αvβ3 integrin angiogenez geçiren aktive endotel hücreleri son derece ifade yapışma protein türüdür. Böylece, integrin bütünlüğünü değerlendirmek Onkoloji büyük ilgi olmuştur. Burada, 68Ga etiketli radiopeptides hazırlamak için bir yöntem ve biyolojik etkinliğini değerlendirmek için bir yöntem sunar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
68Ga etiketli arginin glisin aspartat (RGD) hazırlama-peptid angiogenez için
Bu makalede
Özet
Özet
αvβ3 integrin tümör hücre göç ve anjiogenezi dahil bir heterodimeric yapışma moleküldür. İntegrin nerede genellikle düşük bir konsantrasyonu vardır anjiogenik tümör endotel hücreleri, overexpressed. Bu belirli ifade αvβ3 anjiogenik ve görüntüleme uyuşturucu için geçerli bir biyomarker kolaylaştırır. Fonksiyonel bir görüntüleme yöntemi pozitron emisyon tomografisi (PET) biyokimyasal ve fizyolojik hakkında bilgi vivo içindebenzersiz yüksek hassasiyeti nanomolar ölçekte nedeniyle değişiklikleri sağlar. Bu nedenle, evde beslenen hayvan Radyofarmasötikler radiometal tabanlı tümör angiogenez non-invaziv miktar için büyük bir dikkat aldık. Bu İnceleme angiogenez değerlendirme için yeni bir radiometal etiketli peptid hazırlamak için sistemik bir protokol sağlar. Bu iletişim kuralı radiochemical güvenilirlik, lipophilicity, hücre alımı, serum istikrar ve farmakokinetik özellikleri hakkında bilgi içerir. 68Ga-RGD-peptid temsilcisi evde beslenen hayvan ligandlar αvβ3 integrin doğru biridir. Burada, bir 68Ga-RGD-peptid ve onun biyolojik etkinliği değerlendirilmesi hazırlamak için bir protokol tanıtmak.
Giriş
Angiogenez yeni kan damarları geliştirme tarafından karakterize biyolojik bir süreçtir. İntegrin son derece anjiogenik tümör damarlarının ifade edilir ama yoktur çünkü birçok angiogenetic faktörler arasında αvβ3 integrin invasiveness ile ilişkili normal doku1.
Radiolabeled reseptör-bağlama peptidler αvβ3 integrin reseptörleri doğru yüksek bir yakınlık vardır, umut verici angiogenez ajanlar2,3 Imaging olarak kabul edilir arginin glisin aspartat (RGD) etki alanıyla , 4
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan deneyleri yönergelere uygun olarak bakım ve kullanım araştırma hayvanlar için Kore Enstitüsü radyolojik ve Tıbbi Bilimler hayvan çalışmalar Komitesi tarafından onaylanmış protokolleri altında yapılmıştır. Tüm reaktifler ve çözücüler satın ve daha fazla arıtma kullanılır. NOTA-RGD-peptidler edebiyat yöntemleri15göre hazırlanmıştır.
Dikkat: 68Ga pozitron ve gama ışınları yayar. Radyoaktif maddeler ile doğrudan veya dolaylı temas da dahil olmak üzere tüm deneyler, eğitimli ve sadece personel izin tarafından üstlenilen gerekir. Radyoaktif malzemeler ele alırken, uygun koruyucu ekipman, koruyucu, rad....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
68GaCl3 NOTA-RGD-peptid ile şelasyon açıktı ve radiolabeling verim % 99 idi. Reaksiyon kirleri Şekil 2' de gösterildiği gibi başarılı bir şekilde kaldırıldı. 68Ga-RGD-peptid radiochemical saflığı 99 %'den büyük ve sentez sonundaki belirli aktivite 90-130 MBq/nmol (Şekil 3).
Hücre alımı değerleri 68için Ga-RGD-peptid vardı %1.4.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Mevcut çalışma, biz αvβ3 integrin ve onun biyolojik değerlendirme hedefleyen bir radiopeptide hazırlamak için bir protokol tanıttı. Geleneksel ilaç geliştirme karmaşık bir yordam içerir. Başvuru bilgileri ve görece uzun değerlendirme zaman büyük miktarda gerektirir. Her ne kadar önerilen metodoloji hassas değerlendirme sürecinin yerini alamaz, bu sistem amaçlar eleme için kullanılabilir. Bu sistemi önemli ölçüde zaman ve maliyeti azaltmak önerdi.
Son on yıl içinde birçok .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Bu eser bir nükleer araştırma ve geliştirme programı Kore hükümeti (No. 2017M2A2A6A02019904) tarafından finanse edilen Ulusal Araştırma Vakfı, Kore (NMG) hibe tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 68Ga/68Ge jeneratör | ITG | Company-10 | mCi |
| Hidrojen klorür çözeltisi | Sigma-aldrich | 84429 | |
| Sodyum asetat | Sigma-aldrich | S2889 | |
| C18 ters fazlı kartuş | Sular | WAT020515 | |
| 0.22-μ m steril filtre | Milllipore | SLGV033RS | |
| Radio-TLC tarayıcı | Bioscan | AR2000 | |
| ITLC kağıdı | Agilent | SGI001 | |
| Sitrik asit | Sigma-aldrich | 251275 | |
| HPLC | Waters-Waters | 1525 sistemi içeren ikili pompa, foto diyot dizisi (Waters 2998), radyoaktivite dedektörü (Raytest, Gabi) | |
| Asetonitril | J.T. Baker | 14-650-359 | |
| Trifloroasetik asit | Sigma-aldrich | 302031 | |
| Dulbecco'nun modifiye edilmiş Eagle ortamı | Thermo fisher scientific | 11965092 | |
| fetal sığır serumu | Thermo fisher scientific | 16000044 | |
| T175 şişeleri | Corning | CLS431080 | |
| Tripsin-EDTA (% 0.25) | Thermo fisher bilimsel | 25200072 | |
| penisilin-streptomisin | Thermo fisher bilimsel | 15240112 | |
| &gama;-sayaç | Perkin | Sihirbaz 3 | |
| Insunlin şırınga | Becton Dickinson | 326105 | |
| Synringe pompası | Harvard Aparat | 70-4500 | |
| mikro-PET / CT | Siemens Inveon | - |
Kaynaklar
- Friedlander, M., et al. Definition of Two Angiogenic Pathways by Distinct alpha v integrins. Science. 270 (5241), 1500-1502 (1995).
- Janssen, M. L., et al. Tumor Targeting with Radiolabeled alpha v beta 3 Integrin Binding Peptides in a Nud....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
