Burada fare Zika virüs kaynaklı microcephaly bir model oluşturmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu iletişim kuralı embriyonik, Yenidoğan ve yetişkin-sahne intraserebral aşılama Zika şunun için yöntemler içerir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İntraserebral enjeksiyon stratejileri kullanarak Zika virüs kaynaklı nörolojik bozukluklar için fare modelleri oluşturma: embriyonik, Yenidoğan ve yetişkin
Bu makalede
Özet
Özet
Zika (ZIKV) bir flavivirus Kuzey, orta ve Güney Amerika'da şu anda endemik virüstür. Şimdi ZIKV microcephaly ve ek beyin anormallikler neden olabilir kuruldu. Ancak, gelişmekte olan beyin ZIKV patogenezinde temel mekanizması belirsizdir. İntraserebral cerrahi yöntemler sık nörolojik araştırma soruları normal ve anormal beyin gelişimi ve beyin fonksiyonu hakkında için kullanılır. Bu iletişim kuralı klasik cerrahi teknikler kullanır ve modeli ZIKV ilişkili insan nörolojik hastalık için fare sinir sisteminde izin yöntemleri açıklar. Doğrudan beyin aşı virüs iletim normal moda model değil iken, yöntemi müfettişler sonucu gelişen beyin ZIKV enfeksiyon sonra ilgili hedeflenen sorular sormak sağlar. Bu iletişim kuralı ZIKV, İntraventriküler aşılama embriyonik, Yenidoğan ve yetişkin aşamaları açıklar. Hakim sonra bu yöntem sadece gerçekleştirmek için birkaç saat sürer bir basit ve tekrarlanabilir teknik haline gelebilir.
Giriş
Microcephaly hastalarda ortalama baş boyutundan küçük ile karakterize arızalı beyin gelişimi kaynaklanan bir durumdur. Microcephaly çocuklarla gelişimsel gecikme, nöbet, Fikri Engellilik, işitme kaybı, görme sorunları ve hareket ve denge, diğerlerinin yanı sıra, hastalığın şiddetine bağlı olarak sorunları kapsayan belirtiler bir dizi Sergi ve 1,2,3neden. Doğada, genetik, bulaşıcı Ajan ve microcephaly4,5,6,7,8n....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan iletişim kuralları takip ile University of Southern California ve Georgia Üniversitesi hayvan bakımı yönergeleri kullanın. Ötanazi yöntemleri hamile barajlar ve yetişkinler için onaylanmış protokolleri göre gerçekleştirilir: karbon dioksit boğulma, ötenazi emin olmak için bir ikincil yöntem olarak servikal yerinden çıkması ve ardından. Yenidoğan pups-are euthanized tarafından işten çıkarma.
Dikkat: Aşağıdaki protokol patojenik virüs işleme içerir. Virüs taşıma sırasında gerekli tedbirleri alınmalıdır. Tüm iletişim kurallarını kullanmadan uygun kurumsal Komitesi önce tarafından onaylanması gerekir.
1. emb....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bizim enjeksiyon yöntemleri embriyonik beyin ZIKV aşılama için temsil edici görüntüleri intraserebral enjeksiyonları (şekil 1A) resmeden diyagramlarında gösterilen ve intrauterin ve gösteren intraplacental enjeksiyonu (şekil 1B), yol hamile Barajı ve embriyo görüntülenebilir ve ameliyat için (embriyonik aşı Protokolü) odaklı. Şekil 2A ZIKV (MEX1-44) enfeksiyon (flavivirus grup antijen, yeşil karşı an.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Burada açıklanan ZIKV intraserebral aşı beyin gelişiminde ZIKV kaynaklı zararların soruşturma için embriyonik, Yenidoğan ve yetişkin aşamalarında için bir yöntemdir. Basit olsa da, müfettişlerin çalışma kalitesi ve güvenliği ile ilgili bu emin olmak için gerçekleştirmeniz gereken bazı hususlar vardır.
DENV ZIKV için flavivirus cins yakından ilgilidir. DENV Pediatrik beyin bozukluğu insanlarda nedensel bağlanmamış. DENV2 başarılı bir şekilde bulaştırmak ve gelişmekte olan beyin embriyonik aşıla.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Yazarlar Dr Abdellatif Benraiss Rochester Üniversitesi rehberlik ve tartışmalar için yetişkin cerrahi ve kardiyolojik teknikleri öğrenme ile ilgili kabul etmek istiyorum. Yazarlar ayrıca Dr. James Lauderdale adlı UGA onun stereotaksik ekipman ve tartışmalar kullanımı için ilgili bu tekniği için metodoloji ve ilerlemesi için araştırma üniversite bilim adamları (yay) temel için ayarlamak kabul etmek istiyorum onların ve bizim NIH desteği (R01NS096176-02, R01NS097231-01 & F99NS105187-01 NINDS verir).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Esnek Tahrik Mili Matkap Asılı Motor | Leica | 39416001 | |
| Fare Stereotax Kopf | 04557R | ||
| Micro4 Microsyringe Pompa Kontrol Cihazı | WPI | SYS-MICRO4 | |
| UMP3 UltraMicroPump | WPI | UMP3 | |
| Modulamp | |||
| hortumu (19 gauge) | Hamilton | 90619 | |
| Erime Noktası Kılcal | Kimble | 34500-99 | Cam iğne |
| Fluoro-Max: Kırmızı Floresan Mikro Küreler | Thermo Scientific | R25 | Seyreltme yok; Pratik enjeksiyonlar için kullanın |
| 10 ve mikro; L, Model 1701 LT SYR | Hamilton | 80001 | embriyonik aşılama |
| için 10 ve mikro; L, Model 1701 RN SYR, Küçük Çıkarılabilir NDL, 26s ga, 2 inç, nokta stili 2 | Yenidoğan/yetişkin için | Hamilton | 80030 |
| 4-0 Ethilon Naylon Sütürler | Etikon-Mineral | ||
| Yağ | VWR-mikropipet | ||
| çektirme | Sutter Instruments | P-1000 | |
| Mikropipet Öğütücü | Narishige | EG-44 | |
| Fastgreen FCF Boya | Sigma | F7252 | %0.5 Boya |
| Antikorlar | |||
| Flavivirüs grubu antijen antikoru | Millipore | MAB10216 | ms IgG2a 1:400 enjekte eder (Şekil 2, Şekil 3) |
| Pax6 | DBHB | Pax6-s | ms IgG1 1:20 |
Kaynaklar
- Dreher, A. M., et al. Spectrum of Disease and Outcome in Children with Symptomatic Congenital Cytomegalovirus Infection. J of Pediatr. 164 (4), 855-859 (2014).
- Lanzieri, T. M., et al. Long-term outcomes of children wit....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
