Göz merceği sertliğinde yaşa bağlı artışlar presbiyopi ile bağlantılıdır. Bu protokol, fare merceği sertliğini ölçmek için basit, uygun maliyetli bir yöntemi açıklar. Fare mercekleri, insan mercekleri gibi, yaşla birlikte daha sert hale gelir. Bu yöntem hassastır ve daha büyük hayvanlardan elde edilen lensler için uyarlanabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Fare Lens Basınç Sertliği değerlendirin Cam lameller Sıralı Uygulama: Gerilme ve Morfometrik Analizleri
Bu makalede
Özet
Özet
Göz merceği kırar ve retinada net bir görüntü oluşturmak için ışık odaklanan şeffaf bir organdır. İnsanlarda, siliyer kaslar kasılır yakındaki nesnelere odaklanmak lens optik güç, konaklama olarak bilinen bir süreç içinde bir artışa yol açarak, lensi deforme etmek. Lens sertliği yaşa bağlı değişiklikler presbiyopi bağlantılı olmuştur, uzantısına göre karşılamak için objektif yeteneğini azalma ve, okuma gözlükleri için gereklidir. Fare lensler karşılamak ya da presbiyop geliştirmek değil olsa bile, fare modelleri anlayış lens patolojileri için paha biçilmez bir genetik araç sağlayabilir ve farelerde gözlenen hızlandırılmış yaşlanma lens yaşa bağlı değişikliklerin çalışmayı sağlar. Bu protokol, fare lens sertliği belirleyen sırayla uygulamak lens üzerine sıkıştırma yüklerini artan cam lamelleri kullanarak, basit, hassas ve düşük maliyetli yöntem gösterilmektedir. Temsilcisi veri fare lensler gibi, yaşla birlikte daha sert hale teyitİnsan lensler. Bu yöntem son derece tekrarlanabilir ve potansiyel büyük hayvanlar test lensleri mekanik olarak kadar ölçeklendirilebilir.
Giriş
Lens, gözün ön kamarasında bulunan ve ışığın retinaya ince bir şekilde odaklanmasından sorumlu şeffaf ve avasküler bir organdır. Lens kapsülü adı verilen berrak bir bazal zar, epitel hücrelerinin1,2 ön tek tabakası ile kaplanmış uzun lif hücrelerinin bir yığınını çevreler. Lensin yaşam boyu büyümesi, lens ekvatorundaki epitel hücrelerinin sürekli çoğalmasına ve farklılaşarak yeni fiber hücrelere dönüşmesine ve bu hücrelerin önceki nesil fiber hücrelere konsantrik bir şekilde eklenmesine bağlıdır2. Zamanla, lens lifi hücreleri sıkışır ve lensin ortasında çekirdek1 adı verilen sert bir merkez oluşur. Gözün optik gücündeki diyoptrik bir d....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bütün hayvan prosedürleri Scripps Araştırma Enstitüsü'nde Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından Sağlık ve onaylı protokol çerçevesinde Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanımı için Kılavuzu'nda tavsiyeleri doğrultusunda yapıldı.
1. Mercek Diseksiyon
- Sağlık "Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kılavuzu" National Institutes ve onaylanmış kuruluş hayvan kullanım protokolleri önerilere göre fareler Euthanize.
- Kavisli bir forseps kullanılarak farelerden göz aydınlatmak. soketten göz getirmek ve daha sonra forseps ile soketten göz koparmak için forseps ile göz....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
sertliği ve 2, 4 ve 8 aylık bir fare lenslerin boyutlarının ölçüldü. Fareler TSRI Hayvancılık Tesisi elde edilen saf C57BL6 suşu arka planda tüm yabani tip hayvanlar vardı ve her lens 1 ila 10 lamelleri ile yüklendi. eksenel ve ekvatoral suşları her lamel ilave edildikten sonra lensin eksenel ve ekvatoral çapları ölçülerek ve daha sonra karşılık gelen boş çapa çapında her değişikliği normalize ederek uygulanan yükün bir fonksiyonu olarak hesaplandı. Her yaştan sekiz lensler test edildi v.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Lens sertliği ölçmek için bu yöntemi kullanırken birkaç önemli hususlar vardır. odanın (θ) alt kısmına göre - (8.5 ° 8) İlk olarak, lamelleri hafif eğik bir açıyla lens uygulanır. Bu da, eksenel fazla ekvatoryal yerine yük çok küçük bir bileşen uygulanır. Ancak, bu ekvatoral yük günah θ ≈ 0.1 19 çünkü önemsiz kabul edilir. Bu yöntem büyük lensler için adapte edilirse, odasının tabanına lamelleri açısı ekvator yük gerilme hesaplamaları hesaba gerekip gerekmediğini belirlemek üzere ölçülecek gerekir. İkinci ola.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Bu çalışma Ulusal Göz Enstitüsü Hibe R01 EY017724 (VMF) ve Ulusal Artrit ve Kas-İskelet ve Deri Hastalıkları Enstitüsü Hibe K99 AR066534 (DSG) tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| İnce uçlu düz forseps | İnce Bilimsel Aletler | 11252-40 | |
| Mikrodiseksiyon makası, düz kenar | İnce Bilimsel Aletler | 15000-00 | |
| Kavisli forseps | İnce Bilimsel Aletler | 11272-40 | |
| Forseps tutma | Hammacher | HSC 702-93 | İsteğe bağlı |
| Diseksiyon kabı | Fisher Scientific | 12565154 | |
| 60 mm Petri kabı | Fisher Scientific | 0875713A | |
| 1x fosfat tamponlu salin (PBS) | Life Technologies | 14190 | |
| 18 x 18 mm cam lameller | Fisher Scientific | 12-542A | |
| Lensleri | Özel yapım (bkz. Şekil 1) | ||
| Dik açılı ayna | Edmund Optics | 45-591 | |
| Işık kaynağı | Schott/Fostec | 8375 | |
| Işıklı diseksiyon mikroskobu | Olympus | SZX-ILLD100 | SZ-PT fototüplü |
| Dijital fotoğraf makinesi | Nikon | Coolpix 990 |
Kaynaklar
- Lovicu, F. J., Robinson, M. L. Development of the ocular lens. , Cambridge University Press. (2004).
- Piatigorsky, J. Lens differentiation in vertebrates. A review of cellular and molecular features. Differentiation. 19 (3), 134-153 (1981).
- Glasser, A.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
