Sol atriyal stenoz (LAS), Grup 2 pulmoner hipertansiyon (PH) ve pulmoner venöz arterialization altında yatan mekanizmaları eğitim için kullanılan yeni bir cerrahi tekniktir. Burada, bir titanyum klibi kullanarak pulmoner venöz arterialization neden ve PH kutusundaki bir fare orta sol atriyum sıkmak için bir protokol mevcut.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sol atriyal stenoz indüklenen pulmoner venöz Arterialization ve Grup 2 sıçan pulmoner hipertansiyon
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Mitral darlığı kaynaklı pulmoner venöz arterialization ve Grup 2 pulmoner hipertansiyon (PH) mekanizması bilinmiyor. Grup 2, kemirgen bir model olduğunu PH, mitral darlığı hastalığı mekanizmaları ve potansiyel tedavi stratejileri incelenmesi kolaylaştırmak için (MS), nedeniyle. Biz bir roman fare modeli Grup 2 ve pulmoner venöz kan birikmesi kaynaklı pulmoner venöz arterialization mevcut PH sol atriyal stenoz (LAS) tarafından neden oldu. LAS bir yarı-kapalı titanyum klibi kullanarak sol atriyum constricting tarafından sağlanır. LAS ameliyattan sonra bir sıçan model bir transmitral giriş akımı hızı büyüktür veya eşit 2.0 m/s ekokardiyografi üzerinde yavaş yavaş pulmoner venöz arterialization ve Grup 2 geliştirir PH 8 - 10 haftalık süre. Bu protokol için biz LAS ameliyatı nasıl adım adım bir yordam sağlar. Sunulan LAS fare modeli MS insanlarda taklit eder ve pulmoner venöz arterialization temel moleküler mekanizması eğitim ve Grup 2 için terapiler preklinik değerlendirilmesi için yararlıdır PH.
Giriş
Bu makalenin amacı, Rat LAS ameliyat konusunda adım adım yönerge göstermektir. Cerrahi müdahale ile indüklenen LAS yakından taklit eden MS ve kor triatriatum insanlarda1sol atriyum mekanik bir tıkanıklık oluşturulması dahil. Tıkanıklık genellikle sol ventrikül (LV) giriş akımı pulmoner venöz dolaşım tıkanıklığı neden olur ve hastaların yavaş yavaş PH geliştirmek. Dünya Sağlık Örgütü PH sol kalp hastalıkları nedeniyle 2, Grup olarak sınıflandırır hangi PH2,3,4en yaygın grubudur. Sol kalp hastalıkları olan hastalar PH tanısında ilişkilidir 1 yıllık standartlaştırılmış ölüm4yedi kat artış büyüktür. Şu anda, Grup 2 için onaylanmış hiçbir tedavi yoktur PH temel tedavi dışında kalp hastalıkları (cerrahi olarak stenotic mitral kapak yerineÖrneğin,) yaptı. Ancak, bile etkili mitral kapak replasmanı tamamen ikiye kadar MS5hastalarda PH gidermez. Bu kalıcı PH olumsuz pulmoner vasküler remodeling nedeniyle, hangi kötü anlaşılmaktadır arasındadır. Bu nedenle, hayvan modelleri temel moleküler mekanizmaları olumsuz pulmoner vasküler Grup 2 şeklinin değiştiğine dair anlayışımızı geliştirmek için önemli PH.
Orada Grup 2 doktora koroner arter ligasyonu6,7 birkaç hayvan model ve transvers aort bantlama8,9,10 rodents en sık kullanılan Grup 2 PH hayvan modelleri. Bu modellerin büyük dezavantajı Grup 2 PH çalışmalar sonucu yorumlamak zordur LV katılımı olduğunu. Buna ek olarak, LV LAS modelinde olduğu gibi kalır. Ayrıca, çünkü PH yavaş ve ilerici geliştirme 10 haftalık dönem11üzerinde sonuçlar LAS modeli klinik olarak uygundur. İnsanlarda, MS transmitral Doppler akım hızı 2.0 m/s11büyüktür ve biz de bu numarayı bir kesme LAS cerrahi önemli stenoz üretti olup olmadığını belirlemek için kullanın önemli olarak kabul edilir. Ayrıca, her ne kadar hafif ya da orta PH LAS model oluşturur, karakteristik histolojik değişiklikler, insan hasta, yani intrapulmonary venöz arterialization11gelişimi ile benzer gösterir. LAS sıçan bir roman ve klinik Grup 2 PH modeli korunmuş LV fonksiyonu ile modelidir. Kalıcı pulmoner vasküler remodeling, moleküler hedeflerin belirlenmesi ve Grup 2 için yeni tedavilerin test Patofizyoloji eğitim için uygun PH.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
LAS Deneysel protokol Jikei Üniversitesi School of tıp hayvan bakımı Komitesi ve Üniversitesi araştırma ve Etik Komitesi (iletişim kuralı #2015-118) tarafından onaylanmıştır.
1. pre-operative hazırlık
- Hayvan tesisinde geldikten sonra 5-hafta-yaşlı erkek Sprague Dawley rats arasında 150 ila 200 g işlem öncesinde onların yeni ev için alışmana için 1 hafta ile sağlar.
- Ameliyattan önce aşağıdaki ekipman ısıyla tarafından hazırlamak: 1) küçük hayvan solunum, anestezik 2) bir makine, 3) bir entübasyon seti (hemostat forseps, dil depressor ve bir 18 G angiocatheter bir çift oluşan), 4) cerrahi aletler (ki Kıvrımlı pensler çifti, düz forseps çifti, bir iğne sürücü, göğüs Retraktörü, makas, 5-0 monofilament dikiş, klip aplikatör, Orta-büyük klipleri ve 23 G göğüs tüpü içerir).
- Steril Pamuklu ve gazlı bez kanama ile başa çıkmak hazır var.
- Ameliyat sırasında yaklaşık 37 ° C hayvan vücut ısısını korumak için bir ısıtma yastığı kullanın.
2. anestezi ve endotrakeal entübasyon
- Fareyi bir indüksiyon odasında 2 L/dk Oda hava ile karışık %5 isoflurane ile anestezi.
- Entübasyon önce sıçan göğüs saç saç tıraş makinesi ile tıraş ve saç dökücü krem ince saç kaldırmak için geçerlidir.
- Entübasyon öncesi başarılı anestezi onaylamak için pedal refleks denetleyin.
- Bir dize ile ön dişleri kanca ve dize iki iğne ile güvenli.
- Sıçan ağız hemostat forseps ile açın ve dil depressor ağız içine yerleştirin.
- Vokal kord görselleştirmek için dil depressor kaldır.
Not: Vokal kord görselleştirmek yardımcı olmak için fareyi baş bölge üzerinde güçlü bir ışık parlamaya yardımcı olur. - 18 G angiocatheter bir Endotrakeal tüp nefes borusu takın ve sonra hızlı bir şekilde, solunum için kateter takın.
- Tidal hacim gram ile solunum 100 nefes/dakika başına 10 µL ayarlayın.
- Anestezi ile % 2 isoflurane 2 L/dk Oda hava ile karışık bakımını yapar.
3. cerrahi sitesi hazırlanması
- Scrubs klorheksidin ve alkol x3 alternatif ile cerrahi site hazırlamak.
- Buprenorfin vermek 0.01 mg/kg subkutan.
- Steril örtü fareyle kapsar.
- Pedal refleks bir başarılı entübasyon ve bakım anestezi onaylamak için kontrol edin.
4. sol atriyal darlığı cerrahi
- İşaret bir kural ile fare sol koltuk altında 2 cm kesi yer.
- 2 cm makas çifti ile lateral göğüs duvarı kesi yaptı olun.
- Dördüncü ve beşinci kaburga, göğüs boşluğuna girerek kadar düz ve eğri forseps kullanarak arasında interkostal kaslara ayırın.
- Göğüs Retraktörü göğüs boşluğuna yerleştirin. Timus ve kalp doğrudan görsel öğeyi almak için interkostal kas ayırmak için düz ve eğri forseps kullanmaya devam.
- Timus bir çift düz forseps ile kaldırın. Kalp makas çifti ile kapsayan timus kaldırın. Kesme veya herhangi bir büyük kan damarlarının alay kaçının.
- Dikkatli bir şekilde 5-0 monofilament dikiş sol ventrikül, sol atriyal apendiks altındaki yüzey üzerinden geçmek. İğne büyük koroner arterler yoluyla geçen kaçının.
- Dikiş yeri ve hiçbir önemli kanama sonra gevşek bir düğüm.
- Göğsünden kalp kaldırmak için ileri ve dikiş iplik yukarı çekin.
- Hızlı bir şekilde bir kez kalp göğüs dışarı kaldırdı, Orta-büyük bir klip hemen üstünde mitral kapak sol atriyum uygulanır.
Not: Klip yarım, sol atriyal darlığına neden sol atriyum pinching klip ucu ile kapalı olduğunu. - Hızlı bir şekilde kalp göğsüne koy. Kalp olmadığından göğüs 30 daha uzun süre dışında olun s.
- Kalp kaldırmak için kullanılan kalış dikiş kaldırın.
- Basit bir kesintiye uğramış desen kullanarak bir 5-0 monofilament dikiş ile göğüs kapatın.
- Bir 10 mL şırınga göğsüne bağlı 23 G göğüs tüpü yerleştirin ve sonra göğüs duvarı kas ve deri basit kesintiye uğramış dikiş ile kapanış ile devam edin.
- Herhangi bir hava, kan ve plevral efüzyon ile ekli 10 cc şırınga ve sonra çekme tüpü kullanarak eklenen göğüs tüpü çizmek.
- Basit bir kesintiye uğramış desen kullanarak 5-0 monofilament dikiş, cilt katmanıyla kapatın.
- Buprenorfin vermek 0.01 mg/kg subkutan.
- İsoflurane açın.
- Spontan solunum gözlenen sonra solunum kesmek.
- Entübe sıçan tutmak ve o uyanana kadar ısıtma yastığını kurtarmak sağlar.
- Güvenli bir şekilde sonra bir veya daha fazla aşağıdaki işaretleri var/mı sıçan tübü gözlenen: fareyi dört onun bacaklarda hareket etmeye başlar, onun iyileştiren refleks kavuşur, onun öğürme refleksim kavuşur veya kendiliğinden geçersiz kılma görüntüler.
5. ameliyat sonrası bakım
- Her 8-12 h, vermek buprenorfin 0.01 mg/kg subkutan. Carprofen 5 mg/kg verilir subkutan günlük olarak 2 gün ve fare iyi hareket etmiyor ve gibi görünüyor sonra gerektiği gibi acı çekiyor.
- Fareyi su tıkaç hemen ameliyat sonrası içme zorluk olabilir gibi 5 mL normal salin de subkutan ameliyattan sonra vermek.
6. onay sol atriyal stenoz ekokardiyografi ile başarı
- Transtorasik ekokardiyografi LV giriş akımı hızı belirlemek için ameliyattan sonra 2 hafta gerçekleştirin.
- 1 bölümünde anlatılan adımları izleyerek sıçan anestezi.
- Anestezi indüksiyon sonra anestezi ile % 2 isoflurane 2 L/dk Oda hava ile karışık bir burun konisi kullanarak koruyun.
- Sıçan göğüs duvarı saç tıraş makinesi ile tıraş ve saç dökücü krem kalan herhangi bir saç kaldırmak için kullanın.
- Beşinci interkostal göğüs çevresinde yer sol tarafında kalp tepe ultrason sondası yerleştirin. İyi bir dört-odası görünüm elde edilir kadar sonda bu bölgede hareket etme.
- Mitral kapak halka hemen üstünde Geniş puls-wave Doppler modunu kullanarak LV giriş akımı hızı ölçer.
- Bir LV giriş akımı hızı 2.0 m/s, 8-10 hafta sonrası LAS cerrahi orta pulmoner hipertansiyon gelişimi için gerekenden daha fazla.
7. sahte işlem
- Klip (adım 4,9) uygulama dışında yaş eşlemeli, sham işletilen kontrol (SOC) fareler oluşturmak için yukarıdaki tüm adımları gerçekleştirin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
LAS etkinliğini ekokardiyografi, 2 hafta ameliyat sonrası kullanılarak doğrulanır. Fareler 2.0 m/s, bir dört-odası görünümü ile ölçülen daha büyük bir LV giriş akımı hızı önemli stenoz (Şekil 1) geliştirdik ve güvenilir bir şekilde orta PH ve pulmoner venöz arterialization 8-10 hafta sonrası LAS cerrahi geliştirmek için kabul edilir.
On hafta sonrası LAS cerrahi, sol atriyal büyütme (
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Zaten önemli ilgi araştırmacılar alan12,13' te alınan bir roman grubu 2 PH modeli LAS faredir. Karşılaştırma iki varolan Grup 2 model için domuz yavruları ve supracoronary aort bantlama (SAB) fare modeli8,kullanarak yani pulmoner damar darlığı (PVS) modeli14,9,10, LAS fare modeli birkaç vardır avantajları. PVS piglet modeline kıyasla, LAS fare mod...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa gerek yok.
Teşekkürler
Yazarlar Mitacs-Japonya toplum bilim promosyon (JSP'ler) yaz programı için kabul eder. Ping Yu Xiong Jikei Üniversitesi Tıp Fakültesi ziyaret etmek Mitacs-JSP'ler yaz programdan fon tarafından desteklenmiştir. Dr. Minamisawa kısmen Milli Eğitim Bakanlığı, kültür, spor, bilim ve teknoloji, Japonya (S.M.), Stratejik Araştırma Vakfı, özel üniversiteler (S.M.), araç yarış Hatıra için MEXT-Supported Program tarafından desteklenmektedir Vakfı (S.M.) ve Jikei Üniversitesi Lisansüstü Araştırma Fonu (S.M.) Bu proje için mali desteği ile. Dr Archer kısmen ABD ulusal kurumları sağlık (NIH) hibe NIH 1R01HL113003-01A1 (S.L.A.) ve NIH 2R01HL071115-08 (S.L.A.), Kanada Vakfı yenilik için Tier 1 Kanada araştırma sandalye mitokondrial Dynamics ve Translational tarafından desteklenmektedir Tıp (S.L.A.), William J. Henderson Vakfı, Kanada vasküler ağ ve Kraliçe'nin kardiyopulmoner birimi (QCPU).
Yazarlar Bay Tadashi Kokubo, Şef, fotoğraf hizmetleri, Jikei Üniversitesi için video filme için Tıp Fakültesi, akademik bilgi merkezinin kabul etmiş oluyorsunuz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 5-0 Prolene Sütür | Johnson & Johnson - Ethicon | 8725H | HEMO-SEAL Teknolojili Polipropilen sütür |
| Anestezi Makinesi | Wakenyaku Co., Ltd. | BRTK-100A | Hava pompası ve anestezi makinesi |
| Anjiyokateter kılavuz teli | 1 cc'lik bir şırıngaya yapıştırılmış kendinden yapılmış 10 cm kılavuz tel | ||
| Göğüs ekartörü | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | F-2 | |
| Göğüs tüpü 23G 23G | iğne artı plastik tüpe bağlı kendi kendine yapılan | ||
| Kavisli forseps | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | A-14 | |
| Isıtma yastığı | Vivaria | MP-916-NV | Vücut ısısını 37 santigrat derecede tutun |
| Horizon Bağlama Klipsleri | Teleflex | REF 003200 | Boyut Orta-Büyük |
| Boy Horizon Manuel Yük Bağlama Klipsi Uygulayıcı Orta-Büyük Boy Horizon | Teleflex REF 337085 | Ligasyon Klipsleri Açılı Çene, (20cm) | |
| İğne tutucu | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | MC-40 | |
| Kemirgen Maskesi | CWE Inc | SAR-830/P | Küçük hayvan ventilatörü |
| Makas | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | B-12 | İdeal olarak yuvarlak uçlu düz makas |
| Düz forseps | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | A-7 | |
| Dil bastırıcı | Uchida Yoko Co., Ltd. | 8-615-2417 | Geniş ucu kullanın |
Kaynaklar
- McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease. Circulation. 31, 263-272 (1965).
- Strange, G., et al. Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort. Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).
- Moreira, E. M., et al. Prevalence of Pulmonary Hypertension in the General Population: The Rotterdam Study. PLoS ONE. 10 (6), e0130072(2015).
- Wijeratne, D. T., et al. Increasing Incidence and Prevalence of World Health Organization Groups 1 to 4 Pulmonary Hypertension: A Population-Based Cohort Study in Ontario, Canada. Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 11 (2), (2018).
- Briongos Figuero, S., et al. Predictors of persistent pulmonary hypertension after mitral valve replacement. Heart and Vessels. 31 (7), 1091-1099 (2016).
- Jiang, B. H., Tardif, J. C., Shi, Y., Dupuis, J. Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure. European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).
- Dayeh, N. R., et al. Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice. Scientific Reports. 8, (2018).
- Yin, J., et al. Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure. Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).
- Wang, Q., et al. The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease. PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).
- Hunt, J. M., et al. Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease. American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).
- Fujimoto, Y., et al. Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).
- Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. J., Hadri, L. Pulmonary hypertension arising from left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 281-282 (2018).
- Alsoufi, B. Not a Cinderella story. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 282-284 (2018).
- Kato, H., et al. Pulmonary vein stenosis and the pathophysiology of "upstream" pulmonary veins. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (1), 245-253 (2014).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
