Yöntem makalesi

İzole edilen fare kalpten interstisyel transüdao toplanması için ters kalp modeli

DOI:

10.3791/55849

⸱

20 Haziran 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Anesthesiology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, 2Department of Molecular Cardiology, Heinrich Heine University, 3Department of Clinical Biochemistry and Pathobiochemistry, German Diabetes Center, Heinrich Heine University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, izole edilmiş perfüze edilmiş fare kalpten kardiyak interstisyel sıvıyı toplamak için bir yöntemi açıklamaktadır. İnterstisyel transüdaatı koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayırmak için, Langendorff perfüze edilen kalp ters çevrilir ve kalp yüzeyinde oluşan transüda (interstisyel sıvı) yumuşak bir lateks kapak kullanılarak toplanır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut protokol, izole edilen salinle perfüze edilen fare kalpten kardiyak transüda (BT) toplanmasına olanak tanıyan eşsiz bir yaklaşımı açıklamaktadır. Kalbin Langendorff tekniğine göre izole edilmesi ve retrograd perfüzyonundan sonra, kalp ters çevrilir ve sol ventriküle yerleştirilen bir balon kateteri ile mekanik olarak stabilize edilir. Daha sonra, daha önce sıçan kalbinin ortalama ebadına uyacak şekilde dökülen ince bir lateks kapak epikardiyal yüzeye yerleştirilir. Lateks kapağın çıkışı, silikon boruya bağlanır ve distal açıklık kalbin taban seviyesinin 10 cm altına düşer ve hafif emiş oluşturur. Epikardiyal yüzey üzerinde sürekli üretilen BT, daha ileri analiz için buzla soğutulmuş şişelerde toplanır. Koroner venöz atık perfüzatın% 0.1-1'sini oluşturan kontrollü ve enfarktüslü kalpte CT oluşum hızı 17 ila 147 μL / dk (n = 14) arasında değişmektedir. Proteomik analiz ve yüksek performansRmance sıvı kromatografisi (HPLC), toplanan BT'nin geniş bir protein spektrumu ve purinergik metabolitleri içerdiğini ortaya koydu.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kalp yetmezliği (HF) dünya çapındaki insanlarda önde gelen ölüm nedenidir 1 . HF genellikle miyokardit, iskemik miyokard hasarları ve sol ventriküler yeniden modelleme nedeniyle ortaya çıkar ve kardiyak kontraktil fonksiyonun ve hastaların yaşam kalitesinin ilerleyici bozulmasına neden olur. Kardiyoloji ve kardiyak cerrahideki gelişmeler HF mortalitesinde belirgin bir düşüşe sahip olmakla birlikte, önemli bir morbiditeye sahip olan kaçınılmaz ilerleyici bir hastalık sürecinin geçici "geciktiricileri" olarak görev yapmaktadır. Bu nedenle, mevcut etkin tedavi eksikliği, HF'yi önleyebilecek veya hatta tersine çevirebilecek yeni moleküler hedefleri tanımlama gereksinimini ortaya koymaktadır. Bu, hücre dışı matriksteki değişiklikler, kontrol edilemeyen kardiyak immün yanıt ve kardiyak ve non-kardiyak hücreler arasındaki etkileşimleri içerir 2 .

Kardiyak hücrelerin direkt olarak maruz kaldıkları mikro çevreyi tanımak önemlidirYaralı kalbin bağışıklık ve rejeneratif tepkisini şekillendirir. İzole edilmiş salinle perfüze edilen kalpte, CT, fizyolojik ve patofizyolojik koşullar altında 3 , 4 , 5 olmak üzere, interstisyel sıvı boşluğundan ( yani, mikro çevre) türemiş küçük damlacıklar şeklinde kalp yüzeyinde üretilir. Bu nedenle, BT'nin ( yani, interstisyel sıvı) analizi, kalp metabolizmasını ve kontraktil fonksiyonunu düzenleyen faktörlerin belirlenmesine veya hasar gören kalbe göç ettikten sonra immün hücre fonksiyonlarını etkilemesine yardımcı olabilir. Potansiyel olarak, bu, KY tedavisi için yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesine yol açabilir.

Kemirgen kalplerdeki BT koleksiyonu teknik açıdan zorlayıcıdır. Düzenli Langendorff perfüze edilen kalpte, BT'nin özel koleksiyonu zordur çünkü BT'nin koronar ile karışımıY venöz atık perfüzat, interstisyel boşluktan salınan herhangi bir metabolit / enzim konsantrasyonunu beklenmedik şekilde inceltir. Bu kısıtlılığın üstesinden gelmek için olası bir strateji, pulmoner kanülle venöz atığın dışlanması ve aynı anda pulmoner ven 7'nin bağlanmasıdır . Bununla birlikte, bu yöntem pulmoner arter ve venin bağlanması ve bağlanması ile ilgili zorluklarla karşı karşıya olup, venöz atığın kardiyak transüda sızmasına neden olabilir. Bir ters kalp modeli kullanma kavramı, ilk önce izole edilmiş, perfüze edilmiş kalbi ters çeviren Kammermeier grubu tarafından ortaya atıldı ve venöz atıkların kontaminasyonu olmaksızın BT'yi sürekli örneklemek için epikardiyal yüzeye ince bir lateks kap yerleştirdi. 8 , 9 . Bu prosedürü kullanarak BT'nin kalpten 9 salınan metabolitlerin çok hassas bir ölçümü sağladığı gösterildi,Yağlı asitlerin 8 kılcal aktarımı ve viral parçacıklar 10 .

Daha yakın zamanlarda, lokal immün yanıtı düzenleyen ve kalp anjiyogenezisini 11 arttıran parakrin faktörler, kök hücre temelli kalp hastalığı tedavisinin yararlı etkileri ile ilişkilendirilmiştir. Ters çevrilmiş kalpteki CT'nin analizi, bu bireysel parakrin faktörleri kimyasal olarak tanımlamaya yardımcı olabilir. Buna ek olarak, BT, kalpteki bağışıklık hücrelerinin in vivo aktivasyonuyla ilgili faktörleri tanımlamaya yardımcı olabilir.

Burada verilen kalp yüzeyinden CT koleksiyonunun ayrıntılı açıklaması, genel kardiyak fonksiyonla ilişkili bağışıklık hücreleri, fibroblastlar, endotel hücreleri ve kardiyomiyositlerin etkileşimini inceleyen araştırmacılar için deneysel açıdan yararlıdır. Yukarıda belirtildiği gibi, interstisyel sıvı, hücreden hücreye iletişim için bilgiyi kalp içinde taşır;BT uygun bir şekilde toplanarak değerlendirilebilir. Ters çevrilmiş kalpten BT nasıl toplanacağına dair bir video protokolü de dahil olmak üzere ayrıntılı teknik açıklama, bu benzersiz tekniğin gelecekteki uygulamasını kolaylaştırmalıdır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm deneyler yerel düzenleyici kurum (Nordrhein-Westfalen, Almanya'nın LANUV) tarafından onaylandı ve hayvan kullanımı yönergelerine göre gerçekleştirildi. Hayvanlar standart dondurma diyeti ile beslendi ve ad libitum musluk suyu aldı. Deneyin her adımında gerekli olan tüm ekipman ve kimyasallar Malzeme Tablosu'nda mevcuttur.

1. Lateks Kapağı ve İntraventriküler Balonun Hazırlanması

  1. Sıçan kalbinin ortalama boyuyla (vücut ağırlığı 300-350 g) eşleşen bir freze makinesini kullanarak alüminyum kalıp yapın. Süper ince (10/0) ​​zımpara kağıdıyla kalıpları silin.
    NOT: Kalıbın ayrıntılı ölçümleri Şekil 1A'da gösterilmiştir.
  2. Lateks kapağını hazırlamak için alüminyum kalıbın boynunu freze makinesine dikey olarak sabitleyin.
    NOT: Freze makinesi, kalıbın yavaş yavaş döndürülmesine neden olur. Alternatif olarak, bir elektrik motoru kullanılabilir. li>
  3. 20 mL sıvı lateks (ticari olarak satın alın, Malzeme Tablosu'na bakın) 50 mL cam beher içine dökün.
  4. Kalıbın tüm gövdesi lateks solüsyona dalıncaya kadar kalıp indirin.
  5. Döndürürken kalıbı yavaşça kaldırın (5 cm / dak.).
  6. Kalıp yüzeyindeki lateks katılaşıncaya kadar, kalıbı 15 dakika daha karıştırmaya devam edin.
  7. Ayırırken hasar görmesini önlemek için kalıbın yüzeyine (zaten ince bir lateks film ile kaplı) yaklaşık 1 g talk pudrası ekleyin.
  8. Kalıp yüzeyinden önceden kurutulmuş lateks kapağı parmaklarla hafifçe ayırın; Lateks kapağı şimdi kullanıma hazırdır ( Şekil 1B ).
  9. Lateks kapağının çıkışını daha sonra CT'nin toplanması için kullanılan 15 cm silikon tüpüne (KIM. = 0.2 mm) bağlayın.
  10. Ventriküler lateks balonu su ile doldurun ve 1 mL'lik, su dolu bir şırıngaya bağlı bir L şeklinde metal kanül üzerine sıkıca sabitleyin (> Şekil 1C).
    NOT: Bu, kalbin dik konumda olmasını sağlamak için kullanılacaktır (aşağıya bakınız).
  11. Ekli 1 mL şırınga ile birkaç deflasyon / şişirme testi gerçekleştirerek balonun hava geçirmez olduğundan emin olun.
  12. İlerletilmiş intraventriküler basınç gelişimini ölçmek için kanülü üç yönlü bir durdurucu vasıtasıyla bir basınç transdüktörüne bağlayın ( Şekil 1C ).

2. Krebs-Henseleit Tampon (KHB) ve Langendorff Perfüzyon Sisteminin Hazırlanması

  1. Sabit akış (bir silindir pompa tarafından tahrik edilen) veya sabit basınç (bir cam kolondaki statik basınç ile üretilen) modunu kullanarak bir Langendorff perfüzyon sistemi oluşturun.
    NOT: Langendorff kalp preparatının ayrıntıları daha önce 12 açıklanmıştır.
  2. Modifiye edilmiş bir KHB'nin 2 L'si hazırlayın (mM: 116.02 NaCl, 4.63 KC1, 1.10 MgS04.7H20, 1.21 K2 HPO4 , 2.52 CaCl2 · 2H20, 24.88 NaHC03, 8.30 D-glikoz ve 2.0 sodyum piruvat).
    1. Tüm kimyasalları ancak CaCl 2 tartın ve 2 L'lik bir şişede 1.8 L'lik iki damıtık suda çözündürün.
    2. Ortamı karboksilik (% 95 O 2 /% 5 CO 2 ) ile manyetik karıştırma altında dengelemede (pH: 7.4) en az 5 dakika kabarcık haline getirin.
    3. 0.74 g CaCI2.2H20 ilave edin ve toplam hacmi, iki kez damıtılmış su ile 2 L'ye getirin.
    4. Karbondioksit ile ortamı 5 dakika daha karıştırıp köpürtmeye devam edin.
    5. Kalbin mikrosirkülasyonunu engelleyebilecek küçük parçacıkları ortadan kaldırmak için KHB'yi 0.2 um filtreyle filtreleyin.
  3. Langendorff perfüzyon sisteminin hazırlanması.
    1. Filtrelenen KHB'yi önceden ısıtılmış su banyosuna (38 ° C) yerleştirin; 100 cmH2O basınç içerecek şekilde karbogen ile kabarcık tutunE KHB rezervuarını.
    2. KHB ile Langendorff perfüzyonu için 100 cmH2O hidrostatik basıncı oluşturmak için rezervuarı cam kolona bağlayın; Karbon ile kolonun içindeki KHB'yi kabarcıklandırmaya devam edin.
    3. Aortik kanül çıkışındaki sıcaklık 37 ° C olacak şekilde ısıtma sisteminin sıcaklığını ayarlayın.
    4. Boru sisteminin kabarcıksız olduğundan emin olun.
    5. KHB'deki PO2 500-600 mmHg'ye (bir kan gazı analizörü ile ölçülene kadar) ulaşana kadar, KHB'yi karbojen ile oksijenle ilave 5 dakika oksijenleyin.
  4. Perfüzyon sistemini, 100 cmH2O sabit bir basınçta veya manuel anahtarlama kullanarak yaklaşık 10-20 mL / dakika sabit bir akış halinde çalıştırmak üzere ayarlayın. Alternatif olarak, perfüzyon moduna anında geçiş yapmak için değiştirilebilir bir STH pompa kontrol cihazı kullanın.

3. Kalp Yalıtımı ve Kanülasyon

NOT: Vücut ağırlığı 30 olan erkek Wistar sıçanları0-350 g kalp boyutları ön dökme lateks kapağı ile eşleşecek şekilde kullanılmıştır. Sıçanlar sol atardamardan 50 dakika boyunca inen (LAD) bağlandıktan sonra reperfüzyon uygulandı veya sahte ameliyat edildi. Miyokard infarktüsünün (MI) indüksiyonu için metodolojinin ayrıntıları başka yerlerde bildirilmiştir 13 . Enfarktüslü hayvanlarda yapılan ters kalp deneyleri ameliyattan 5 gün sonra gerçekleştirildi.

  1. Bir hayvan tutma odasına (20 L) bağlı bir izofluran buharlaştırıcı (% 2 V / V) kullanarak sıçanlara anestezi uygulayın.
  2. Derin anesteziye ulaşıldıktan sonra sıçanları bir çalışma masasına (sıcaklık kontrollü değil) aktarın.
  3. Forseps kullanarak göğüs kemiğinin hemen altındaki cildi ve kasları kaldırın ve ağır makaslarla kaburgaların alt kenarlarında kesin.
  4. İnce makas kullanarak, kaburga kenarında diyaframın içine küçük bir kesit yapın. Tüm ventral göğüs duvarının bir flebi yapmak için kaburgaları kaudally kesin.
  5. Kalbi başparmak ile hafifçe kapın aIndeks ve orta parmakları kaldırın ve yavaşça kaldırın böylece kalp damarları hafif gerilir.
  6. Aort tamamen açığa çıkıncaya kadar kalbi tüketin.
  7. Kalbi, 50 mL buz soğukluğundaki KHB (4 ° C) içeren 100 mL'lik bir behergreye yerleştirin ve perfüzyon aparatına taşıyın.
  8. Hemen kalpten aort yoluyla damlayan bir kanül üzerine monte edin ve dikişle sıkıca tutun (4-0). Kalbe giren hava kabarcığından kaçının.
  9. Sabit perfüzyon basıncı uygulayın (100 cmH 2 O). Alternatif olarak, tam akış hızı (20 mL / dakika ile başlanarak) uygulanabilir.
    Not: Toraksın açılmasından yüreğin perfüzyon kanülüne bağlanmasına kadar olan süre deneyimli bir operatörün elinde yaklaşık 3 dakika sürmelidir.

4. Reversed-heart Model

  1. Kalbin arka duvarı yüzü görünene dek aortik kanülü yavaşça döndürün.
  2. Bağ dokusunu makasla çıkartınSol atriyumun açılmasını açığa çıkararak intraventriküler kanülasyona hazır hale getirir.
  3. Sol atriyum yoluyla katı bir katetere tutturulmuş havalandırılmış lateks balonu sol ventriküle yerleştirin.
  4. Balonu, tüm ventriküler boşluğu doldurana kadar şişirin (şişirme hacmi şırıngada önceden işaretlenmiştir).
  5. Kalbi ters çevene kadar ters çevirin, bunu intraventriküler balon kateteri ile destekleyin.
  6. Şekil 1C'de gösterildiği gibi, sert bir metal kateteri ile intraventriküler balon kullanılarak ters çevrilmiş kalbi dik konumda mekanik olarak stabilize eder.
  7. Aort kökünün aşırı bükülmesini önlemek için kalbin pozisyonunu ayarlayın.
  8. Diyastolik basıncı 3-5 mmHg'ye ayarlayın (intra-ventriküler balon ile ölçülür; bkz. Şekil 1C ).
  9. Kalbin epikardiyal yüzeyini gözleyin ve küçük damlacıkların oluşmasını sağlayın.
  10. Lateks kapağı o yerleştirinParmaklarını kullanarak tüm kalbi hafifçe bastırarak kalbe yüzeye sürükleyin.
  11. Lateks kapağın ventriküler yüzeyin çoğunu kapladığından emin olun.
  12. Varsa, kapak ve tüp içindeki hava kabarcıklarını 1 mL'lik şırıngayla hafifçe emerek çıkarın.
  13. CT-letting hortumunun distal açıklığını kalbin yatay seviyesinin 10 cm altına ayarlayın.
    NOT: Bu prosedür, negatif hidrostatik basınca karşı hafif emmeyi sağlar.
  14. NaCl ile 1: 1 oranında karıştırılmış buz içine yerleştirilmiş 1.5 mL'lik bir toplama tüpünde damlalar toplayın. Yaklaşık 0.15-1.5 mL BT toplayın.
    NOT: Buz / NaCl karışımı, toplama borusundaki sıcaklığı sıfırdan (yaklaşık -4 ° C) sabitleştirir.
    NOT: Örnekleme süresi, deneysel amaca bağlıdır. BT'nin akış hızı, sahte işletilen hayvanlarda (n = 3) yaklaşık 27 ± 20 μL / dk ve koroner lige olan hayvanlar için (n = 11) 100 ± 47 μL / dk'dır.
  15. BT örneklerini tartın ve snap-freeze edinSıvı azot içinde eritin ve sonraki ölçümler için onları -80 ° C'de saklayın.

5. CT'nin analizi

  1. Bilimsel soruna bağlı olarak, metabolitlerin analizi için CT sıvısını kullanın.
    NOT: Şekil 2 ve Şekil 3'te gösterilen veriler sabit basınçlı bir perfüzyon (100 cmH20) 'dan toplanmış ve yaklaşık 0.15-1.5 mL CT sıvısı 10 dakika içinde toplanmıştır. Bu zaman ve hacim, çeşitli purinlerin proteomik (minimum 50 μL; Şekil 2 ) 14 ve HPLC (minimum: 20 μL; Şekil 3 ) için yeterliydi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ters kalp modeli, izole edilmiş, retro-perfüze edilmiş sıçan kalbinde kardiyak interstisyel transüdaatın toplanmasını sağlar ( Şekil 1A- C ). 100 cmH2O sabit bir basınçta perfüze edildiğinde, interstisyel sıvı oluşumu hızı, izole edilen kalpteki koroner venöz atığın% 0.1-1'i kadar, 17 ila 147 uL / ​​dakika arasında değişmektedir.

Bilinçoninik asit (BCA) tahlili ile ölçülen BT'nin ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ters kalp modeli, iyi kurulmuş Langendorff kalp perfüzyon tekniğine 12 dayalıdır ve kalbi ters çeviren bir pozisyona çevirerek ve bu pozisyonu katı bir intra-ventriküler balon kateteri kullanarak tutarak gerçekleştirilir. Böyle bir şekilde, kalp interstisyel transüdat, kalbin tabanından yerçekimi damlamasıyla, koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayrılabilir. BT tüm kalbin yüzeyine yerleştirilen ince ve esnek bir lateks kap yardımıyla sürekli toplanabilir.

B...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ettiler.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma NSFC 81570244, FoKo 23/2013 ve SFB 1116 / B01 tarafından ve Kardiyovasküler Araştırma Enstitüsü Düsseldorf (CARID) tarafından finanse edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Lateks ÇözeltisiProChemieZ-Lateks LA-TZhttp://kautschukgesellschaft.de/%E2%80%A8z-latex-la-tz
Alüminyum KalıpEvyapımı-Terskalp modeli
Üniversal FırınlarMemmertUNB 400Ters kalp modeli
Lateks BalonHugo SachsBoyut 4Ters kalp modeli
Freze MakinesiProxxonMF70Ters kalp modeli
Sodyum KlorürSigmaSZBD0810VKimyasalları
Sodyum Hidrojen KarbonatRoth68852Kimyasallar
Potasyum KlorürMerck49361Kimyasallar
Magnezyum Sülfat HeptahidratMerck58861Kimyasallar
Potasyum Dihidrojen FosfatMerck48731Kimyasallar
D (+) - Glikoz SusuzMerck83371Kimyasallar
Kalsiyum Klorür DihidratFluka21097Kimyasallar
DengesiVWRSE 1202Tartım kimyasalları
Çift Damıtılmış SuDeğirmeni GözenekÇözme kimyasalları
Tıbbi Basınç DönüştürücüAltın-Langendorff aparat
Tıbbi Akış ProbuTransonik3PXNLangendorff aparatı
Isıtma Sirkülasyon BanyosuHaake & nbsp;B3 ; DC1Langendorff aparatı
Laboratuvar ve Vakum BoruTygonR-3603Langendorff aparatı
Hayvan Araştırma Akış ÖlçerlerTransonikT206Langendorff aparatı
PowerLab Veri Toplama CihazıAD InstrumentsÇizelge 7.1Langendorff aygıtı
LabChart Veri Toplama YazılımıAD AletleriÇizelge 7.1Langendorff aparatı
Peristaltik PompaGlisonMINIPULS 3Langendorff aparatı
Cam Su Sütunuevyapımı-Langendorff aparatı
Su Banyosu Koruyucu AjanVWR462-7000Langendorff aparatı
Steril Tek Kullanımlık Filtreler (0.2 & mikro; m)Thermo Scientific595-4520Langendorff cihazı
Kan gazı analizörleriRadiometerABL90 FLEX PLUSGaz analizörü
%70 etanolVWR UN1170Temizleme ve borular
%100 etanolMerck64-17-5Temizleme boruları
Wistar SıçanlarJanvier-Hayvanlar
Paslanmaz MakasAESCULAPBC702RCerrahi Aletler
Paslanmaz MakasAESCULAPBC257RCerrahi Aletler
Büyük ForsepsAESCULAP-CerrahiAletler
8m/m Paslanmaz ForsepsFST11052-10Cerrahi Aletler
süper ince (10/0) zımpara kağıdı3M051111-11694Ters kalp modeli

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Henkel, D. M., Redfield, M. M., Weston, S. A., Gerber, Y., Roger, V. L. Death in heart failure: a community perspective. Circ Heart Fail. 1 (2), 91-97 (2008).
  2. Limana, F., et al. Myocardial infarction induces embryonic reprogramming of epicardial c-kit(+) cells: role of the pericardial fluid. J Mol Cell Cardiol. 48 (4), 609-618 (2010).
  3. Brunner, F. Cardiac tissue endothelin-1 levels under basal, stimulated, and ischemic conditions. J Cardiovasc Pharmacol. 26, Suppl 3. S44-S46 (1995).
  4. de Lannoy, L. M., et al. Renin-angiotensin system components in the interstitial fluid of the isolated perfused rat heart. Local production of angiotensin I. Hypertension. 29 (6), 1240-1251 (1997).
  5. Strupp, M., Kammermeier, H. Interstitial Lactate And Glucose-Concentrations Of the Isolated-Perfused Rat-Heart before, during And after Anoxia. Pflugers Arch. 423 (3-4), 232-237 (1993).
  6. Wienen, W., Jungling, E., Kammermeier, H. Enzyme-Release into the Interstitial Space of the Isolated Rat-Heart Induced by Changes in Contractile Performance. Cardiovasc Res. 28 (8), 1292-1298 (1994).
  7. De Deckere, E. A., Ten Hoor,, P, A modified Langendorff technique for metabolic investigations. Pflugers Arch. 370 (1), 103-105 (1977).
  8. Tschubar, F., Rose, H., Kammermeier, H. Fatty acid transfer across the myocardial capillary wall. J Mol Cell Cardiol. 25 (4), 355-366 (1993).
  9. Wienen, W., Kammermeier, H. Intra- and extracellular markers in interstitial transudate of perfused rat hearts. Am J Physiol. 254 (4 Pt 2), H785-H794 (1988).
  10. Sasse, A., Ding, Z. P., Wallich, M., Godecke, A., Schrader, J. Vascular transfer of adenovirus is augmented by nitric oxide in the rat heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (3), H1362-H1368 (2004).
  11. Gnecchi, M., Zhang, Z., Ni, A., Dzau, V. J. Paracrine mechanisms in adult stem cell signaling and therapy. Circ Res. 103 (11), 1204-1219 (2008).
  12. Herr, D. J., Aune, S. E., Menick, D. R. Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts. J Vis Exp. (101), e52908(2015).
  13. Ding, Z., et al. Epicardium-Derived Cells Formed After Myocardial Injury Display Phagocytic Activity Permitting In Vivo Labeling and Tracking. Stem Cells Transl Med. 5 (5), 639-650 (2016).
  14. Hartwig, S., et al. Secretome profiling of primary human skeletal muscle cells. Biochim Biophys Acta. 1844 (5), 1011-1017 (2014).
  15. Smolenski, R. T., Lachno, D. R., Ledingham, S. J. M., Yacoub, M. H. Determination of sixteen nucleotides, nucleosides and bases using high-performance liquid chromatography and its application to the study of purine metabolism in hearts for transplantation. J Chromatogr. 527 (2), 414-420 (1990).
  16. Decking, U. K., Juengling, E., Kammermeier, H. Interstitial transudate concentration of adenosine and inosine in rat and guinea pig hearts. Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), H1125-H1132 (1988).
  17. Heller, L. J., Mohrman, D. E. Estimates of interstitial adenosine from surface exudates of isolated rat hearts. J Mol Cell Cardiol. 20 (6), 509-523 (1988).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Kardiyak Trans da ToplamaLangendorff Perf zyonuLateks Kap MontajBalon Kateter Stabilizasyonunterstisyel S v rneklemesiProteomik AnalizHPLC P rin TespitiKoroner Ven z Effluent

İlgili makaleler