Doku mühendisliği kalp kapakçıklarında neotissue oluşumu ve darlık gelişimi altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamak için, heterotopik kalp kapakçığı nakli bir fare modeli geliştirilmiştir. Bir pulmoner kalp kapak heterotopik kalp nakli tekniği kullanılarak alıcıya nakil oldu.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Heterotopik Kalp Nakli bir Fare Modeli Kullanarak Pulmoner Vana Nakli
Bu makalede
Özet
Özet
Doku mühendisliği kalp kapakçıkları, özellikle decellularized vanalar, karışık sonuçlar rekonstrüktif cerrahi klinik kullanımda ivme kazanmaya başlıyor. Bununla birlikte, neotissue geliştirme, valf kalınlaşma ve stenoz gelişme hücresel ve moleküler mekanizmalar kapsamlı araştırılmış değildir. Yukarıdaki soruları cevaplamak için, biz bir kemirgen heterotopik kalp kapakçığı nakli modeli geliştirdi. Kalp valfi bir valf verici fareden toplanmış ve bir kalp verici fareye transplante edildi. Yeni bir vana ile kalp bir alıcı fareye heterotopically nakil oldu. Nakledilen kalp alıcının kalp atışı bağımsız, kendi kalp atışlarını gösterdi. Kan akışı, atımlı bir dalga Doppler ile yüksek frekanslı bir ultrason sistemi kullanılarak ölçülmüştür. Implante pulmoner valf üzerinden akış minimal yetersizliği akışını ileri gösterdi ve pik akım 100 mm / sn yakın oldu. Kalp kapağı nakli Bu fare modeli olan Highlçok yönlü y, değiştirilmiş ve bu nedenle farklı hemodinamik ortamlar sağlamak için ve / veya bir doku mühendisliği kalp valf neotissue gelişimini incelemek için çeşitli transgenik fareler ile birlikte kullanılabilir uyarlanabilir.
Giriş
Konjenital kalp kusurları batı dünyası 1,2 bebek ölümlerinin önde gelen nedenlerinden biridir. Bunlar arasında, pulmoner kapak darlığı ve aort kapağı kusurları sık görülen şeklidir 3 vardır. Kalp kapak değiştirme ameliyatı rekonstrüktif cerrahi rutin bir seçimdir; Ancak, darlık ve kireçlenmeye kalp kapakçığı ve antikoagülan ömür boyu bağımlılık dahil komplikasyonlar, kronik hastalık ve ölüm 4-7 önemli bir kaynağıdır. Ayrıca, büyüme potansiyeli eksikliği daha genç hastalarda, 4,8,9 ve mortaliteyi artırır, revizyon ameliyatları gerektirir.
Biyolojik olarak parçalanabilir bir sentetik kalp kapakçığ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Not: Bütün hayvan prosedürleri Nationwide Çocuk Hastanesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi.
Kalp Vana Donör Fare 1. Pulmoner Kalp Vana Hasat
- Ameliyat öncesi tüm cerrahi aletler otoklava sokun: ince makas, 3x mikro forseps, 2x mikro vasküler kelepçeler, 1x kelepçe uygulayarak forseps, 1x mikro iğne tutucu, 1x yaylı makas, 1x ekartörünü 1x.
- A 6-8 haftalık dişi C57BL / 6 fare, akciğer kalp kapak verici olarak kullanılmaktadır. Kafesinden fareyi çıkarın ve bunu tartmak, sonra bir ketamin / ksilazin kokteyl (ketamin, 200 mg / kg ve ksilizin, 20 mg / kg, IP) doz aşımı ile euthanize.
- ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Şekil 1 heterotopik kalp nakli kullanarak kalp kapakçığı nakli modelinin şemaları göstermektedir. Kalp kapakçığı, bir donör kalbi hasat ve bir ikinci verici fareden alınan bir kalp üzerine yerleştirildi. Ardından yeni kalp kapak ile kalp bir alıcı fare karın implante edildi. 2. sağ kalp transplantasyonu (B) sonrasında, karın boşluğu (A) implante kalp bir örnek gösterir ve nakilden sonra 5 dk Şekil. Aort ve IVC her iki tarafta dikiş kald.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu prosedürün ölüm oranı çoğunlukla alıcı abdominal aorta donör aort PV nakli site ve anastomoz de kanama neden oldu% 20, yakındır. Pek çok durumda, ölüm oranı önemli ölçüde 48 saat ameliyat sonrasında azalır. Sağkalım fareler implante PV yoluyla güçlü kalp atışlarını ve kan akışını gösterdi. Bütün bu süreç, deneyimli bir mikro cerrah için dört saat sürer. Bu tekniği ana kabaca 250 fareler alacaktır. Heterotopik kalp nakli donör kalbe PV implantasyon kıyasla öne nispeten düzdür. Başarılı bir HV nakli için en kritik adım.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Biz ifşa hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Bu çalışma CKB için NIH (RO1 HL098228) bir hibe, kısmen desteklendi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| DPBS | Gibco | 14190-144 | |
| Mikroskop | Leica | M80 | |
| C57BL / 6J (H-2b), Kadın | Jackson Laboratuvarları | 664 | 8-12 hafta |
| Ketamin Hidroklorür Enjeksiyonu | Hospira Inc. | NDC 0409-2053 | |
| Ksilazin Steril Çözelti | Akorn Inc. | NADA # 139-236 | |
| Ketoprofen | Fort Dodge Hayvan Sağlığı | NDC 0856-4396-01 | |
| İbuprofen | Hassas Doz | NDC 68094-494-59 | |
| Heparin Sodyum | Sagent Farmasötikler | NDC 25021-400 | |
| Tuzlu su çözeltisi (Steril% 0.9 sodyum klorür) | Hospira Inc. | NDC 0409-0138-22 | |
| %0.9 Sodyum klorür Enjeksiyonu | Hospira Inc. | NDC 0409-4888-10 | |
| Petrolatum Oftalmik Merhem | Dechra Veteriner Ürünleri | NDC 17033-211-38 | |
| İyot Hazırlama Pedleri | Triad Tek Kullanımlık, Inc. | NDC 50730-3201-1 | |
| Alkol Hazırlama Pedleri | McKesson Corp. | NDC 68599-5805-1 | |
| Pamuk uçlu aplikatörler | Fisher Sientific | 23-400-118 | |
| İnce Makas | FST | 14028-10 | |
| Mikro-Adson Forcep | FST | 11018-12 | |
| Forcep FST | 00072-14 | ||
| S & T Vasküler Kelepçe | FST | 00396-01 | |
| Yaylı Makas | FST | 15008-08 | |
| Colibri Ekartörler | FST | 17000-04 | |
| Dumont #5 Forcep | FST | 11251-20 | |
| Dumont #7 - İnce Forseps | FST | 11274-20 | |
| Dumont #5/45 Forseps | FST | 11251-35 | |
| Tish İğne Tutucu/ Forseps | Micrins | MI1540 | |
| Siyah Poliamid Monofilament Sütür, 10-0 | AROSurgical Instruments Corporation | TI638402 | Greftin dikilmesi için |
| Siyah Poliamid Monofilament Sütür, 6-0 | AROSurjik Aletler | SN-1956 | Kas ve cilt kapanması için |
| Dokumasız Süngerler | McKesson Corp. | 94442000 | |
| Emilebilir kanama | durdurucu Ethicon | 1961 | |
| 1 ml Şırınga | BD | 309659 | |
| 3 ml Şırınga | BD | 309657 | |
| 10 ml Şırınga | BD | 309604 | |
| 18 G 1 1/2 inç, İğne | BD | 305190 | |
| 25 G 1 inç, İğne | BD | 305125 | |
| 30 G 1 inç, İğne | BD | 305106 | |
| Sıcak Su Sirkülatörü | Gaymar | TP-700 | |
| Isıtma Pedi | Gaymar | TP-22G | |
| Düzeltici | Wahl | 9854-500 | |
| VEVO2100 Yüksek Frekanslı Ultrason | VisualSonics | http://www.visualsonics.com/vevo2100 | Katalog numarası ve fiyatlandırma satış temsilcilerinden alınabilir. |
| Ultrason iletim jeli | Parker Laboratuvarları, A.Ş. | 01-02 | |
| Masa Üstü Laboratuvar Hayvanları Anestezi Sistemi | VetEquip, INC. | ||
| İzofluran | Baxter | 1001936060 |
Kaynaklar
- Polito, A., et al. Increased morbidity and mortality in very preterm VLBW infants with congenital heart disease. Intens Care Med. 39, 1104-1112 (2013).
- Wren, C., Reinhardt, Z., Khawaja, K. Twenty year trends in diagn....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
