Hayvan modelleri kronik inflamasyon gelişimine katkıda konak ve patojen spesifik mekanizmaları tanımlarken paha biçilmez araçlardır olduğu kanıtlanmıştır. Burada, lokal ve sistemik inflamasyon bölgelerinde ilerlemesini değerlendirmek için insan patojeni Porphyromonas gingivalis ve detay metodolojileri ile ağızdan enfeksiyondan bir fare modeli tarif eder.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Lokal ve sistemik Yer de patojen kaynaklı kronik enflamasyon Fare Modeli
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Kronik inflamasyon patolojik doku hasarı ve neoplastik, otoimmün ve kronik iltihaplı hastalıklar, insanlarda pek çok kronik hastalıkların bir birleştirici özelliği önemli bir sürücüdür. Delil gelişen klinik belirtilerin çok çeşitli geliştirme ve kronik hastalıkların ilerlemesinde patojen kaynaklı kronik inflamasyon implicates. Kronik hastalığı karmaşık ve çok faktörlü etiyolojisi, nedensellik kanıtı ve mekanik bağlantıların kurulması için deney tasarlama insanlarda neredeyse imkansız. Hayvan modelleri kullanmanın bir avantajı özel bir hastalığın seyrini etkilediği, her ikisi de, genetik ve çevresel faktörler kontrol edilebilir olmasıdır. Böylece, enfeksiyon ilgili hayvan modelleri tasarlarken kronik inflamasyona katkıda konak ve patojen spesifik mekanizmaları belirlemede önemli bir adımı temsil etmektedir.
Burada patojen kaynaklı kronik Serma bir fare modeli tarifOral patojen Porphyromonas gingivalis, çok insanlarda periodontal hastalık ile bağlantılı bir bakteri ile enfeksiyondan sonra, lokal ve sistemik sitelerde mmation. Özgül patojen içermeyen farelere ağızdan enfeksiyonu alveoler kemik, periodontal hastalık bir işaretidir destek dişin tahribatı ile sonuçlanan bir inflamatuar yanıtı tetikler. P. ile kurulmuş bir fare ateroskleroz modelinde, enfeksiyon gingivalis, vasküler endotel aktivasyonu, artmış bir immün hücre infiltrasyonu ve lezyonlarında iltihap aracılarının yükselen sentezlenmesi ile birlikte aort sinüs ve iliyak arteri içindeki inflamatuar plak birikimini hızlandırır. Biz lokal ve sistemik sitelerinde inflamasyon değerlendirilmesi için ayrıntılı metodolojiler. Transgenik farelerden ve tanımlı bakteriyel mutantlarının kullanımı ana ve hastalığın başlaması, ilerlemesi ve sonuç olarak ilgili mikrobiyal faktörlerini tanımlamak için bu model özellikle uygun hale getirir. Additionally modeli aşı ve farmakolojik müdahale dahil, yeni tedavi stratejileri, taranması için de kullanılabilir.
Giriş
Kronik inflamasyon patolojik doku hasarı ve insanlarda birçok kronik hastalıkların bir birleştirici özelliği önemli bir sürücüdür. Bu hastalıklar neoplastik, otoimmün ve kronik enflamatuar hastalıklar 1 içerir. Birçok kronik hastalığın etyolojisi bilinmemektedir ama genetik yatkınlık ve çevresel faktörlerin de tanışmasını içeren, karmaşık ve çok faktörlü olduğu anlaşılmaktadır. Enflamasyon ettiricileri zor olmaya devam ederken immün aktivasyon hücresel ve moleküler profilleri patojenlere karşı ev sahibi tepkilerin 2 gözlenen desenleri ile önemli ölçüde üst üste gelir.
Montaj kanıt mikrobiyal gelişme patojenler ve kro....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. Büyüme ve Bakterilerin Yetiştirme
- P. alınan şerit dondurulmuş stoklar Anaerobik kan agar plakaları üzerine gingivalis 381 ve 3 inkübe - 37 ° C'de havasız odadan (10 H% 2/10% CO 2/80, N% 2) 5 gün.
- 5 ml beyin kalp infüzyon besleyici sıvı ortamı maya ekstraktı (% 0.5), hemin (10 ug / ml) ve menadoin (1 ug / ml) ile takviye edilmiş (BHI) sıvı kültür için plaka yetişen organizmalar kullanın. O / N büyüme sonrasında, BHI 45 ml 5 mi kültürleri aktarın.
- Bir additional18 için anaerobik 50 ml sıvı kültürler inkübe - Geç log fazı orta ila 24 saat ve hasat. Kültür NOT saflığı her zaman hayva....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Uygun fare modeli ve oral enfeksiyon rejimi, S. kullanma gingivalis kronik inflamasyon ve Immunopathology yerel (oral kavite) seviyesinde ve sistemik the (atardamar) (Şekil 1) indükler.
Farelerde, P. ile ağızdan enfeksiyondan gingivalis alveoler kemik 8 destek dişin yok edilmesini sağlayan bir inflamatuar yanıtı tetikler. P. gingivalis farenin ağırlıklı IgG izo 9 vardır, bu organizma için, serum antikor tepki.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
S. gingivalis ağızdan enfeksiyon modeli lokal ve sistemik siteleri patojen kaynaklı kronik enflamasyon çalışma için değerli bir araç sağlar. Bu benzersiz model, kronik inflamasyon ve İmmünopatolojiye katkıda hem ev sahibi ve patojen spesifik mekanizmaların karakterizasyonu izin verir. Buna ek olarak, bağışıklık kazandırma ve model farmakolojik müdahale dahil, yeni tedavi stratejileri, taranması için de kullanılabilir. Bu protokolde belirtilen adımlar P. başlamasını, ilerlemesini ve sonuçlarını değerlen.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.
Teşekkürler
Bu çalışma P01 A1078894 CAG Grant Ulusal Alerji Enstitüleri ve Enfeksiyon Hastalıkları tarafından desteklenen
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Amira analiz yazılımı | Görselleştirme Bilimleri Grubu | ||
| Anaerobik oda DW Bilimsel Model MG500 | Mikrobiyoloji Uluslararası | ||
| BHI | Becton-Dickinson | ||
| Hemin | Sigma-Aldrich | 51280-5G | |
| Menadione (K Vitamini) | Sigma-Aldrich | M5625-25G | |
| Maya Özü | Becton-Dickinson | 212750 | |
| Karboksimetil selüloz (orta viskozite) | Sigma-Aldrich | C-4888 | |
| Sülfametoksazol ve trimetoprim oral süspansiyon 5 ml başına 200 mg / 40 mg | Hi-Tech Pharmacal | NDC 50383-823-16 | |
| μ CT 40 | Scanco | ||
| HistoChoice Doku Sabitleyici | Sigma-Aldrich | H2904 | |
| Sudan IV | Sigma-Aldrich | S4261-25G | |
| Dikey Delikli 11.7T Avance spektrometresi | Bruker | ||
| Paravision | Paravision | ||
| ImageJ | NIH | ||
| Sıçan anti-fare F4/80 | Serotec | MCA497R | |
| Sıçan anti-fare TLR2 | eBioscience | 13-9021-80 | |
| Leica S4 diseksiyon kapsamı | Leica | ||
| Microm HM 550 kriyostat | Microm |
Kaynaklar
- Nathan, C., Ding, A. Nonresolving Inflammation. Cell. 140 (6), 871-882 (2010).
- Karin, M., Lawrence, T., Nizet, V. Innate immunity gone awry: linking microbial infections to chronic inflammation and. 124, 823-835 (2006).
- Connor, S. M., Taylor, C. E., Hughes, J. M.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
