Farelerde sürekli olarak alçalan torasik aort anevrizmalarını tetikleyen bir cerrahi protokol uyguluyoruz. Prosedür sol torakotomi içerir, torasik aort maruzkalma, ve aort duvarında domuz pankreas elastaz batırılmış bir sünger yerleştirme.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Topikal Elastaz Indüklenen İndüklenen Torasik Aort Anevrizması Murine Cerrahi Modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Hastalık Kontrol Merkezi'ne göre, 1999-2016 yılları arasında tüm ırklarda ve her iki cinste de aort anevrizmaları (AAs) önde gelen ölüm nedeni olarak kabul edildi. Anevrizma, kritik bir çapa ulaştığında yırtılma veya yırtılma yapabilen aortun ilerleyici zayıflaması ve nihai genişlemesi sonucu oluşur. Göğüste alçalan aort anevrizmaları, inen torasik aort anevrizmaları denir (dTAA), Amerika Birleşik Devletleri'nde anevrizma vakalarının büyük bir kısmını oluşturan. Kontrolsüz dTAA rüptürü neredeyse evrensel olarak ölümcüldür ve elektif onarım yüksek oranda morbidite ve mortaliteye sahiptir. Modelimizin amacı özellikle dTAA'yı incelemek, dTAA'nın patofizyolojisini açıklamak ve büyümeyi durdurmak veya dTAA'nın boyutunu küçültmek için moleküler hedefler aramaktır. Torasik patolojiyi tam olarak incelemek için bir murine modeline sahip olarak özellikle dTAA'yı test etmek için hedefli tedaviler geliştirilebilir. Yöntem, cerrahi maruziyet sonrası domuz pankreatik elastazın (PPE) doğrudan dış mürin aort duvarına yerleştirilmesine dayanmaktadır. Bu yıkıcı ve inflamatuar reaksiyon oluşturur, hangi aort duvarı zayıflatır ve aylara haftalar boyunca anevrizma oluşumunu sağlar. Murine modelleri sınırlamalara sahip olsa da, dTAA modelimiz öngörülebilir boyutta sağlam anevrizmalar üretir. Ayrıca, bu model dTAA büyümesini durdurabilecek veya yırtılmayı önleyebilecek genetik ve farmasötik hedefleri test etmek için kullanılabilir. İnsan hastalarda, bu gibi müdahaleler anevrizma rüptürü ve zor cerrahi müdahale önlemeye yardımcı olabilir.
Giriş
Bu yöntemin amacı aort anevrizması oluşumu sırasında inen torasik aortun gelişimi, patofizyolojisi ve yapısal değişikliklerini incelemektir. Modelimiz farelerde torasik aort anevrizmalarını (dTAA) indüklemek için tekrarlanabilir ve tutarlı bir yöntem sunarak çeşitli genetik ve farmakolojik inhibitörlerin test edilmesine olanak sağlamaktadır. Bu çalışma, dTAA hastalığı olan insanlar için uygulanabilir bir tedavi stratejisine çevrilebilecek ilaçların ve gen terapilerinin belirlenmesine yardımcı olabilir.
torasik aort duvarı zayıfladığında ve zaman içinde genişlediğinde yırtılma veya yırtılma meydana geldiğinde kritik bir çapa ulaşıncaya kadar....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan protokolleri Virginia Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (No. 3634) tarafından onaylanmıştır.
1. Anestezi indüksiyonu ve entübasyon
- 8-10 haftalık erkek C57BL/6 fareyi kapalı bir odaya %5 izofluran ve oksijen karışımı ile solunumlar gözle görülür şekilde yavaşlayıncaya kadar 5 dakika boyunca yerleştirin.
NOT: Deneysel protokole bağlı olarak farelerin farklı suşları, cinsiyetleri ve yaşları kullanılabilir. Dişi farelerin entübe edilmesi daha zor olabilir çünkü daha küçük boyut ve dolayısıyla daha küçük hava yolu. - Vandivort ve ark.13tarafından açıklandığı gibi fare entü....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Protokolümüzün uygulanması, farelerde tuzlu kontrollere kıyasla sağlam dTAA ile sonuçlanır. Geliştirilen TAA'lar fusiform şeklindedir ve sadece aortun tedavi edilen kısmında görülür (Şekil 1 ve Şekil 2)11. Şekil 2 doku hasat bir video mikrometri ölçüm bir örnek gösterir. Denklem 1'i kullanarak, aort genişlemesi bu örnekte 0'dur.
Johnston ve ark.11'in modeli .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Torasik ve abdominal aort hücresel ve embriyolojik olarak farklı, hangi anevrizmal hastalık ile ilgili14,15,16. Bu nedenle, TAA çalışmak için belirli bir hayvan modeli gereklidir. Diğer murine dTAA modelleri8yayınlanmış olmasına rağmen , bizim gerçekten anevrizmal olarak kabul edilebilir inen torasik aort dilatasyonu oluşturmak için tek modeldir (üzerinde 50% dilatasyon). Ayrıca, bizim model yürütmek için.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Bu çalışma AHA Scientist Development Grant 14SDG18730000 (Yüksek Lisans), NIH K08 HL098560 (G.A.) ve RO1 HL081629 (G.R.U.) hibeleri ile desteklenmiştir. Bu proje Torasik Cerrahi Araştırma ve Eğitim Vakfı (TSFRE) Araştırma Bursu (PI: G. Ailawadi) tarafından desteklenmiştir. İçerik sadece yazarların sorumluluğundadır ve MUTLAKA NHLBI veya TSFRE görüşlerini temsil etmez. Anthony Herring ve Cindy Dodson'a bilgi ve teknik uzmanlıkları için teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Anjiyokateter (22G) | ET Tüp | ||
| Dumont Cımbız için kullanılır; Desen # 7 x2 | Roboz | RS-4982 | |
| Graefe Doku Forseps | Roboz | RS-5158 | |
| Zararlar Forseps x2 | Roboz | RS-5097 | |
| İntrakardiyak İğne Tutucu; Ekstra hassas; Karbür Çeneler; 7 "Uzunluk | Roboz | RS-7800 | |
| KL 1500 LED Işık Kaynağı | Leica | 150-400 | |
| M205A Dissksiyon Mikroskobu | Leica | CH 94-35 | |
| İris Makası, 11cm, Tungsten Karbür | Dünya Hassas Aletler | 500216-G | |
| Metal Pano Fare Toplayıcı | Seti ile Kullanım | ||
| Fare Ekartör Seti | Kent | SURGI-5001 | 2 kısa ve 1 uzun fiksatör gerekir |
| Fare Vantilatörü MiniVent Tip 845, 115 V, ABD Konnektörlü Güç | Kaynağı Harvard Aparatı | 73-0043 | Fareler için MiniVent Vantilatör (Model 845), Tek Hayvan, |
| Domuz pankreasından | Sigma Aldrich | E0258-50MG | Çeşitli boyutlarda şişelerde satın alınabilir |
| Gemi Koterizatör Kiti | Güzel Bilim Araçları | 18000-00 | Şarj edilebilir AA pillerin kullanılmasını tavsiye eder |
| Bahar Makas, 10.5cm | Dünya Hassas Aletler | 14127 | |
| Steril Çubuklar (Süngerler) | Sugi | 31603 | Boyuta göre kesilebilir |
| Surgi Suite Cerrahi Platform | Kent | Panoya takın | |
| Teknik IV İzofluran Vap | Jorgensen Laboratuvarlar | J0561A | Anestezi buharlaştırıcı |
Kaynaklar
- Coady, M. A., et al. What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).
- Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
