkün herhangi bir laboratuvar rutin böylece böylece gerekli farelerin sayısını en aza indirir ve kendi kontrolü olarak her fare kullanılarak istatistiksel gücünün artırılması, bireysel farelerde uzunlamasına çalışmalar sağlayan bu entübasyon yürütmek için e.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1999 yılında, Brown ve ark. Fare akciğer 1 intübasyon için bir yöntem tarif eden bir kağıt yayınlanmıştır. Böyle bir teknik uzunlamasına çalışmalarda 2 bireysel farelerde tekrar solunum fonksiyon veya bronkoalveoler lavaj yaparken önemli bir yararı da vardır. O orijinal kağıt beri, fare entübasyon 3-9 farklı yaklaşımlar tarif ettiğim birkaç diğer kağıtlar olmuştur. Bu yöntemlerin hepsi başarıyla kullanılabileceği gibi, genellikle önemli eğitim veya maliyet gerektirir. Böyle entübasyon ile ana konulardan biri entübasyon kanülü yaklaşımlar olarak trakea bekleyen ekleme yaklaşıyor olduğunu, kanülün kendisi ışık ve dolayısıyla gitmek gerekir nerede görselleştirme engeller. Böylece, ekleme en önemli zamanda kör hale gelir. Bu yazıda basit ve masrafsız böylece nispeten az eğitim veya başarılı entübasyon sağlamak, bu görselleştirme sorunu ortadan kaldırmak için nasıl gösterirdeneyim.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Prosedür için hazırlanıyor

Bir ilk edinilir ve aşağıdaki öğeleri hazırlamak gerekir:

  1. Kanül. 20-35 g farelerin entübasyon için, biz uzun bir 1 ya da 1.5 inç, 20 gauge IV kateter (BD Insylte, Sparks, MD veya Jelco Optiva, Carlsbad, CA) kullanın. Yeni bir steril sonda her bir fare için kullanılabilir, fakat kateterler, bir gecede% 70 etanol içinde ıslatarak sterilizasyon sonrasında yeniden kullanılabilir. Fare yutak veya trakea ne steril eldivenler ve araçların kullanımı da dahil olmak üzere steril uygun temizlik prosedürleri, olmasına rağmen, takip edilmelidir.
  2. Fiberoptik kablo. Edmund Optik 0,5 mm'lik optik kablo ≈ 70 cm kullanır, ancak uzunluk kritik değildir. Bir jilet ile uzunlukta kablo kestikten sonra, kenar nispeten keskin sol yana fiber kenarından düzeltti olduğundan emin olmak önemlidir ve trakeal duvar delmek için çok çaba almaz. Bununla birlikte, bu ilar çok kolay 1000 grit zımpara kağıdı bir parça (bir video ve Şekil 1'de gösteri görmek dokunmadan ucu kenarları ucundan yaklaşık 2 cm lif tutarak ve sonra birkaç saniye için küçük daireler çizerek bu kenar yumuşatmak için MacDonald, ve diğ. 10). Diğer ucu bir kauçuk durdurucu sokulur. Bu, en kolay şekilde, ilk önce iğnenin geri çekilmesi, durdurucu vasıtasıyla bir 18-gauge iğne itme iğne deliği vasıtasıyla optik fiber ekleme ile başarılır. Kauçuk tıpa (örneğin, NCL-150, Volpi USA, ya da başka herhangi bir ışık kaynağı ya da hatta daha az bir 150 watt) yaklaşık 150 watt halojen ışık kaynağı ile bağlantılıdır. Bu sıcak ışık kaynağına çok yakın bulunduğu zaman sıradan lastik veya mantar yakabilir yana, silikon kauçuk (veya diğer ısıya dayanıklı malzemeden) yapılmış bir stoper kullandığınızdan emin olmak için önemlidir.

2. Entübasyon Sahne

  1. Şekil 1 ve 2'ye bakınız. Fiber optik kablo t takınhrough silikon kauçuk tüp kısa bir parça (≈ 0.8 mm ID x 4 mm D.Ç., Cole-Palmer, EW-96410-13). Hala fiber optik kablo ayarlanabilir izin verirken, oldukça sıkı bu lastik tüp bağla. Kanülün Luer sonunda rahatça silikon tüp takılması kanül içine fiber optik kablo konumunu giderir. Bu kanül uç önünde kanül ≈ 4 mm kadar uzanır, böylece fiber optik kablonun pozisyonunu ayarlar.
  2. Üst dişleri (Şekil 3) ile asılı duran bir dikey destek üzerinde anestezi uygulanmış fare, koyun. Çoğu araştırmacılar kendilerini bakan fare ventral tarafı ile iyi görselleştirme bulabilirsiniz. Çok hafifçe dilini dışarı çekin ve başparmak ve işaret parmağı ile tutun. Orta parmak boyun ve plastik destek arasına yerleştirilir. Işaret parmağı ve başparmak ile dil üzerinde çekiş gücü ağzı açmak için, ve entübasyon yol düzeltmek için kullanılır, kafa ve boyun arkasından açı orta parmak ile ayarlanırŞekil 3 'de gösterilmiştir.
  3. Bir ışık kaynağı ve introduser olarak fiber optik kablo kullanarak görüntülenmiştir ses telleri ile itin. Kabloları görünmüyorsa, hafifçe destek olarak orta parmak ile dil üzerinde sert çekin. Takıldığında, daha kanül ≈ 5 mm ilerlemek. Sonra, çok dikkatli olmak, kanül hareket fiber optik kablo çekmek değil. Fare Uzan ve kanül sabitlemek bant parçası ve Plasticine (modelleme kil) bir parçası üzerinde kanül hub desteklemez, Şekil 4'te gösterilmektedir.
  4. Yalnız bir işlem olduğundan 3. adımda prosedürü kolay öğretilebilir ve hatta, ortaya olamaz. Ancak, dil ve başının arkasında destek çekiş ince ayarlamalar ile neredeyse bu deneyin herkese yakında ses telleri görselleştirmek için fare konumlandırmak için doğru yolu bulmak.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yöntemin bir değerlendirme olarak, 27.7, ortalama ağırlığı (ortalama ± SEM) ± 0.40 g ile 20 dört haftalık erkek BALB / c fareleri kullanılmıştır. 11. Daha önce tarif edildiği gibi akciğer direncini bir sistem kullanılarak ölçüldü olduğunda da birbirini takip eden beş hafta üzerinde çalışıldı. Her fare IP enjeksiyon yoluyla ketamin (100 mg / g BW) ve salin ksilazin (15 mikrogram / g BW) ile anestezi yapıldı. Yukarıda bahsedildiği gibi sonra entübe edildi. Kanül trakea ve değil yemek borusu olup olmadığını herh...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada anlatılan prosedür birçok avantajı vardır. İlk cihaz basit ve nispeten ucuz .. Aparat imalatı hiçbir özel alet ya da pahalı ekipman gerektirmez. Bir kateter kullanımı da ışık kaynağının tek bir uygulayıcıya trakeal açıklığa yaklaştıkça trakea açıklığı görme kaybeder asla anlamına gelir olduğunu tanıtır. Bir 0.5 mm uygulayıcıya kullanımı da daha büyük bir kanül bir ilk ekleme ile meydana gelebilecek travmayı en aza indirmek için sunulmaktadır. Biz benzer bir optik prob ticari bir satıcı (Braintree Bilimsel, Braint...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların hiçbiri ifşa herhangi bir çıkar çatışması var.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

NIH HL-10342 tarafından desteklenir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Malzeme Şirket # Katalog Yorumlamak
Entübasyon kanülü BD Insylte, Sparks, MD veya Jelco Optiva, Carlsbad, CA 1-inç uzunluğunda, 20 gauge intravenöz (IV) kateter
Fiber-optik kablo Edmund Optik, Barrington, NJ # NT02-542 Yaklaşık 2-ft 0.5 mm optik fiber uzunluğu (Haberleşme dereceli plastik fiber). Trakea içine yerleştirilen fiber ucunun kenarı hafifçe 1.000 zımpara Emory kağıt üzerinde birkaç saniye için ucu sürüklerken ≈ 2 cm ucundan lif tutarak ve sonra küçük daireler çizerek yuvarlatılmış olmalıdır.
Işık kaynağı Volpi NCL-150 Biz bile çok daha düşük watt ile 150-W halojen ışık kaynağı, herhangi bir eşdeğer ışık kaynağı kullanımı olsa da,kullanılabilir.
Silikon kauçuk tıpa A # 1 silikon kauçuk tıpa Bu tasvirde kullanılan ışık kaynağı uyuyor. Farklı ışık kaynakları, farklı bir boyut gerektirebilir.
Küçük silikon kauçuk tüp Cole-Palmer EW-96410-13 Silikon kauçuk borudan yapılmış bir ≈ 1.5 cm'lik bir parça (0,8 iç çapı 4 mm dış çapı)
Açılı sopalı Bizim pleksiglas dan constucted, ancak bir iplik ya da tel bir hemen hemen dik açılı olarak fare tutmak için üzerine yerleştirilebilir için herhangi bir malzeme de kullanılabilir.

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
  2. Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice. Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).
  3. Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).
  4. Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).
  5. Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).
  6. Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab Animal. 35, 39-42 (2006).
  7. Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).
  8. Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).
  9. Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).
  10. MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
  11. Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion. Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).
  12. MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930(2007).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Fiber Optik Kan lSes Teli G r nt lemeMekanik VentilasyonHavayolu Direnci l mTrakeal Kan lasyonAkci er Fonksiyon AnaliziAnestezili Fare ModeliFarelerin Dikey S spansiyonuKan l Sabitleme

İlgili makaleler