Mevcut protokol, araştırmalarda retina hastalıklarının hayvan modellerinde uygulama için uygun bir cerrahi teknik olan subretinal cihaz implantasyonu için skleral yaklaşımı tanımlamaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Mevcut protokol, araştırmalarda retina hastalıklarının hayvan modellerinde uygulama için uygun bir cerrahi teknik olan subretinal cihaz implantasyonu için skleral yaklaşımı tanımlamaktadır.
Yaşa bağlı makula dejenerasyonu (AMD) gibi retina dejenerasyonu, dünya çapında körlüğün önde gelen nedenlerinden biridir. Kök hücre bazlı tedaviler de dahil olmak üzere AMD için rejeneratif tıp temelli tedaviler geliştirmek için sayısız yaklaşım benimsenmiştir. Retina dejenerasyonu için hayvan modelleri olarak kemirgenler, farklı aşamalarda retinal dejenerasyon hastalıkları geliştiren geniş suş spektrumu nedeniyle translasyonel araştırmalar için bir temel oluşturur. Bununla birlikte, kemirgenlerde subretinal implantların insan terapötik uygulamasını taklit etmek, lens boyutu ve vitreus hacmi gibi anatomik farklılıklar nedeniyle zordur. Bu cerrahi protokol, sıçanlarda implantların subretinal boşluğa nakli için rehberli bir yöntem sağlamayı amaçlamaktadır. Kritik adımların kullanıcı dostu kapsamlı bir açıklaması dahil edilmiştir. Bu protokol, sıçanlarda farklı preklinik çalışmalarda tekrarlanabilirlik için uygun maliyetli bir cerrahi prosedür olarak geliştirilmiştir. İmplantın boyutlarında ayarlamalar içeren cerrahi deneyi gerçekleştirmeden önce insan boyutunda bir implantın uygun şekilde minyatürleştirilmesi gerekir. İmplantı subretinal boşluğa iletmek için intravitreal bir prosedür yerine harici bir yaklaşım kullanılır. Küçük keskin bir iğne kullanılarak, temporal üst kadranda skleral bir insizyon yapılır, ardından göz içi basıncını azaltmak için parasentez yapılır, böylece cerrahi implantasyon sırasında direnci en aza indirir. Daha sonra, fokal retina dekolmanı (RD) elde etmek için insizyondan dengeli bir tuz çözeltisi (BSS) enjeksiyonu gerçekleştirilir. Son olarak, implantın subretinal boşluğa yerleştirilmesi ve görüntülenmesi gerçekleştirilir. İmplantın subretinal yerleşiminin ameliyat sonrası değerlendirilmesi, spektral domain optik koherens tomografi (SD-OCT) ile görüntülemeyi içerir. Görüntüleme takipleri, gözler alınmadan ve histolojik analiz için sabitlenmeden önce implantın subretinal stabilitesini tespit eder.
Yaşa bağlı makula dejenerasyonu (AMD), dünya çapında körlüğün önde gelen bir nedenidir. 2020'de AMD'den etkilenen insan sayısının 196 milyon olduğu tahmin ediliyordu ve bunun 2040 yılına kadar yaklaşık 288 milyona çıkması bekleniyor1. Son on yılda, AMD'nin geç evreleri ile ilişkili görsel değişiklikleri hafifletmek için, esas olarak ıslak AMD'de gözlenen koroidal neovaskülarizasyonun gelişimini ve ilerlemesini tedavi etmek için çeşitli terapötikler geliştirilmiştir. Tersine, retina pigment epitel (RPE) hücresinin işlev bozukluğu ve kaybının RPE ve retinal atrofisine ilerlediği kuru YBMD tedavisinin, dünya çapın....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm deneyler Güney Kaliforniya Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı ve Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu ve Görme ve Oftalmoloji Araştırmaları Derneği (ARVO) Oftalmik ve Görme Araştırmalarında Hayvanların Kullanımı Beyanı'na göre gerçekleştirildi. Bu çalışmada toplam 12 adet Royal College of Surgeon (RCS) erkek sıçan kullanıldı. Hayvanlar hayvan tesisinde yetiştirildi ve doğumdan 1 gün sonra 28 ± 1 yaşına geldiklerinde çalışmaya dahil edildi. Göz anormalliklerinin olmadığını doğrulamak için tam bir göz muayenesi yapıldı. Parilen C'de....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
RCS sıçanlarında (N = 12) bir subretinal implantın implantasyonu, sıçanlarda subretinal doğum için cerrahi tekniğin fizibilitesini ve tekrarlanabilirliğini göstermiştir. Bu çalışmada, implant ile tedavi edilen göz (N = 12) sağ gözdü. İşlem sonunda cerrahi mikroskop kullanılarak yapılan klinik değerlendirmede, tedavi edilen 12 gözün dokuzunda (%75.00) implantın subretinal lokalizasyonu görüldüğü, iki gözde (%16.67) implantın intraretinal yerleşimi olarak tespit edildiği, bir gözde (%8.33).......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Prosedür daha önce küçük değişikliklerle tanımlanmış olsa da, bu makalenin kapsamı, tekniği öğrenirken izlenecek sıçanlarda subretinal implantlar için cerrahi prosedürün kapsamlı bir tanımını sağlamak ve araştırmacıların karşılaşabileceği cerrahi zorlukların ve potansiyel komplikasyonların üstesinden gelmektir. Burada özetlenen cerrahi protokol, laboratuvarımızda birkaç yıldır yaygın olarak kullanılan ultra ince parilen membranın kullanımını içerir
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
M.S.H., D.R.H. ve JL, Rejeneratif Yama Teknolojileri'nin (RPT) kurucu ortakları ve danışmanlarıdır. Diğer yazarlar, bu yazıda tartışılan konu veya materyallerle ilgili herhangi bir mali veya mali olmayan çıkarı olan herhangi bir kuruluş veya kuruluşla hiçbir bağlantıları veya katılımları olmadığını onaylarlar.
Bu çalışma CIRM DT3 (MSH) ve Körlüğü Önleme Araştırmaları (USC Roski Göz Enstitüsü) tarafından desteklenmiştir. Teknik yardımları için Fernando Gallardo ve Dr. Ying Liu'ya teşekkür etmek istiyoruz.
Sponsorun bu araştırmanın tasarımında veya yürütülmesinde hiçbir rolü yoktu.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1 cc şırınga | VWR | BD309659 | |
| 27 G iğne 1/2'' | VWR | BD305109 | |
| 30 G iğne 1/2'' | VWR | BD305106 | |
| 32 G Keskin olmayan iğne - Küçük göbek RN | Hamilton | 7803-04 | |
| 4-0 Perma Hand ipek siyah 1X18" PC-5 | Ethicon | 1984G | |
| 6'' steril pamuklu uçlar | VWR | 10805-154 | |
| Betadine 5% steril oftalmik hazırlık çözeltisi | Alcon | 8007-1 | |
| BSS irrigasyon çözeltisi 15 mL | Accutome | Ax17362 | |
| Buprenorfin ER | ZooPharm | N/A | |
| Castroviejo Kaliper | Storz | E2405 | |
| Castroviejo dikiş forseps 0.12 mm | Storz | E1796 | |
| Clayman-Vannas makas düz | Storz | E3383S | |
| Kapalı cam, kare | WVR | 48366-227 | |
| EPS Polistiren blok | Silverlake LLC | CFB8x12x2 | |
| Gonak 15 mL | Accutome | Ax10968 | Göz yağı |
| Halstead düz hemostatik sivrisinek forseps non-manyetik | Storz | E6772 | |
| Hamilton şırınga 700 serisi 100 µL | Hamilton | 7638-01 | |
| HEYEX Yazılımı | Heidelberg | N/A | bir görüntü yönetim yazılımı |
| Kelman-McPherson bağlama forseps açılı | Storz | E1815 AKUS | |
| Ketamine (100 mg/mL) | MWI | 501072 | |
| İğne tutucu 9mm kavisli ince kilitli | Storz | 3-302 | |
| Neomisin/Polimiksin B sülfat/Basitrasin çinko merhem 3.5 g | Accutome | Ax0720 | |
| Oftalmik cerrahi mikroskobu | Zeiss | SN: 233922 | |
| Fenilefrin 2.5% 15 mL | Accutome | Ax0310 | |
| Spectralis SD-OCT | Heidelberg | SPEC-CAM-011210s3600 | |
| Steril Örtü | VWR | 100229-300 | |
| Steril cerrahi eldivenler | VWR | 89233-804 | |
| T-Pump ısıtma sistemi | Gaymar | TP650 | |
| Tropicamid 1% 15 mL | Accutome | Ax0330 | |
| Parylene C'den yapılmış ultra ince membranlar ve vitronektin ile kaplanmış | Mini Pumps LLC, CA | bu çalışma için özel olarak tasarlanmış | subretinal implantlar olarak kullanılır |
| Xylazin (100 mg/mL) | MWI | 510650 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında