Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bir Hidrojel Construct ve Fare Miyokard Enfarktüsü Modeli Therapeutics sunun için Tutkal Yaklaşım Fibrin tabanlı.

8.4K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/52562

⸱

14 Haziran 2015

 ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu protokol, miyokard enfarktüslerinin kök hücre tedavisi için bir hidrojel sistemi ve fibrin bazlı bir yapıştırıcı kullanılarak zayıf hücre aşılamasının sınırlamasını hafifletmeyi amaçlamaktadır. Bu yaklaşımla, enfarktüs sonrası hücreden dokuya temas korunabilir ve bu da yaralanma bölgesindeki faydalı ajanların terapötik potansiyelini artırır.

Özet

Murin MI modeli, kardiyovasküler hastalık alanında yaygın olarak tanınmaktadır ve in vivo1 tedavilerin etkinliğini test etmek için sürekli olarak ilk adım olarak kullanılmıştır. Geleneksel, yerleşik protokol, hayvana verilen zararı en aza indirmek için daha da ince ayarlanmıştır. Özellikle, pektoral kas tabakaları basitçe kesilmek yerine alay edilir ve göğüs kafesinin bütünlüğü korunarak sternotomide kaburgaları kırmak yerine torakotome interkostal olarak yaklaşılır. Bu değişikliklerle, hayvan üzerindeki genel stres azalır.

MI'ların neden olduğu hasarı hafifletmeyi amaçlayan kök hücre tedavileri, pro-anjiyojenik ve anti-apoptotik faydaları nedeniyle yıllar içinde umut vaat etmiştir. Hücrelerin kalp yüzeyine iletilmesine yönelik mevcut yaklaşımlar tipik olarak hücrelerin ya hasarlı bölgenin yakınına, bir koroner arter içine ya da periferik kan dolaşımına2-4 enjekte edilmesini içerir. Hücrelerin hasarlı miyokarda ev sahipliği yaptığı kanıtlanmış olsa da, işlevsellik, yaralanma bölgesindeki zayıf aşılanmaları nedeniyle sınırlıdır ve bu da kan dolaşımınadifüzyonla sonuçlanır 5. Bu el yazması, hücre kapsüllü bir hidrojel yaması kullanılarak bu engelin üstesinden gelen bir prosedürü vurgulamaktadır. Yama cerrahi işlemden önce üretilir ve sol koroner arterin tıkanmasını hemen takiben yaralı miyokard üzerine yerleştirilir. Yamayı yerine yapıştırmak için, biyouyumlu dış fibrin yapıştırıcısı doğrudan yamanın üzerine yerleştirilir ve hem yamanın hem de kalp yüzeyinin kurumasına izin verilir. Bu yaklaşım, hassas bir hücre kapsülleyici terapötik yapının uygulanması için yeni bir yapışma yöntemi sağlar.

Giriş

Bir miyokard enfarktüsü (MI) büyük bir koroner arter tıkanmasına neden olduğu kalp bölgeye kan kesintisiz olarak tanımlanır. Bir MI kaynaklanan hasar nedeniyle ya da daha spesifik olarak, sol ventrikül düzgün yenmek için kalp yeteneğini azaltır fonksiyonel olmayan skar dokusu içine canlı kalp dokusunun yeniden, etmektir. Bu vuruş hacmi olarak bilinir, her kalp atışı, ve ejeksiyon fraksiyonu 6 olarak bilinen her kalp atışında kalp dışarı pompalanır, bir kan yüzdesi, gövdeye teslim edilebilir kan hacminde bir azalma ile sonuçlanır. Bunlar, diğer azalmış fonksiyonları ile birlikte, yeterli işlevini korumak için kalbin geri kalanı üzerinde gerginlik artar. Iki....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Prosedür IACUC protokolü numarası 13302 ile tam uyumluluk içindedir ve hayvan kaynaklarının bölünmesi tarafından onaylandı.

1. Enstrüman Hazırlık

  1. Sterilite sağlamak için cerrahi işlem öncesinde kullanılan tüm olmayan tek kullanımlık aletleri otoklavlayın.
  2. Kullanımlar arasında bir cam boncuk sterilizatör bir oturumda birden çok kez kullanılan aletleri sterilize edin.

2. Hidrojel Hazırlık

  1. Çözülme ve hidrojel yapının oluşturulması için en az 24 saat önce plaka kök hücreler.
  2. Önceki yayınlarda 8,18 detaylı bir şekilde tarif edilmiş bir stereolitografi apara....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Cerrahi işlem sırasında, sol koroner arter ligasyonu bir Tıkalı arterin alt beyazlatma işaretlenmiş tarafından tespit edilebilir. Düğüm atarak önce bir test olarak, dikiş uygun yerde olup olmadığını kontrol etmek için kısa bir süre sıkılır olabilir. Ayrıca, düzgün yenmek için sol atrium yeteneği neredeyse anlık azalma arter sonuçlarının tıkanması beri, sol atrium sisteminde kan geri akışının cevaben büyütmek olacaktır.

M-mod ekokardiyografi ölçümleri sonrası enfarktüs kas yeniden göstergesid.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Fare MI modeline Bu yaklaşımla, diğer kemirgen MI teknikleri ile ilişkili olmayan miyokard alanlara zarar en aza indiren bir sistem geliştirdik. Bu alanlar trakeostomi yol açtığı hasarı, kas tabakasının kesilmesi, ve göğüs boşluğunu maruz kaburga kırılması sayılabilir. Biz bu değişikliklerin cerrahi işlem sırasında olduğu gibi, kaburga ve kas tabakaları dahil, önemli yapıların çok sağlam tutmak için alınan bakım genel cerrahi sonuç sayesinde artırmak inanıyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar, rekabet eden hiçbir finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Teşekkürler

Bu çalışma ABD Ordusu Grant (W81XWH-08-1-0701) ve Carle Vakfı Hastanesi'ne Kardeşliği tarafından finanse edildi.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Harvard Model 687 Fare VantilatörüHarvard Aparatı55-0001
Inintech Biosciences LLC Kuru Cam Boncuk SterilizatörüFisher ScientificNC9531961
Leica MZ6 cerrahi mikroskopLeica
Koter KitiİkizlerGEM 5917
Hassas Forseps - 0,4 mm Uçlar Açılıİnce Bilim Araçları11063-07
Agricola Ekartör - 3,5 cm Yayılmışİnce Bilim Aletleri17005-04
Yaylı Makas - 2,5 mm Bıçaklar Düzİnce Bilim Aletleri15000-08
Castroviejo İğne Tutucu - Kilitli Tungsten Karbür 14 cmGüzel Bilim Aletleri12565-14
İris Makası - Narin Düz 10,5 cmGüzel Bilim Aletleri14060-10
8-0 monofilament sütürEthicon8730P
6-0 İpek sütürEthicon639G
TrombinSigmaT7009
FibrinojenSigmaF3879
Vetbond Doku Yapıştırıcısı3M1469SB

Kaynaklar

  1. Kolk, M. V., et al. LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2009).
  2. Li, Y., Yao, Y., Sheng, Z., Yang, Y., Ma, G. Dual-modal tracking of transplanted mesenchymal stem cell....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Hidrojel Yama UygulamasıFibrin Tutkal YapışmasıTorakotomi ProsedürüSol Koroner Arter LigasyonuHistolojik AnalizKüçük Hayvan EkokardiyografisiHücre Enkapsülasyon TedavisiCerrahi Sütür KapatmaPostoperatif Analjezi Uygulaması