Yöntem makalesi

Kavernöz sinir stimülasyonu ve kayıt bir sıçan Intracavernous basınç

DOI:

10.3791/56807

⸱

23 Nisan 2018

 ,  ,  , 
1Biomedical Laboratory and the Research Unit of Urology, Department of Clinical Research, University of Southern Denmark, 2Department of Surgery, University of Vermont, 3Research Unit of Urology, Department of Clinical Research, University of Southern Denmark, 4Department of Urology, Odense University Hospital

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada bir basitleştirilmiş cerrahi müdahale ve kavernöz sinir stimülasyonu sinir-elektrot yalıtım ile gerçekleştirmek için teknik açıklar karmaşık silikon yapıştırıcı ve intracavernous basınç ölçüm kullanarak.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kavernöz sinir (CN) uyarılması ve intracavernous basınç (ICP) ölçümü kullanılan kapsamlı bir şekilde test etmek ve değerlendirmek için erektil disfonksiyon terapiler. Ancak, kullanılan yöntemleri laboratuvarlar arasında değişir ve tuzaklar hareketsiz var olmak. Bu çalışmanın amacı bir güvenilir ve tekrarlanabilir model sağlayacak bir cerrahi teknik açıklamak için oldu. İschiocavernosus kas, kural yumrunun tarihinde ekleme noktasında teşhir ederek penis crus en az diseksiyon ve yapıları erektil işlev ilgili yaralanma ile cannulated. Kaldırma ve kurutma, gerek kalmadan CN tekrarlanan uyarılması elektrot-sinir kompleksi yalıtmak için bir 125 µm manik depresif gümüş elektrot ve Biyouyumlu silikon yapıştırıcı kullanarak sağlanır. Bu yöntem germe ve sinir kurutma azaltarak neuropraxia engeller ve elektrik kaçağı inkâr ve alternatif yollar uyarılması önleme sinirin tam izolasyon sağlar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Vivo çalışmada deneysel hayvanlarda erektil fonksiyonunun 1863 Eckhard1öncü deneysel çalışmaları ile başladı. Elektrostimülasyon pelvik sinir köpeklerde artan ICP ikna etmek için kullanıldı. 20 yy benzer deneysel protokoller kediler ve tavşan, köpek, maymun gibi büyük hayvanlar kullanılmaya başlanmıştır. Bir sıçan erektil işlev değerlendirmek ilk Quinlan ve ark. 19892tarafından geliştirilmiştir. Yöntem beri modifiye edilmiş ve birkaç diğer gruplar34tarafından güncelleştirildi. Bugün, en yaygın kullanılan hayvan modeli patoloji erektil disfonksiyon eğitim ve gelişmekte olan tedavi seçenekleri değerlendirmek için faredir. Sistemik kan basıncı ICP bir artış ikna etmek için Şah damarı, ölçmek ICP penis crus cannulation ve CN uyarılması bir satırını kullanarak kayıt yordamı ana adımları içerir. Çeşitli araştırmacılar model iyileştirdiyseniz rağmen onun tekrarlanabilirlik bir sorun olmaya devam etmektedir ve değişken sonuçları farklı Laboratuvarları tarafından bildirilmiştir. Çeşitli tuzaklar, devam.

Önceki Makaleler5,6,7,8,9,10 penis kavernöz vücut cannulation için degloving ile tam penis pozlama kullanımını açıklar. Bu manipülasyon olarak en iyi bir yaklaşım değildir ve yıkıcı diseksiyon erektil işlev için gerekli olan yapılar için yaralanma neden olur. CN diseksiyon de açıklanan10,11oldu, ama sinir stimülasyonu deneysel sonuçları etkileyebilecek Multipl faktörler nedeniyle en uygun değil. CN stimülasyon tekniği çevreleyen doku sinir sinir konumlandırılmış, bipolar kanca elektrodu, çekerek ve her stimülasyon önce sinir kurutma tarafından kaldırma içerir. Bu sinir hasarı ve elektrik geçerli sızıntı, azalmış yanıt veya ICP alternatif yolları örneğin, Pelvik Taban kasları, mesane uyarılması yoluyla yanlış artış elde edilen ve gastrointestinal değişik derecelerde açabilir yolu12. Tüm bu faktörlerin tekrarlanabilirlik sınırlayın.

Bizim çalışma sırasında derinlik ve anestezi türünü ICP üzerinde büyük bir etkiye sahip görülmektedir. Anestezikler kullanılan sodyum Fentobarbital, ketamin/xylazine veya ketamin/midazolam enjeksiyon veya isoflurane/oksijen zehirlenmesi olabilir.

Burada biz basitleştirilmiş bir cerrahi yöntem tanımlamak ve veri deneysel protokol standardizasyon destek sağlamak.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvanlar, Güney Danimarka Üniversitesi hayvan bakım tesisi kurumsal yönergelere göre yer. Tüm hayvan deneyleri Ulusal Sağlık Enstitüleri Kılavuzu bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Bu akut, Sigara survival cerrahi bir işlemdir.

1. hazırlanması boru, elektrot ve cerrahi işlem için aygıtlar

  1. Mikrocerrahi cihazlar kullanın: Cerrahi makas, açılı mikro makas, doku forseps, Dumont #7 çifti ve #5 eğri mikro forseps, mikro iğne bağı ve traktör.
    Not: Bu akut bir yordam olarak, aletleri sterilize gerek yoktur. Kullanın sonra temiz ve ipuçları % 70 etanol ile silin.
  2. Tüp % 70 etanol içinde ıslatın ve sonra steril %0,9 ile flush NaCl ile 100 U/mL heparin kullanmadan önce. Hava kabarcıkları içine belgili tanımlık sistem tanıtımı önlemek için dolu boru bırakın.
  3. Polietilen (PE)-50 boru bir kateter ICP ölçüm için yapmak için bir 20-30 cm uzunluk parça kesti. Tüp basıncı nemlendirme azaltmak olabildiğince kısa olduğundan emin olun.
  4. İğne ortada tatili kadar bir steril 24 G iğne yan-yan viraj. Parça eğimi PE boru penis crus içine eklenmek distal ucuna bağlayın. Diğer yarısı bağlantı için basınç detektörler hub'ına ekleyin. Sistem heparinized serum (100 U/mL) doldurun.
  5. İki kutuplu Teflon kaplı elektrot yapmak için eşit uzunlukta kesilmiş iki 125 µm gümüş teller. Masanın kenarına teller takın ve onları birlikte iş parçacığı için bir parça bant kullanın. Daha sonra elektrot bir siyah plaka ekleyin.
  6. Teflon içine küçük bir kesi yapmak ve Teflon kaplama elektrot uçları kapalı 4-5 mm uzunluğunda şerit için #5 mikro forseps kullanın. İpuçları bile uzunluğu ulaşmak ve uçları künt kenarında bir neşter bıçak bükme tarafından kanca oluşturmak için bir neşter ile kesti.
  7. Biraz yukarı doğru işaret kanca ile siyah plaka kenarına uzanan ucuyla elektrot teyp. 10 s ve şal bir tutkal kabarcık elektrot kanca 1-2 mm çapında için plastik tabakta silikon yapıştırıcı karışımı.
  8. Yaklaşık 5 dakika kullanım (şekil 1) önce kurumasını bekleyin. Şerit Stimülatörü bağlantı için izin vermek için Teflon diğer ucunda, daha uzun bir bölümünden.
    Not: Distal ucunda kanca yeniden yapıyor ile elektrot birçok kez yeniden kullanılabilir.

2. hayvan hazırlanması

  1. Hayvan anesthetizing sonra karın, boyun ve perine alt yarısının tıraş. Hayvan povidone-iyot tarafından üç kez takip % 70 alkol ile fırçalayın. Fareyi bir sırtüstü pozisyonda bir ısıtmalı cerrahi pedi yerleştirin. Veteriner göz merhem uygulamak ve % 2.5 isoflurane ve 0, 8 L/dak oksijen taşıyıcı olarak ile burun konisi için anestezi geçmek.
    Not: İsoflurane ve anestezi kabul edilebilir bir düzeyde sağlamak için oksijen düzeyini ayarlayın.

3. presurgical hazırlık

  1. Çalışma bir mikroskop altında tüm cerrahi işlem gerçekleştirmek: 3,15 X 20 X arasında değişen bir büyütme yeterlidir. Kullanım eldiven ve ameliyat boyunca temiz bir ortam sağlamak. Fareyi bir örtüsü yerleştirin.

4. Ischiocavernosus kas diseksiyon ICP ölçümü için

  1. Bir neşter, düz makas kullanın ve Dumont #7 kavisli 1 cm dikey yapmak için mikro forseps cilt kesi 5 mm lateral penis tabanı düzeyinde başlayan ve aşağıya doğru (şekil 2A) uzanan orta hat için. Bir pamuklu çubukla kullanın ve fasya lateral skrotum (şekil 2B) için dikkatlice ayırın. Fasya anatomi sonra makaralara eklemek ve bir pamuk-uçlu-kural yumrunun (şekil 2C) bulmak için takas ile muayene et.
  2. İschiocavernosus kas görüntülenir kadar bu noktada yağ dokusu medial teşrih (şekil 3A). Dumont #7 eğri mikro forseps bir çift kullanın ve boyuna kas ayrı. Tunica albuginea parlak beyaz yapı (şekil 3B) olarak görünür. Mikro forseps ve mikro makas kullanarak, yeterince onun ders (şekil 3 c) görmek için tunica albuginea ortaya çıkarmak.
  3. Sistem ayarlarını kalibrasyon sonra tüp penis crus (şekil 4) paralel gidiyor emin perine üzerinde deri yoluyla yerleştirin. Çizginin yerinde bırakmak ve belgili tanımlık kesme serum fizyolojik ile nemli tutmak.

5. CN diseksiyon uyarılması için

  1. 2 cm daha düşük, karın Ensizyon, ilk olarak, bir neşter ve bir çift düz makas ve mikro forseps kullanarak deri yoluyla olun. Linea boyunca fasya ile eşleşen bir giriş oluşturmak alba ve temel kas doku mesane ve prostat duyurmak.
  2. Çok iyi bir pozlama elde etmek için kullanın. Prostat açık görsel olarak büyük pelvik sinir düğümü (MPG) elde etmek için yağ dokusundan ayırmak için pamuk-uç temizleme bezi kullanın ve CN, prostat (şekil 5) dorsolateral yönü üzerinde çalışan.
  3. Sonra görselleştirme MPG ve CN, dikkatli bir şekilde sinir 2-5 mm için MPG distal açılı mikro makasla (şekil 6a) örten fasya deşmek. #5 mikro forseps kullanımı ile her iki tarafta bir sinir ve bir 4-mm uzun bölümü (şekil 6b) ücretsiz için altında doku Yayılı ve sinir (şekil 6 c) altında 9-0 dikiş kaydırın.
  4. Sinir sinir (şekil 7b) çevresinde İki kutuplu elektrot kanca yerleşimini kolaylaştırmak için dikiş (şekil 7a) yardımıyla hafifçe yükseltmek. Sinir için 5 s. kuru iğne ve Tutkal kanca ve sinir (Şekil 7 c, d) çevresi için geçerli bir asistan karışım iki bileşenli silikon yapıştırıcı bir insülin ucu ile izin. Biraz kuru tutkal izin vermek yaklaşık 1 dakika için elektrot çekerek sinir yukarıda tut.
  5. Dışında herhangi bir çekmek veya elektrot büküm önlemek için sağ tarafta Traktör Traktör kaldırın. Maruz kalan organların serum içinde belgili tanımlık kesme üzerinde batırılmış tuzlu ve yatıyordu gazlı bez ile ıslak.

6. kavernöz vücut Cannulation ICP ölçümü için

  1. Ekartör kullanarak tunica albuginea görselleştirme geri. Crus tahrif edecek gibi traktör ischiocavernosus kas değil eklemek emin olun.
  2. İğne takın ve tunica albuginea tanıtımı önce boru heparinized serum fizyolojik ile yıkayın. Gergin, bir elinde Dumont #7 eğri mikro forseps kullanarak tunica albuginea (non-baskın), tunica albuginea ve üstteki kas geri kalanı ekleme noktasına distal basılı tutmak. İğneyi diğer baskın elinde düz mikro Forseps ile sık ve onu tanıtmak kavernöz vücut (şekil 8) ders ile paralel.
  3. 5-8 mm iğne kavernöz vücudun içine itin. Tüp Temizleme ve crus üzerinde yolun (Şekil 9) test etmek için tuşuna basın. Hiçbir sızıntı olduğundan emin olun. Hatta yanlışlıkla çekerek önlemek için bant ile tabloya boru vidaları sıkıştırın. Ekartör kaldırın.

7. CN uyarılması

  1. Kayıt programı (örneğin, Spike 2) ile çalışan, sürekli olarak her iki intracavernous ve ortalama arter basıncı kaydetmek.
  2. Bir uyarıcı (örneğin, SD9 çim aletleri, bkz: Malzemeler tablo) CN uyarılması için aşağıdaki parametreleri ayarlayın: 1,5 mA, frekans 16 Hz, 3 V gerilim ve darbe genişliği 1 dk stimülasyon en az 5 Bayan uygulamak 50 s, geçerli Elektrodlar arasında bekletin.
    Not: İlk elektrodlar genellikle azalmış yanıtın (şekil 10) yol.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kullanılması önerilen stimülasyon ayarları bu protokolle inhalasyon anestezi isoflurane %2.0 oksijen ile altında 0, 8 L/dak, üretmek sonuçları Şekil 11 ve şekil12', gösterildiği gibi olmadığı bir yerde birden fazla arka arkaya Elektrodlar arasında 75-80 mm Hg. şekil 13 gösterir aynı kararlı yanıt 20 dk stimülasyon yanıtı ile üzerinde istikrarlı 73-77 mm Hg. Test hattı ICP ölçüm için tüp kızarma v...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Penis crus cannulation ICP kayıt için basitleştirilmiş bir cerrahi teknik ve yalıtım CN elektrostimülasyon için açıklamak için bu çalışmanın asıl hedefi oldu. Biz ameliyat basitleştirmek ve CN stimülasyon ile tekrarlanabilir kayıtları ICP artış sağlamak kavernöz vücut diseksiyon değişiklikler tanıttı. 1 cm dikey cilt kesi ile aşikar kural yumrunun kılavuz kullanarak penis tabanına yanal ischiocavernosus kas ve tunica albuginea iyi bir pozlama elde. Bu yordamı daha hızlıdır (küçük 15 dk) edebiyat ve nedenleri minimal doku...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Adson forsepsGüzel Bilim Aracı11006-12
Dumont #7 forsepsGüzel Bilim Aracı11271-30
Dumont #5 forsepsGüzel Bilim Aracı11273-20
ToughCut Mayonez makasGüzel Bilim Aracı14110-15
Minyatür Vannas Yaylı makasGüzel Bilim Aracı15006-09
Ultra İnce HemostatGüzel Bilim Aracı13020-12
Crile HemostatGüzel Bilim Aracı13004-14
Kwik-Sil YapıştırıcıDünyası Hassas AletlerKWIK-SIL
Teflon kaplı gümüş tel 0.125 mmDünya Hassas AletlerAGT0510
Elastik tel ekartörlerÖzel yapım
Neşter bıçağıGüzel Bilim Aracı10023-00
PE-50 boruWarner Instruments64-0753
23 G İğneKruuse121272
SD-9 Kare Nabız StimülatörüSomatco1077/183
Kan basıncı dönüştürücü ve kabloWorld Precision InstrumentsBLPR2
Raucotupf Pamuk Uçlu AplikatörlerLohmann-Raucher11966
Pro-ophta Oküler ÇubuklarLohmann-Raucher16515
NaCl 0,9 % 100 mLYerel eczane
HeparinYerel eczane
25 mL ŞırıngaOdense Üniversite Hastanesi
Veteriner göz merhemi - ViscotearsYerel eczane
gümüş teller Science Products GmbH, Heidelberg, Almanya
Silikon Yapıştırıcı Kwik-Sil, Dünya Hassas Aletleri, Sarasota, FL, ABD

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Eckhard, C. Untersuchungen über die Erektion des Hundes In: Beiträge zur Anatomie und Physiologie. , Vol. Band III Giessen: Ferber 123-166 (1863).
  2. Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W., Mostwin, J. L., Walsh, P. C. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
  3. Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
  4. Martinez-Pineiro, L., et al. Rat model for the study of penile erection: pharmacologic and electrical-stimulation parameters. Eur Urol. 25 (1), 62-70 (1994).
  5. Hayashi, N., et al. The effect of FK1706 on erectile function following bilateral cavernous nerve crush injury in a rat model. J Urol. 176 (2), 824-829 (2006).
  6. Burnett, A. L., Becker, R. E. Immunophilin ligands promote penile neurogenesis and erection recovery after cavernous nerve injury. J Urol. 171 (1), 495-500 (2004).
  7. Yamashita, S., et al. Nerve injury-related erectile dysfunction following nerve-sparing radical prostatectomy: a novel experimental dissection model. Int J Urol. 16 (11), 905-911 (2009).
  8. Burnett, A. L., et al. GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction. J Sex Med. 12 (4), 897-905 (2015).
  9. Lin, H., et al. Nanoparticle Improved Stem Cell Therapy for Erectile Dysfunction in a Rat Model of Cavernous Nerve Injury. J Urol. 195 (3), 788-795 (2016).
  10. Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K., Choudhary, R., Bodakhe, S. H. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
  11. Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
  12. Cellek, S., Bivalacqua, T. J., Burnett, A. L., Chitaley, K., Lin, C. S. Common pitfalls in some of the experimental studies in erectile function and dysfunction: a consensus article. J Sex Med. 9 (11), 2770-2784 (2012).
  13. Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
  14. Mullerad, M., Donohue, J. F., Li, P. S., Scardino, P. T., Mulhall, J. P. Functional sequelae of cavernous nerve injury in the rat: is there model dependency. J Sex Med. 3 (1), 77-83 (2006).
  15. Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. J Sex Med. 7 (10), 3331-3340 (2010).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

ntrakavern z Bas n KaydPenil Crus Kan lasyonuPeriferik Sinir zolasyonuBipolar Elektrot Yerle tirmeSilikon Yap t r c UygulamasS an Erektil Disfonksiyon ModeliCerrahi Prosed r Tekrarlanabilirli iAnestezi Oksijenasyon EtkileriMinimal nvaziv Diseksiyon

İlgili makaleler