Method Article

Kemik koşullu ortam: Hazırlama ve Biyo-

DOI:

10.3791/52707

⸱

July 8th, 2015

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Oral Surgery and Stomatology, School of Dental Medicine, University of Bern, 2Laboratory of Oral Cell Biology, School of Dental Medicine, University of Bern, 3Department of Oral and Maxillofacial Surgery, School of Dental Medicine, Universitat Internacional de Catalunya, 4Robert K. Schenk Laboratory of Oral Histology, School of Dental Medicine, University of Bern, 5Department of Cranio Maxillofacial Surgery, Inselspital, University of Bern, 6Department of Implant Dentistry, School of Dentistry, Universidade Federal de Santa Catarina

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz kemik klimalı ortam (BCM) hazırlamak ve in vitro faaliyetlerini testi nasıl burada açıklamak.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Otolog kemik greftleri yaygın ağız ve çene cerrahisi, ortopedi, travmatoloji ve kullanılmaktadır. Otolog kemik greftleri tek eksik kemik yerini, aynı zamanda kemik rejenerasyonu karmaşık sürecini desteklemek. Otogreftlerde Bu olumlu davranış üç özelliklerine atfedilen: osteoconductivity, osteogenicity ve Osteoindüktivite. Ancak, başka bir yönü vardır: Kemik kemik rejenerasyonu yer mezenkimal hücreler hedefleyebilir büyüme faktörleri de dahil olmak üzere moleküller, sayısız serbest greft. kemik greftleri parakrin özellikleri kemik koşullu ortam (BCM) kullanılması ile in vitro olarak incelenebilir. Burada ısıl işlem veya demineralizasyonuna uygulanan bir yerel domuz kortikal kemikten kemik klimalı ortam hazırlamak için nasıl protokolü ve kemik sunuyoruz. Hücreler doğrudan BCM maruz ya da kolajen membranların, daha önce BCM ile ıslatılmış olarak biyomalzemeler, üzerine numaralı seribaşı olabilir. Biz in vitro bioassa için örnekler verirTGF-β ayarlı genlerin ifadesi üzerindeki mezenkimal hücreler ys. sunulan protokoller ayrıca kemik rejenerasyonu esnasında kemik grefti parakrin etkileri ortaya koymak ve rekonstrüktif cerrahi geniş alanda translasyonel araştırma için bir yol açmak için teşvik etmelidir.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Otolog kemik yaygın bir malformasyon sonucu, rezektif cerrahi, rekonstrüktif travma cerrahisi, ve önceki implant yerleştirme 1,2 olarak meydana gelen kusurları köprü için kullanılır. Kemik greftleri greft konsolidasyon sürecini destekleyen nasıl biyolojik prensiplerini anlamak otogreftleri rekonstrüktif cerrahi altın standart olarak kabul edilir anlamak için tek anahtar değil, aynı zamanda kemik yerine kullanılan 3 geliştirilmiş tasarımı Biyonik olduğunu. Yine, greft konsolidasyon hızlı otolog kemik kemik 4,5 'yerine göre olduğunu. Böylece, kemik rejenerasyonu desteklemek için çok etkili otolog kemik yapmak moleküler ve hücresel m....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. BCM Hazırlık

  1. Mümkün olduğunca taze yerel kasap domuz çene kemiklerini edinin. Sağlam bir yüzeye yerleştirin altçeneleri ve tam kalınlıkta flep herhangi bir yumuşak doku bırakın veya kemiğe bağlı periost değil özel dikkat bırakın. Akış kaputu altında çalışmak gerek kalmadan temiz bir ortamda çalışın.
  2. Tam kalınlıkta flep yayımlandıktan sonra, bukkal taraftan kemik cips hasat kemik kazıyıcı kullanın. Kemik kazıyıcı keskin olması gerektiğini lütfen unutmayınız. Sıkıca kemik kazıyıcı Kulp ve uzun hareketler kemik toplamak ile. Daha küçük o 1mm kemik cips atın.
    1. Doğal kemik parçası muhafaza edilmesi için,% 1 antibiyotik ve bunları kurumasına....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kemik koşullandırılmış ortam, taze domuz kemik parçacıkları hazırlanır. Işlem genel bakış BCM hazırlamak ve BCM ile kombinasyon halinde biyomalzemeleri kullanımı, Şekil 1, sırasıyla, Şekil 2 'de gösterilmiştir. BCM hazırlanması sırasında, nihai BCM kalitesini etkileyebilir kısa hareketler ya da çok küçük kemik cips sürece hareketlerle büyük kemik cips elde etmek önemlidir. ADM, PTX3, IL11, IL33, NOX4 ve PRG4 (Şekil 3): BCM Kalitesi BCM, hedef genlerin gen ekspresyonunu analiz etmek sure.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kemik klimalı ortam kemik rejenerasyonu erken evrelerinde kemik grefti yayımlanan aktivitesini yansıtır. Burada açıklanan protokol kemik rejenerasyonu dahil çeşitli hücre tipleri tepkisini incelemek için adapte edilebilir. Bundan başka, protokol işleme kemik veya kemik dolgu kıvamlandırılmış ortam hazırlamak için de kullanılabilir. Çeşitli yerli ve işlenmiş kemik salınan faktörler: yöntemler gerçekleştirmek ve basit bir kavram güvenmek kolaydır. Nasıl BCM anlamak mezenkimal hücreler greft konsolidasyon ve kemik otogreft.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok. Jordi Caballé-Serrano Diş Araştırma ve Eğitim, Basel, İsviçre Vakfı burs aldı.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, yetenekli yardımı için Catherine Solioz'a teşekkür eder.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Domuz MandibulalarıYerel bucher
Kemik KazıyıcıHu-FriedyPPBUSE2/36
Antibiyotikler & AntimikotiklerTüm Yaşam Teknolojileri15240-062
Kollajen Membranlar (Bio-Gide)Geistlich
Fetal Buzağı SerumuInvitrogen Corporation16030074
DMEMInvitrogen Corporation21885-025

Yüksek Saf RNA İzolasyon Kiti		Roche11828665001
Transkriptör Önce Strand cDNA Sentez KitiRoche4379012001
PrimerlerMicrosynth
SYBR Green (Q-RT-PCR için)Roche4673484001
PBS Roche11666789001

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Buser, D. Long-term Stability of Early Implant Placement with Contour Augmentation. Journal of dental research. , (2013).
  2. Chiapasco, M., Casentini, P., Bone Zaniboni, M. augmentation procedures in implant dentistry. The International jour....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Bone Conditioned MediumBone GraftsMesenchymal CellsGene Expression AnalysisQuantitative Real time PCRCollagen MembranesTGF beta SignalingBone RegenerationIn Vitro BioassayParacrine Effects

Related Articles