İnsan İskelet Kası Kan-damar-türevli Multipotent Öncüleri İzolasyonu

William C.W. Chen; Arman Saparov; Mirko Corselli; Mihaela Crisan; Bo Zheng; Bruno Péault; Johnny Huard

doi:10.3791/51195

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

İnsan İskelet Kası Kan-damar-türevli Multipotent Öncüleri İzolasyonu

10.9K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/51195

⸱

21 Ağustos 2014

William C.W. Chen¹ , Arman Saparov²^,³ , Mirko Corselli⁴ , Mihaela Crisan⁵ , Bo Zheng⁶ , Bruno Péault⁷^,⁸ , Johnny Huard⁹

¹Stem Cell Research Center, Department of Bioengineering and Orthopedic Surgery, University of Pittsburgh, ²Department of Orthopedic Surgery, University of Pittsburgh, ³Nazarbayev University Research and Innovation System, Nazarbayev University, ⁴Department of Orthopaedic Surgery, UCLA Orthopaedic Hospital and the Orthopaedic Hospital Research Center, University of California at Los Angeles, ⁵Department of Cell Biology, Erasmus MC Stem Cell Institute, ⁶OHSU Center for Regenerative Medicine, Oregon Health & Science University, ⁷Centre for Cardiovascular Science and MRC Centre for Regenerative Medicine, Queen's Medical Research Institute and University of Edinburgh, ⁸David Geffen School of Medicine and the Orthopaedic Hospital Research Center, University of California at Los Angeles, ⁹Stem Cell Research Center, Department of Orthopedic Surgery and McGowan Institute for Regenerative Medicine, University of Pittsburgh

Bu makalede

Özet

Rejeneratif uygulamalar için idealdir insan iskelet kası liman birkaç çok-soy öncü nüfus içindeki kan damarları. Intima gelen Miyojenik endotel hücreleri, medya perisitler ve adventisyanın gelen adventisyal hücreler: Bu izolasyon yöntemi, kan damarlarının üç yapısal katmanları sırasıyla üç multipotent öncü hücre popülasyonlarının eşzamanlı arınma sağlar.

Özet

Mezenkimal kök / stromal hücreler (MKH) keşfinden beri, yerli kimliği ve MKH'lerin yerelleştirme kültürü retrospektif izolasyon örtülü durumdadır. Son zamanlarda, floresans ile aktive edilen hücre tasnif (FACS) kullanılmasıyla, ve diğer araştırmacılar, ileriye dönük, insan iskelet kası ve damar sistemi ile bağlantılı multipotent öncü hücrelerinin üç alt-popülasyonunu tespit ve saflaştırıldı. Bu üç hücre popülasyonları: intima, media ve adventisya: Miyojenik endotel hücreleri (MECler), perisitler (PC'ler) ve adventisyal hücreleri (ACs), kan damarlarının üç yapısal katmanları sırasıyla lokalize. Bu insan kan-damar kaynaklı kök hücre (hBVSC) Tüm klasik MSC işaretleri ifade ama aynı zamanda tipik MSC'Iere benzer mezodermal gelişim potansiyelleri sahip nüfusun, sadece. Daha önce, MECler, PC'ler ve Klimalar farklı protokoller yoluyla izole edilmiştir ve daha sonra ayrı çalışmada karakterize. Geçerli izolasyon protocol, seçici hücre yüzey belirteçleri içinde izolasyon sürecine değişiklikler ve ayarlamalar yaparak, bize aynı anda tek bir insan kas biyopsisi ile FACS tarafından üç hBVSC subpopülasyonunun arındırmak için izin verir. Bu yeni yöntem, sadece birden BVSC alt popülasyonlarının izolasyonu düzene değil, aynı zamanda farklı tedavi amaçlı hBVSCs gelecekte klinik uygulamalarını kolaylaştırmak değil.

Giriş

Insan iskelet kası kök / projenitör hücrelerin klinik cazip bir kaynak olarak kabul edilmiştir. İskelet kası sadece uydu hücreleri ve kas elde edilen kök hücreler (MDSCs) ¹ olmak üzere miyogenik atalarıdır, iskelet miyoblastları, aynı zamanda ilkel miyogenik kök hücreleri, taahhüt değil içerir. Rejeneratif tıpta insan kas türetilmiş kök / projenitör hücrelerinin otolog veya allojenik, geniş kullanım alanı, klinik öncesi hayvan modellerinde hem de klinik çalışmalarda araştırılmıştır. Kas kök / progenitör hücrelerin rejeneratif uygulamaları kalp krizi hastalarında yaralı kalbi tamir etmek Duchenne müsküler distrofi (DMD) hastalarda distrofik kas yenileyici a....