Nanoilaçların in vivo performansının zayıf anlaşılması, klinik translasyonlarını engellemektedir. Tümör taşıyan immünokompetan farelerde kanser nanoilaçlarının sistemik, doku, tek hücreli ve subselüler düzeylerde in vivo davranışını değerlendirme prosedürleri burada açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, araştırmacıların klinik çeviri için umut verici kanser nanoilaçlarını tanımlamalarına yardımcı olabilir.
Klinikte önceki kanser nanomedicines başarısı esinlenerek, araştırmacılar son on yıl içinde yeni formülasyonların çok sayıda yarattı. tıbbi gelişim altındadır nanomedicines çoğunluğu hayal kırıklığı yaratan sonuçlar vermiştir ise Ancak nanomedicines yalnızca az sayıda, klinik kullanım için onaylanmıştır. Yeni kanser nanomedicines başarılı klinik çeviri için bir büyük engel in vivo performansını doğru anlama olmaması. Bu makalede, pozitron emisyon tomografisi-bilgisayarlı tomografi (PET-BT), radyoaktivite ölçümü yöntemleri entegrasyonu yoluyla sistemik, doku, tek hücre ve hücre içi seviyede tümör taşıyan farelerdeki nanomedicines in vivo hareketinin karakterize edilmesi sıkı bir prosedürle , flow sitometri ve floresan mikroskobu. Bu yaklaşımı kullanarak, araştırmacılar doğru önemsizdir ilgili fare modellerinde yeni nano formülasyonlan değerlendirebilirr. Bu protokoller yüksek öteleme potansiyeli en umut verici kanser nanomedicines belirlemek ya da gelecekteki çeviri için kanser nanomedicines optimizasyonuna yardımcı becerisine sahip olabilir.
Nanotıp kanser tedavisi geliştirme 1 paradigmasını değiştiriyor. Böyle lipozom ve albümin-temelli nanotherapies 2, 3 olarak önceki kanser nanomedicines, muazzam bir klinik etkisi esinlenerek, birçok yeni formülasyonlar geçtiğimiz on yıl içinde üretildi. Ancak, bu kanser nanomedicines klinik çeviri başarı son analizler bunlardan sadece bir kaç klinik kullanım 4, 5 için onaylanmış olduğunu göstermektedir. Yeni kanser nanomedicines klinik çeviri biri büyük engel ücretsiz terapötik bileşikler 6 doğrudan yöne....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Prosedür nanopartiküllerin ikili radyoaktif ve floresan etiketleme, in vivo PET-BT görüntüleme, ex vivo biyolojik dağılım ölçümleri ve ex vivo immün oluşur ve analiz akım sitometri. Tüm hayvan deneyleri Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi.
Çift etiketli lipozomların hazırlanması 1.
Not: singenik B16 melanoma tümörleri% 2 -isoflurane içeren oksijen teneffüs anestezi altında C57BL / 6 farelerinin arka yanları halinde 300.000 B16-F10 hücreleri enjekte edilerek uyarılabilir. Ameliyat sırasında steril bir çalışma alanında ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Şekil 1 prosedürün bir özetini göstermektedir. Şekil 2, 1. adımda 10'da tarif edilen bir ikili-etiketli lipozomların şematik sentez prosedürü göstermektedir. Şekil aşama 2'de tarif edildiği gibi 3 görüntüleyen Örnek PET BT görüntüsünde (Şekil 3a), PET görüntülemesi (Şekil 3b), kan yarı-ömür (Şekil 3C) ve radyoaktif nanopartiküllerin biyolo.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol çerçevesinde kritik Adımlar:
Çift etiketli lipozomların, yüksek kaliteli, uzun bir süre boyunca tutarlı sonuçlar üretmek için bir anahtardır. Free floresan boyalar ya da 89 Zr iyonları tamamen farklı hedefleme desen oluşturabilir tamamen saflaştırma adımı sırasında uzaklaştırılmalıdır. bağışıklık sistemi önemli ölçüde deney kanseri Nanomedicine performansını etkiler, buna ek olarak, bağışıklık sistemi fare modelleri kullanılması, bu protokol boyunca kullanılan C57BL / 6 fare.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların yapacak herhangi bir açıklaması yoktur.
Yazarlar, Mount Sinai'deki Icahn Tıp Fakültesi'nden Dr. Helene Salmon ve Miriam Merad'a B16-F10-YFP hücrelerini sağladıkları ve melanom fare modelleri konusundaki uzman tavsiyeleri için teşekkür eder. Yazarlar ayrıca destekleri için Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi'ndeki (MSK) Hayvan Görüntüleme Çekirdek Tesisi, Radyokimya ve Moleküler Görüntüleme Probları Çekirdek Tesisi ve Moleküler Sitoloji Çekirdek Tesisine teşekkür eder. Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri hibeleri NIH 1 R01 HL125703 (WJMM), R01CA155432 (WJMM), K25 EB016673 (TR) ve P30 CA008748 (MSK Center Grant) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar ayrıca MSK'daki Moleküler Görüntüleme ve Nanoteknoloji ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| DPPC | Avantilipidler | 850355 | |
| Kolesterol | Sigma-Aldrich | C8667 | |
| DSPE-PEG2000 | Avantilipidler | 880120P | |
| DSPE-DFO | Ev yapımı | 110634 | Perez-Medina et al., JNM, 2014 |
| DiIC12[5]-DS | AAT Bioquest | 22051 | |
| Santrifüj filtre | Vivaproducts | VS2061 | |
| Döner buharlaştırıcı | Buchi | R-100 | |
| Radyo-HPLC | Shimadzu HPLC, 2 LC-10AT pompalı | N/A | |
| 89Zr-oksalat | MSKCC | Evde sentezlenen | TR19/9 değişken ışınlı siklotron (Ebco Industries, Inc.) |
| Mikro PET-CT | Siemens | Inveon Mikro-PET/CT | |
| Gama sayacı | PerkinElmer | 2470-0150 | |
| Akış sitometrisi | BD Biosciences | Fortessa | Herhangi bir çoklu parametrik akış sitometrisi analizörü yeterli olacaktır |
| C57BL / 6 fare | Jackson Laboratories | ||
| B16-YFP melanom hücreleri | Ev yapımı | Yok | Somon et al., Bağışıklık, 2016 |
| Ly6C (klon HK1.4) - APC-Cy7 | 128025 | Biolegend | |
| MHCII (M5 / 114/152) - APC | 107613 | Biolegend | |
| CD45 (30-F11) - BV510 | 103137 | Biolegend | |
| CD64 (X54-5 / 7.1) - PE-CY7 | 139313 | Biolegend | |
| CD11b (M1 / 70) - BV605 | 101237 | Biolegend | |
| CD3 (17A2) - BV711 | 100241 | Biolegend | |
| CD31 (13.3) - PE | 561073 | Biolegend | |
| CD11c (M418) - PerCP-Cy5.5 | 117327 | BD Biosciences | |
| CD31 (13.3) florofor yok | 550274 | BD Biosciences |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste