Bariatrik cerrahi, vücut ağırlığını ve sıklıkla morbid obezite ile ilişkili ölümcül metabolik komplikasyonları (diyabet, obezite ve dislipidemi) azaltmanın en etkili yoludur. Bariatrik cerrahinin fare modelleri, bu ameliyatların diyabet, hipertansiyon ve dislipidemi üzerindeki yararlı etkilerinin arkasındaki moleküler mekanizmaları deşifre etmek için benzersiz bir varlığı temsil eder.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sleeve gastrektomi Teknikleri ve Farelerde Roux-en-Y Gastrik Bypass Modifiye
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Obezite (2003 yılından 2008 yılına kadar) Avrupa'da 4 kadın,% 36.5 erkekler için% 28 ve 6.2 prevalansı, önemli bir halk sağlığı sorunudur. Morbid obezite sık yaşam süresi ve kalite azaltma, tip 2 diyabet, hipertansiyon ve dislipidemi gibi metabolik komplikasyonların ile ilişkilidir. Etkili bir non-invaziv tedavilerin yokluğunda, bariatrik cerrahi morbid obezite hastalarında (vücut kitle indeksi (BMI)> 40 kg / m2) için değerli bir tedavi seçeneği uzun vadeli lider olduğunu, metabolik komplikasyonlar kilo kaybı ve iyileştirmeler sürekli . Ancak, obezite cerrahisinin yararlı etkileri sürdürülmesi altta yatan hücresel ve moleküler mekanizmalar henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Nedeniyle sayısız genetiği değiştirilmiş suşlar, fare modeli obezite ameliyatları pleiotropik yararlı etkileri arkasında moleküler mekanizmaları keşfetmek için en uygun hayvan modelidir. Burada, optimize edilmiş healthc ayrıntılısleeve gastrektomi ve modifiye Roux-en-Y gastrik bypass: iki en yaygın kullanılan bariatrik ameliyatlar için farelerde yöntemleri ve cerrahi protokoller vardır. Obezite cerrahisinde tedavi etkilerinin altında yatan moleküler mekanizmaları Deşifre yeni terapötik hedefler belirlenmesi söz sunmaktadır.
Giriş
obezite ve diyabet dünya çapında salgın şiddetinde yıkıcı. Dünya çapında iki milyar yetişkin (nüfusun% 30) fazla kilolu (BKİ> 25 kg / m2) ve obez (BKİ> 30 kg / m2) ya 1. Bu artmış morbidite ve mortalite lider, tip 2 diyabet, hipertansiyon ve dislipidemi gibi metabolik komplikasyonlar ile birlikte gelebilir. Obezite genel mortalite ve kanser 2 sıklığını arttırır. Nedeniyle etkili bir non-invaziv tedavilerin eksikliği, obezite cerrahisi uzun vadeli, sürekli kilo kaybı 3, 4 yol açabilir tek seçenek temsil eder. Farklı cerrahi yöntemler bir dizi geliştirilmiştir, ancak sleeve gastrektomi (SG) ve Roux-en-Y gastrik bypass (RYGB) klinik pratikte en yaygın olarak kullanılan iki yöntem vardır. SG prosedürü sırasında mide başlangıç hacminin 80% olduğuçıkarıldı; böylece, bu teknik tokluk artırır kısıtlayıcı ameliyatlar biridir. RYGB kısıtlayıcı-malabzorptif tekniklerden biridir. RYGB sırasında, küçük bir mide kese (toplam mide hacminin% 1-2) oluşturulur ve bağırsak sindirim ve besinlerin emilmesini geciktirir Y-şekil, içine yeniden düzenlenmektedir. Bu iki teknik RYGB görülen daha yüksek bir verimlilik ile, sık ilişkili eşlik eden önemli vücut ağırlığı azalma ve genel gelişmeler (örneğin, hipertansiyon, tip 2 diyabet ve dislipidemi) 3 yol açar. Ancak, obezite ameliyatları pleiotropik yararlı etkileri arkasında moleküler mekanizmaları genellikle tam olarak açıklığa kavuşturulamamıştır. Bağlı bulunan çok sayıda genetik olarak modifiye edilmiş suşlar, bir fare modeli, bu moleküler mekanizmaları keşfetmek için en uygun hayvan modelidir.
Ancak, obezite prosedürler küçük hayvan modellerinde ve requir doğrudan adapte etmek zorduryüksek cerrahi maharet e. SG kolayca ve çok iyi bir hayatta kalma oranı ile kemirgenlerde gerçekleştirilebilir olsa da, RYGB şiddetli barsak engel 5 farelerde ölümcüldür. Farklı modifiye RYGB teknikleri, bu sorun, özellikle oesojejunostomy 5 karşı koymak için önerilmiştir. Bir mide eksizyon olmadan gastrojejunostomi: Burada başka bir alternatif sunuyoruz. Bu modifiye RYGB üretir insanlarda gözlenen yararlı etkileri çoğu (yani, vücut ağırlığında anlamlı bir azalma ve glukoz ve lipid homeostazında bir gelişme).
Bu yazıda özetlemek ve farelerde SG ve RYGB teknik ve deneysel ayrıntılarını görüşmek ve videolar yardımıyla bu prosedürlerini kolaylaştırmak için hedefliyor. Belirli bir vurgulamak vitamini ve demir eksikliklerinin azaltılmasına olanak sağlar preoperatif ve postoperatif sağlık protokolleri optimizasyonu ile ilgili yapılacaktır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan ve konut: 8 haftalık C57BL / 6 erkek fareler elde edin. yağdan% 35 kcal,% 25.8 kazein,% 1,30 mineral AIN, 1.30% vitaminleri,% 1.70 kalsiyum fosfat, 0.7: 10 haftalık iken suya C57BL / 6 fareler ücretsiz erişim ve yüksek yağlı diyet (DIO diyet vermek % kalsiyum karbonat,% 2.10 sitrat, potasyum, 0.026% kolin bitartrat,% 8.9 sükroz, 0.384% sistin,% 6.5 selüloz,% 31.7 domuz yağı,% 3.3 soya fasulyesi yağı ve% 16.29 maltodekstrin) 8 (SG), 14 (RYGB) hafta obezite ameliyatları öncesinde. kilo alımını teşvik etmek için RYGB cerrahi (sham RYGB) içeren su% 20 fruktoz adanmış fareler elde (a / h), yüksek yağlı diyet ilave olarak.
Etik Beyanı: Aşağıda açıklanan tüm protokol adımları Hayvan Deneyleri Etik Kurulu yönergeleri izleyin ve onay numarası 01.953,01 altında Pays de la Loire.
1. Genel Preoperatif Hazırlık
- Ameliyat öncesi 6 saat süreyle fareler hızlı. jel diet yemek 3 gün ameliyat öncesi cerrahi ve sadece bir gün önce verildi. (0.4 L / dk dioksijen),% 5 izofluran (0.4 L / dak) ve O 2 olan bir oda içinde anestezi neden. Anesthetization etkili olduğunu doğrulamak için bir ayak-tutam testi yapın. Deri altı enjeksiyonu vasıtasıyla analjezik (0.1 mg / kg buprenorfin), antibiyotikler (10 mg / kg marbofloxacine) ve pro-kinetiği (1 mg / kg metoklopramid) uygulayınız.
- (Laboratuvar trafik ve havalandırma fanları uzak) cerrahi işlemler için belirli bir çalışma alanı tahsis. adanmış sert yüzey dezenfektanları ile cerrahi alanı temizleyin. Ameliyat sırasında fare homeothermy korumak için çalışma alanı alana bir ısıtma yastığı yerleştirin. ısıtma pedi üzerinde temiz, emici underpad uygulayın.
- Elektrikli tıraş makinesi kullanarak leğeni için sternum karın Tıraş. Sterilize plastik wrap (Şekil 1A ve 2A) fare karın sarın ve ısıtma p yatar pozisyonda fare yerleştirinreklam.
- anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner merhem sürün. Burun konisi fare yerleştirin ve% 2 izofluran (0.4 L / dak) ve O 2 (/ dk 0.4 L) ile anestezi korumak.
- Ameliyat başlamadan önce, steril muayene elbisesi, tek kullanımlık scrubs kap, bir yüz maskesi ve steril eldiven giy. Tüm cerrahi adımlar için gerekli olan bir steril cerrahi alet seti içeren bir otoklava paketi açın. sterilize plastik wrap bir pencere kesin ve 2 ardışık povidon-iyodin çözümlerle cildi dezenfekte edin.
2. Kol gastrektomi: Cerrahi Prosedür
- Karın orta (Şekil 1B)
- binoküler mikroskop altında ve bir neşter ile, karın boşluğuna (karın kasları zarar vermeyin) açmak için karın ortasına kadar sternum bir orta hat kesi yapmak. 37 ° C tuzlu su çözeltisi ile ıslatılmış steril kompres ile cildi korumak.
- Mide poz (Şekil 1C)
- Yavaşça nemlendirilmiş pamuklu çubuklarla kullanarak mide seferber. nemli bir pamukla veya mikro makas kullanarak yanal yakın bağ dokusu ekleri mide ücretsiz.
- Yavaşça, tam mide dışa ve hemostatik kollajen mide arkasına sıkıştırmak yerleştirin. (Şekil 1D ve E) kanama geleceği önlemek için 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle mide büyük eğrilik boyunca pilor ve yemek borusu damarları dikilmelidir. Not: Hemostat kullanımı, doku hasarına neden sadece rezeke edilecek amaçlayan doku üzerinde kullanmak için emin olabilirsiniz.
- Midenin kardiyak bölgenin rezeksiyonu (fundus)
- Pilor bölgesi (corpus) ve mide (fundus) kardiyak bölge (Şekil 1F) arasındaki anatomik çizgi mevcut bir gastrotomi gerçekleştirin.
- Her doğru 2 nemli bir pamukla kalan yiyecekleri çıkarınmide yan. Mikro makas kullanarak, fundus ve mide (Şekil 1G) külliyatının arasındaki sınır boyunca mide kesti.
- hemostatik kollajen majör kanama durumunda 2 dakika süreyle sıkıştırmak basın. Insizyon (Şekil 1H) sonuna kadar mide-özofagus kavşağına 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle mide ağzını kapatınız.
- Midenin pilor bölgenin rezeksiyonu (corpus)
- Mide (Şekil 1 H), yaklaşık% 80 bertaraf edilmesi için büyük bir kavis boyunca mide rezeksiyonu tamamlayın. 3 mm SG genişliğini standart hale getirilmiştir. hemostatik kollajen majör kanama durumunda 2 dakika süreyle sıkıştırmak basın.
- 8.0 emilemeyen sütür (Şekil 1J) ile midenin pilor bölgesi açılmasını kapatın. Yavaşça dikiş sızdırmaz olmasını sağlamak için midenin her tarafına doğru 2 nemli bir pamukla yuvarlayın.
- sızıntı durumunda 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle tamamlayın. hemostatik kollajen kompresler çıkarın ve karın boşluğuna mide dönün. sütür karşı sıkıştırmak hemostatik kollajen bırakın.
- karın kapatma
- 5.0 olmayan emilebilir dikişlerle (Şekil 1K) ile karın duvarı kas tabakası kapatın. % 1 izofluran konsantrasyonu azaltarak anestezi azaltın. 5.0 olmayan emilebilir sütürler (Şekil 1L) kullanarak cilt kapatın.
3. Roux-en-Y Gastrik Bypass: Cerrahi Prosedür
- karın orta
- binoküler mikroskop altında ve bir neşter ile, karın boşluğuna (karın kasları zarar vermeyin) açmak için karın ortasına kadar sternum bir orta hat kesi yapmak. 37 ° C tuzlu su solüsyonu (Şekil 2B) ile ıslatılmış steril bir kompres ile cildi korumak.
- Biliopankreatik ekstremite ve sindirim ekstremite
- Bağırsak (Şekil 2C) dışa. Tedbir 8 Pilerden cm ve 5.0 olmayan emilebilir dikişlerle (Şekil 2B) ile bağırsak iki bitişik harfler gerçekleştirin.
- İki bitişik harfler (Şekil 2E) arasında bağırsak kesti. karnın sol üst kadranda iki ucu proksimal ekstremite yerleştirin. Not: Bu sindirim bacak (Şekil 2F) olarak kullanılacaktır.
- Sindirim ekstremite proksimal ekstremite (Şekil 2F) altında 6 cm bakan iki ucu distal ekstremite yerleştirin.
Not: Bu safra bacak olarak kullanılacaktır.
- Jejuno-jejunostomy
- Mikro makas kullanarak proksimal ekstremite ve bağırsak döngü hem kesmek için ve aynı uzunlukta iki antimezenterik insizyon (Şekil 2G ve 2H) gerçekleştirin.
- İki 8.0 ile yan-yan anastomoz gerçekleştirinolmayan emilebilir dikişlerle. Ventral yüzü anastomoz (Şekil 2J) takip sırt tarafında anastomoz ilk (Şekil 2I), gerçekleştirin.
- Yavaşça dikiş sızdırmaz olmasını sağlamak için anastomoz her tarafına doğru 2 nemli bir pamukla yuvarlayın. sızıntı durumunda 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle tamamlayın.
- Gastro-jejunostomi
- Yavaşça nemli bir pamukla kullanarak mide seferber. nemli bir pamukla veya mikro makas kullanarak yanal yakın bağ dokusu ekleri mide ücretsiz.
- Yavaşça, yeniden emilebilir hemostatik kollajen mide arkasında sıkıştırmak yerleştirerek, tam mide dışa. Kavisli mikro forseps (Şekil 2K ve 2L) ile omentum geçirilen 5,0 emilemeyen sütür kullanarak pilor bir bitişik harfleri gerçekleştirin.
- ventral mide tarafı, pilor 1,5 cm, ve distal ekstremite hem Cutaynı uzunlukta (Şekil 2M) iki kesiler yaratarak, mikro makas kullanılarak.
- İki 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle yan-yan anastomoz gerçekleştirin. Dorsal yan anastomoz (Şekil 2N) ile başlayın ve daha sonra ventral yüzü anastomoz (Şekil 2O) gerçekleştirin. Yavaşça dikiş sızdırmaz olmasını sağlamak için anastomoz her tarafına doğru 2 nemlendirilmiş pamuklu çubuklarla yuvarlayın. sızıntı durumunda 8.0 olmayan emilebilir dikişlerle tamamlayın.
- karın kapatma
- 5.0 olmayan emilebilir sütürler (Şekil 2P) kullanılarak karın duvarı kas tabakası kapatın. % 1 izofluran konsantrasyonu azaltarak anestezi azaltın. Deri altına enjeksiyon yolu ile, ılık tuzlu su çözeltisi 25 ml / kg .Administer 5.0 emilmeyen dikişlerle (Şekil 2Q) ile cilt kapatın.
4. Genel Ameliyat Sonrası Bakım
- izofluran durdurFare tamamen uyanık olduğu kadar ve 0.8 L / dk O 2 akışı ile devam ediyor. kafesin etrafında taşımak ve durmak ve düşmeden yürümek mümkün hayvan başlayan gösterilen motor kontrolü, kavuşur kadar sahipsiz fare bırakmayın.
- 5 gün için 30 ° C sıcaklık koşullarında bir inkübatör içinde fare (kafes başına sadece bir fare) yerleştirin.
- protokol sonuna kadar RYGB farelerde ve vitaminler (800 mg / 180 ml su içinde) ilaveleri, demir (deri altına enjeksiyon, 0.5 mg / kg / gün) tutun.
- Ameliyattan sonra 5 gün: (% 10 domuz yağı,% 10 sıvı şeker,% 57 su, yüksek yağlı jel diyet) ücretsiz jel diyet yiyecek erişimi dönün. 3 gün ameliyattan sonra katı bir diyet reintroduce.
- Deri altına, meloksikam (ameliyat sonrası gün ila 3 gün 0, günde iki kez 0.1 mg / kg) (1 mg / kg, 0. günden ameliyat sonrası gün ila 3), metoklopramid (1 mg / kg, günde 0 ila buprenorfin enjekte ameliyat sonrası gün 5) ve marbofloxacine (10 mg / kg, gün 0 ila gün 3 Aften r cerrahisi).
5. Postoperatif Metabolik Parametreler Değerlendirme
- Gıda alımı ölçümü
- Fareler ameliyattan sonra 1 hafta kurtarmak için izin verin. Ev farenin kafes başına on. kafes yerleştirilir katı diyet miktarını ölçün. Ağırlık kalan gıda 24 saat sonra. sürece gerektiği gibi bu adımı yineleyin.
- Oral glukoz tolerans testi
- Oral bolus önce 6 saat boyunca fareler hızlı. kuyruk ucundan bir kan damlası hasat ve zaman 0 kan şekeri değerini belirlemek için bir glucometer takılı bir glikoz şeridi üzerinde uygulayın.
- % 20 D-glikoz çözeltisi (2 g / kg) bir oral ölçülü yönetme. 15 yaşında 30, 60, ve 120 dakika sonrası sonda, kan şekeri düzeylerini ölçmek.
- Hemoglobin düzeyi analizi
- Bir hematoloji sistemi kullanarak, hemoglobin düzeyi örnek taze kan 20 uL ölçmek.
- intraperitoneal olarak ksilazin / ketamin çözeltisi (10/80 mg / kg) enjekte edilerek fareler anestezi. servikal dislokasyon gerçekleştirin. Kalp atmıyor ve göz küresi göz kırpma refleksi kaybolur sağlayarak tam ötenazi doğrulayın.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Genel Şartlar
SG işlemi için ortalama ameliyat süresi 49.3 ± 1.5 dakika idi. Bu mide yaklaşık% 80 oranında temsil mide 62.8 ± 5.0 mg, kaldırıldı. Hiçbir fareler ameliyat sırasında ya da aşağıdaki yedi gün içinde öldü. Bir fare (% 7.1), çünkü bir bezoar neden olduğu mide tıkanıklığı 11. günde kaybedildi.
RYGB prosedür için ortalama ameliya...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
artan obezite salgını üstesinden gelmek için, ilk bariatrik cerrahi prosedürleri ABD'de 1960'larda ortaya çıktı. O zamandan beri, prosedürlerin sayısı hala her yıl dünya çapında gerçekleştirilen artırmak ve bugün, bu teknikler morbid obezite 6 yönetimi için en iyi tedavi seçeneği oluşturmaktadır. Geliştirilen prosedürler arasında, SG ve RYGB klinik pratikte 4'te kullanılan en popüler iki yöntem vardır. Hayvan modelleri, özellikle kemirgenler, bariatrik cerrahi ...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.
Teşekkürler
Gilles Mithieux ve Aude Barataud'a (INSERM U1213, Lyon, Fransa) ve Marie Liabeuf ve Stephanie Lemarchand-Minde'ye (Hayvan tesisi, l'Institut du Thorax, Nantes, Fransa) hayvan bakımı protokolündeki yardımları için teşekkür ederiz. Bu çalışma, La région des Pays de la Loire, Fondation d'Avenir ve Casden Bank'tan alınan hibelerle desteklendi. L'institut Cochin'den Catherine Postic, Fadila Benhamed ve Michelle Caüzac'a misafirperverlikleri ve çekimler sürecindeki yardımları için teşekkür ederiz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| < güçlü > İlaçlar< / güçlü > | |||
| Yüksek Yağlı diyet | DIO diyeti | Güvenli | |
| İzofluran | Forane | Baxter | |
| Buprenorfin | Buprecare | Hayvan Bakımı | |
| Marbofloksasin | Marbocyl | Vetoquinol | |
| Amonyum demir sitrat, vitaminler PP-B12 | Fercobsang | Vetokinol | |
| Vitaminler A-D3-E-K-B | Vita Rongeur | Virbac | |
| NaCl %0,9 | NaCl % | ||
| Povidon çözeltisi | Betadine Ovma | Betadine | |
| Povidone çözeltisi | Betadine Çözeltisi | Betadine | |
| Carboptol 980 NF | Ocrygel | TVM | |
| Adı | References< | strong>Company | Comments |
| Sutures | |||
| Prolene® | 8.0, 6,5 mm | Ethicon | |
| Prolene® | 5.0, 13 mm | Ethicon | |
| Name | References | Company | Comments |
| Cerrahi ekipmanlar | |||
| Scissors | FST | ||
| İğne tutucu | Olsen-Hegar | FST | |
| Mikro makas | Vannas | FST | |
| Mikro forseps | Graefe | FST | |
| Mikro forseps kavisli | Graefe | FST | |
| Kavisli mikro iğne tutucu | Castroviejo | FST | |
| Hemostatik kollajen kompres | Pangen | Urgo | |
| Emici alt pedler | VWR | ||
| Name | References | Şirket | Yorumlar |
| >Özel ekipmanlar | |||
| Hematoloji sistemi | Hemavet 950FS | Hemavet | |
| Glikoz şeritleri ve glukometre | Tek dokunuşla Verio | Life taraması | |
| Stereo mikroskop | MZ6 | Leica |
Kaynaklar
- Ng, M., Fleming, T., et al. Global, regional, and national prevalence of overweight and obesity in children and adults during 1980-2013: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2013. The Lancet. 384 (9945), 766-781 (2014).
- Calle, E. E., Thun, M. J., Petrelli, J. M., Rodriguez, C., Heath, C. W. Body-mass index and mortality in a prospective cohort of U.S. adults. The New England Journal of Medicine. 341 (15), 1097-1105 (1999).
- Sjöström, L., Lindroos, A. K., et al. Lifestyle, diabetes, and cardiovascular risk factors 10 years after bariatric surgery. The New England Journal of Medicine. 351 (26), 2683-2693 (2004).
- Buchwald, H., Avidor, Y., et al. Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis. JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).
- Yin, D. P., Gao, Q., et al. Assessment of different bariatric surgeries in the treatment of obesity and insulin resistance in mice. Annals of surgery. 254 (1), 73-82 (2011).
- Buchwald, H., Oien, D. M. Metabolic/Bariatric Surgery Worldwide 2008. Obesity Surgery. 19 (12), 1605-1611 (2009).
- Liu, W., Zassoko, R., et al. Establishment of duodenojejunal bypass surgery in mice: A model designed for diabetic research. Microsurgery. 28 (3), 197-202 (2008).
- Lan, Z., Zassoko, R., et al. Development of techniques for gastrojejunal bypass surgery in obese mice. Microsurgery. , (2010).
- Schlager, A., Khalaileh, A., et al. A mouse model for sleeve gastrectomy: Applications for diabetes research. Microsurgery. 31 (1), 66-71 (2011).
- Troy, S., Soty, M., et al. Intestinal Gluconeogenesis Is a Key Factor for Early Metabolic Changes after Gastric Bypass but Not after Gastric Lap-Band in Mice. Cell Metabolism. 8 (3), 201-211 (2008).
- Seyfried, F., Lannoo, M., et al. Roux-en-Y gastric bypass in mice--surgical technique and characterisation. Obesity surgery. 22 (7), 1117-1125 (2012).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
