Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kızılötesi termometre pasif sistemik anafilaksi ve gıda Anti değerlendirme sırasında kullanarak fare vücut sıcaklık ölçümü

25.9K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/58391

⸱

14 Eylül 2018

 ,  , 

Bu makalede

Özet

Burada doğru bir şekilde pasif sistemik anafilaksi (PSA) ve bir kızılötesi termometre kullanarak gıda Anti fare modelleri vücut sıcaklık farklılıkları ölçmek için yeni bir yöntem mevcut. Bu yordamı doğru önceki PSA sonuçlarında yinelenen.

Özet

Fare vücut sıcaklık ölçüm araştırma alerji ve anafilaktik semptomlar için büyük önem taşımaktadır. Rektal sonda sıcaklığı okumalar için ortak ve bu konuda doğru ve çok değerli olduğu kanıtlanmıştır. Ancak, bu yöntem bir sıcaklık ölçüm fareler hayvan yaralanma olmadan sonda eklemek için anestezi gerektirir. Bu diğer fenotipleri fare aynı anda gözlemlemek yeteneğini sınırlar. Sıcaklık ölçme sırasında diğer fenotipleri araştırmak için rektal sonda ideal değildir ve başka bir yöntem istenen. Burada, vücut sıcaklığı ölçme içinde rektal sonda için eşit güvenilirliği korurken fare anestezi gereksinimini güzel sıcaklık ölçümü invaziv olmayan bir yöntem tanıtmak. Biz vücut yüzey sıcaklıkları aralıkları 2 ve 150 mm arasında algılar bir kızılötesi termometre kullanın. Bu yöntem vücut sıcaklık ölçüm güvenilir bir şekilde sıcaklık değişikliği trendleri farelerde pasif sistem anafilaksi deneyler sırasında çoğaltma içinde başarılı olur. Biz vücut yüzey sıcaklığı yaklaşık 2.0 ° C rektal sonda ölçümleri düşük olan ancak aynı eğilim sıcaklık damla derecesini takip gösterir. Ayrıca, sıcaklık ve aktivite düzeyleri aynı anda değerlendirmek için gıda Anti modeli farelerde gözlemlemek için aynı yöntemleri kullanabilirsiniz.

Giriş

Vücut ısısı ölçümü hayvan anafilaktik semptomlar etkilerinin izlenmesi önemli bir parçası1,2modelleri olmuştur. Sıcaklık farkları geleneksel olarak rektal sonda termometreler fareler3,4tarafından ölçülen. Bu ölçümler ile müfettişler güvenilir değişkenler arasındaki sıcaklık farklılıkları tasvir; Ancak, bu yöntem zaman alan bir işlemdir ve vücut ısısı artırabilir fareler için sıkıntı neden olur. Rektal sondalama da mukozal yırtılma ve enfeksiyon3neden olabilir. Ayrıca, fareyi insanca sıcaklık3ölçmek için r....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri hayvan bakım ve kullanım Komitesi La Jolla Enstitüsü tarafından alerji ve İmmünoloji için kabul edildi.

1. fare vücut sıcaklık ölçüm Anesthetization sırasında

  1. Fareyi bir anestezi indüksiyon kutuya koyun. %5 isoflurane ile oksijen 1 L/dak akışını kullanarak anestezi.
    Not: fare gönüllü hareketi sona erer ve 30 'un üzerinde alternatif olarak, solunum hızı monitörü s. için ve bir kez fareler her 2 başına 1 nefes, nefes hareketsiz oldu Anesthetization onaylandıktan s ya da daha uzun, anesthetization doğruladı.
  2. Bir işaret parmağı ve başparmak ile boynun ense tarafından fare basılı tutun ve alt karın gös....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Pasif sistemik anafilaksi: IV enjeksiyon için 10 hafta yaşlı kadın BALB/c fare anestezi. Önce enjeksiyon, 1. adımda açıklandığı gibi kendi vücut sıcaklığı (Video 1) ölçülür. Şekil 1 her iki popülasyonun sıcaklık eğilim IV enjeksiyon sonra gösterir. PBS kontrol fare 1.1 ° C en yüksek bir damla 20 dk7' de varken IgE hassas fare 3.0 ° C en yüksek sıcaklık damla 20 dk az gösterdi. Ayrıca, bu süreç boyunca, her fare hareket.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Açıklanan protokol anestezi kullanmadan vücut sıcaklığı ölçme amacı ile kurulmuştur. Hangi sıcaklık ile okuma elde edilebilir göreli kolaylığı rağmen bu teknik, stres ve farklı ortam sıcaklığı gibi daha belirgin efektler ek karşılamak çeşitli uyarılar vardır.

İlk olarak, deneme boyunca sabit sıcaklık okuma sağlamak için sıcaklık ölçülür nerede konum anatomik işaretlerini kullanarak önceden belirlenmiş gerekir ve müfettişler dedi vücut ölçümü çoğaltmak gerekir konum. Fare forepaws bir kafes vey.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Araştırma laboratuarı NIH tarafından desteklenen Kawakami verir: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 ve R41AI124734-01.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Temassız kızılötesi termometreSinoPieDT-8861
Anti-dinitrofenil (DNP) IgESigma AldrichD8406-.2MG
PrecisionGlide 30 G iğneBD305128
PrecisionGlide 26 G iğne ve nbsp;BD305111
1 mL şırıngaBD309659
Dinitrofenil - insan serum albüminiBiyoarama TeknolojileriD-5059-10
Tavuk yumurtası beyazından elde edilen OvalbuminSigma AldrichA5503-50G
Imject ŞapThermoFisher Scientific77161
Hayvan Besleme İğneleri, tek kullanımlıkFisher Scientific01-208-87

Kaynaklar

  1. Finkelman, F. D. Anaphylaxis: lessons from mouse models. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), Quiz 516-507 506-515 (2007).
  2. Lee, J. K., Vadas, P. Anaphylaxis: mechanisms and management. Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).
  3. Newsom, D. M., Bolg....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Gıda Alerjisi Modeliİnvaziv Olmayan Sıcaklık ÖlçümüRektal Prob KarşılaştırmasıSıcaklık Düşüş AnaliziDavranışsal Fenotip DeğerlendirmesiAnestezisiz YöntemSıcaklık Aktivite Korelasyonu