Düzenleme çoğu yetişkin organizmalarda tümörleri ile ilgili genler Homeobox genleri bulunmaktadır. Biz onların karşılaştırmalı ifade immunohistokimyasal ve gerçek zamanlı PCR analizleri, normal ve inflamatuar burun mucosae ve onlara olası tanı ve tedavi hedefleri kullanmak için sinonasal neoplazmlar tarafından araştırdık.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sinonasal karsinom ve koku nöroblastomlar için iki olası moleküler işaretleyici olarak OTX1 ve OTX2 tanımlama
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
OTX (HB) homeobox genleri embriyonik morfogenez ve yetişkin organizmalarda koku epitel gelişimi sırasında ifade edilir. Bu genlerinde meydana gelen mutasyonlar kez insan tumorigenesis ilgili. Veri ile ilgili OTX genler ve burun boşluğuna tümörler arasındaki olası korelasyon bugün mevcuttur. Bu çalışmanın amacı, OTX1 ve OTX2 olarak nazal tümör gelişiminde moleküler belirteçleri kabul edilebilir eğer anlamaktır. Biz immunohistokimyasal ve gerçek zamanlı PCR analizleri OTX1 ve OTX2 genlerin ifade araştırmak için Burun kemiği ve sinonasal Adenokanserine seçildi. OTX1 ve OTX2 devamsızlık saatlerinizi tüm örneklerinde sinonasal bağırsak tipi Adenokanserine (ITACs). OTX2 mRNA sadece koku nöroblastomlar (ONs) ifade edildi iken OTX1 mRNA sadece sigara-Intestinal tip Adenokanserine içinde (NITACs) tespit edilmiştir. OTX1 ve OTX2 genler için fark gen ekspresyonu sinonasal tümör farklı tür ayırt edilebilmesi için yararlı bir moleküler işaretçisi olabilir göstermiştir.
Giriş
OTX HB genler (otd) Drosophila orthodenticle genlerin omurgalı homologue ve onlar normalde sırasında embriyonik morfogenez ifade edilir transkripsiyon faktörleri için kodlamak, ama onlar da farklı fonksiyonları ile yetişkin canlı ifade edilebilir . Embriyonik gelişim sırasında hücre kimliğini, hücre farklılaşma ve vücut axis¹ konumlandırma belirtimi kontrol ediyorlar. OTX ailesi farklı işlevler görüntülemek OTX1 ve OTX2 gen içerir. OTX1 beyin ve duyu organı geliştirme ilgilenmektedir. Yetişkin canlı duyu organları ifade edilir ve2hipofiz ön LOB düşük seviyelerde sentezlenir; Bu da hematopoiesis, hema....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm çalışmaları (1975) Helsinki Bildirgesi ile aydınlatılmış onam yazılı ve Varese Insubria Üniversitesi etik kurul tarafından onaylanmış göre yapıldı.
1. toplama örnekleri
- Toplamak ve insan Formalin-Fixed Paraffin-Embedded (FFPE) örnekleri WHO sınıflamasına göre baş ve boyun tümörleri14göre farklı alt gruplar bölmek.
Not: Aşağıdaki örnekleri burada kullandığımız: Normal sinonasal mukoza kontrolü (10 örnekleri); Ters Papilloma (IP, ICD-O kodu 8121/1); Sinonasal ITAC (ICD-O kodu 8144/3, 32 örnekleri); NITAC (ICD-O kodu 8140/3, 12 örnekleri); Adenoid Kistik Karsinom (ACC, ICD-O kodu 8200/3....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Normal mukoza OTX genler siliyer pseudostratified türü solunum epitel ve submucosal glandüler hücreler (şekil 1A) için güçlü ve homojen nükleer reaktivite görülmektedir. Bulduk nükleer ifadede tüm NITACs örnekleri (şekil 1B), az ise veya immunoreactivity OTX1 için ITACs (şekil 1 c) vurgulandı. Yoğun immunoreactivity mevcut tüm ONs (şekil 1 d); PDNECs arasında OTX ifade ç.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu çalışmada gösterir, mRNA düzeylerine göre ilk defa OTX1 ve OTX2 HB genler ifade normal sinonasal mukoza ve submucosal bezleri, inflamatuar polipler, sinonasal Schneiderian papillomas ve farklı epitel ve nöroektodermal neoplazmlar, Skuamöz Karsinom, bağırsak türü sinonasal Adenokanserine, Tükürük bezi tipi tümörler, nöroendokrin neoplazmlar ve ONs da dahil olmak üzere.
Değişiklikler ve sorun giderme:
RNA yıkımı önlemek için biz patoloji laboratuvar deparaffinization .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Bu eser tarafından Centro Grandi Strumenti Università dell'Insubria, Fondazione Comunitaria del Varesotto, Fondazione del desteklenmiştir Monte di Lombardia ve Fondazione Anna Villa e Felice Rusconi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| RecoverAll Toplam Nükleik Asit İzolasyonu | Uygulanan Biyosistem | AM1975 | |
| Yüksek Kapasiteli cDNA Ters Transkripsiyon Kiti | Uygulamalı Biyosistem | 4368814 | |
| TaqMan Universal PCR Master Mix, AmpErase UNG | Uygulamalı Biyosistem | 4326614 | |
| ABI Prism 7000 | Uygulamalı Biyosistem | 270001857 | |
| ACTB probu | Uygulamalı Biyosistem | Üretim dışı. Dizi, telif hakkı ile korunmaktadır | |
| OTX1 probu, | Applied Biosystem | , Üretim dışı. Dizi, telif hakkı | |
| OTX2 probu | Applied Biosystem | Üretim dışı. Sekans telif hakkı ile korunmaktadır | |
| Sulu Hidrojen Peroksit | Merk | 1072090250 | |
| Sitrat Tamponu | Sigma-Aldrich | 20276292 | |
| Triton | Sigma-Aldrich | 101473728 | |
| Tris | Merk | 108382 | |
| NaCl | Merk | 106404 | |
| Keçi Anti-OTX2 Antikor | Vektör Laboratuvarları | Üretim dışı. Katalog numarası mevcut değil | |
| Tavşan Anti-Keçi Antikoru | Vektör Laboratuvarları | BA5000 | |
| ABC-Peroksidaz Kompleks | Vektör Laboratuvarları | PK6100 | |
| 3,3'-diaminobenzidin tetrahidroklorit (DAB) | Sigma-Aldrich | D5905 | |
| Harris Hematoksilen | Bioptica | 0506004/L | |
| Pertek | Kaltek SRL | 1560 | |
| BioClear | Bioptica | W01030799 |
Kaynaklar
- Boncinelli, E., Simeone, A., Acampora, D., Gulisano, M. Homeobox genes in the developing central nervous system. Ann genet. 36 (1), 30-37 (1993).
- Omodei, D., et al. Expression of the Brain Transcription Factor....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
