Yöntem makalesi

In Vivo'da Görüntüleme, eklemlerdeki lökositlerin göç davranışını ortaya çıkarıyor

1K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/68091

⸱

9 Aralık 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Frontier Medicine, Institute of Medical Science, St. Marianna University School of Medicine, 2Unit for Bioimaging, Institute of Medical Science, St. Marianna University School of Medicine, 3Department of Immunology and Parasitology, St. Marianna University School of Medicine, 4Nikon Solutions Co., Ltd

Bu makalede

Özet

Eklemlerin in vivo görüntülemesi, iltihaplı eklemler içindeki lökositlerin göç davranışını ve moleküler dinamiklerini ortaya çıkarmak için değerli bir tekniktir. Burada, tip II kollajen kaynaklı artritin (CIA) fare modeli kullanılarak eklemlerin in vivo görüntülemesi için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

Özet

Lökositler, kemik iliğinden türeyen ve iltihabı sağlamak için dokulara göç etmek zorunda olan kanla bulaşan hücrelerdir. Bu göçün kontrolü, iltihabı azaltmak için yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesinde kritik bir noktayı temsil eder. Geleneksel son nokta çalışmaları, lökositlerin göç davranışını in vivo tam olarak incelememize olanak sağlamamıştır. Ancak görüntüleme teknolojisindeki son gelişmeler, canlı hayvanlarda bağışıklık hücresi göçü hakkında eşi benzeri görülmemiş bilgiler sağlamış ve bağışıklık hücresi ticaretinin moleküler düzenlemesi konusundaki anlayışımızı büyük ölçüde geliştirmiştir.

Burada, fare tip II kollajen kaynaklı artrit (CIA) modeli kullanılarak eklemlerin in vivo görüntülemesi için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz. Fareler, tam Freund adjuvantı ile emülsifize edilmiş tip II kollajen ile aşılanır ve artrit ilerlemesi klinik skor ve pençe kalınlığı ölçümleriyle izlenir. Artritin zirvesinde, lökositler, floresan proteinleri ifade eden transgenik farelerde veya vehşi tip farelerde floresan etiketli antikorlar ve damar boyama için yüksek moleküler ağırlıklı Dextran enjeksiyonu sonrası konfokal mikroskopi kullanılarak in vivo görselleştirilir. Eklemin dikkatli cerrahi maruziyeti, agaroz uygulanması ve bacağın doğru konumlandırılması, genellikle birkaç saat süren uzun süreli stabil görüntüleme sağlar. Bu yaklaşım, iltihaplı eklemlerde lökosit durdurması, sürünme ve transendotel göçünün gerçek zamanlı analizini mümkün kılar.

Bu protokol, artrit ve diğer iltihap hastalıklarında lökosit ticaretini araştıran araştırma grupları için değerli olacaktır. Ayrıca, bağışıklık hücresi göçünü hedefleyen tedavilerin preklinik değerlendirmesi için bir platform olarak da hizmet verebilir.

Giriş

Lökositler, kemik iliğinden türeyen kanla bulaşan hücreler olduğundan, iltihaplanmaya neden olmak için dokuyagirmelidirler. Bu sürecin kontrolü, iltihabı azaltmak için yeni tedavilerin geliştirilebileceği kilitbir noktayı temsil eder 2. Genel olarak, iltihaplı dokuya lökositlerin kaçakçılığı postkapiller venüllerde gerçekleşir ve yapışma zincirini takip eder; damar duvarı tarafından serbest akan lökositlerin yakalanmasıyla başlar. Ayrıca, süreç boyunca lökositler damar duvarı boyunca akış yönünde yuvarlanır, endotel üzerinde lökositlerin durması, yapışmadan ayrılması ve damar yüzeyinde her yönde sürünerek dokuda belirli bir yere transendotel göçü (TEM) için alıcı bir bölgebulur. 1,3.

Bu belirgin adımlar, selektinler (yuvarlanma için), integrinler (durdurma, sürünme için) ve kemoattrasyonlar (CA) (durdurma, muhtemelen sürünme ve TEM) dahil olmak üzere moleküler sinyallerin birleşimiyle düzenlenir. CA'lar, yedi transmembran kapsayan G proteinine bağlı kemoatçekan reseptör (CAR) aracılığıyla lökositleri aktive eder ve integrin afinitesini artırarak (durdurulmaya yol açan) ve TEM'i indükleyerek adezyon zincirinde kritik roller oynar. Ancak, TEM'in tam mekanizmaları tam olarak anlaşılmamaktadır. Geleneksel son nokta çalışmaları ve in vitro deneyler, CA-CAR sinyalinin in vivo olarak lökositlerin göç davranışını dinamik olarak nasıl düzenlediğine dair içgörü sağlamamıştır.

Son zamanlarda görüntüleme teknolojisindeki ilerlemeler, canlı hayvanlarda bağışıklık hücresi göçüne eşi benzeri görülmemiş bakış açısı sunmuş ve in vivo 4,5,6 immün hücre ticaretinin moleküler düzenlemesi konusundaki anlayışımızı büyük ölçüde geliştirmiştir. Örneğin, bu teknoloji nötrofillerin doku iltihaplanma bölgelerine moleküler kontrolünü aydınlatmıştır; örneğin termal karaciğeryaralanması 7 ve lazer ciltyaralanması 8. Bu nedenle, nötrofillerin eklem iltihaplanma bölgelerine trafikini kontrol eden moleküler mekanizmaları incelemekiçin başvurduk 9. Burada anlatılan in vivo eklem görüntülemesi, kompleman bileşeni C5a reseptörü 1'in (C5aR1) nötrofilin eklem endoteline yapılmasını başlatmak ve eklemlerde iltihabı tetiklemek için kritik olduğunu ortaya koymuştur. C5aR1, integrine bağlı nötrofil durması ve yayılmasını kolaylaştırdı; bunu lökotrien B4 reseptörü aracılığıyla TEM ve CC kemokin reseptörü 1 (CCR1) tarafından yönlendirilen sürünme izledi. CXC kemokin reseptörü 2 (CXCR2), iltihaplı eklemlerde nötrofil TEM'in sonraki evrelerinde roloynamıştır 10. Ayrıca, in vivo eklem görüntülemesi, eklem içindeki tip III aşırı duyarlılık reaksiyonlarında yeni bir paradigma ortaya koydu; burada C5a iltihabın başlatıcısı olarak görev yaparken, doku yerleşik hücreler mevcut tip III aşırı duyarlılık reaksiyonlarında iltihabda daha önemli roller üstlenmektedir10,11.

Ayrıca, eklem içindeki C5a'nın moleküler dinamiklerini incelemek için eklemin in vivo görüntülemesini uyguladık. Vahşi tip farelerde eklem dokusuna yüklenen C5a, hızla damar lümenine taşınırken, C5aR2 eksikliği olan farelerde C5a tamamen sinovial doku12 içinde kaldı. Bu veriler, eklem endotelyumunda ifade edilen C5aR2'nin C5aR2'nin damar lümenine taşındığını göstermektedir; bu, eklemlerde C5aR1'e bağlı nötrofil adezyonu için gerekli bir süreç13.

Eklemlerin in vivo görüntülemesi tüm inflamatuar artrit modellerine uygulanabilir ve uzun vadeli gözlem (genellikle birkaç saat) mümkün olur, ancak kullanılan mikroskopa bağlı olarak derin dokunun (>1 mm) görselleştirmesi sınırlı olabilir. Bu teknik, iltihaplı eklemler içindeki lökositlerin göç davranışını ve moleküler dinamiklerini incelemek için güçlü bir araç sağlar. İltihaplı eklemlerde bu süreci inceleyen araştırma gruplarını desteklemek amacıyla in vivo eklem görüntüleme protokolünü paylaşıyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, St. Marianna Üniversitesi Tıp Fakültesi'nin Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı (Onay No. TG240926-2 ve TG250801-2) ve kurumsal ile ulusal yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

1. Artrit fare modelinin hazırlanması

NOT: Artritin hayvan modelleri, hastalığın patogenezini anlamak ve yeni tedaviler geliştirmek için değerli araçlarsağlamıştır 14. Artritin birkaç fare modelinin benzersiz avantajları ve sınırlamaları olsa da, tip II kollajen kaynaklı artrit (CIA) romatoid artritin (RA) patogenezi üzerine yapılan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmıştır14. Bu bölümde, CIA artrit modellerinin protokolünü açıklıyoruz (Malzemeler ve aletler Şekil 1'de gösterilmiştir).

  1. Sığır tip II kollajenini 0,05 M asetik asitte (nihai konsantrasyon 4 mg/mL) inceleyerek gece boyunca 4 °C'de çalkalayarak hazırlayın.
  2. Emülsiyon oluşturmak için, kolajen seyreltmesini (0,05 M asetik asitte 4 mg/mL) tam Freund adjuvantı (CFA) ile 1:1 oranında cam bir şırıngada karıştırın. Bu, emülsiyonda nihai kolajen konsantrasyonu 2 mg/mL sağlar. Yaklaşık 20 dakika boyunca elle iyice karıştırın. Bu süreç ısı üretir, bu yüzden emülsiyonu içeren cam şırıngayı buz üzerinde soğutun. Hazırlık sırasında emülsiyonun kıvamını kontrol etmek için bir beğen kullanın.
    NOT. Kalan kolajen seyreltmesini -80 °C'de sakla. Bu ikinci aşılama için kullanılabilir.
  3. Emülsiyonu, 26 x 1/2 G iğneyle donatılmış 1 mL cam şırıngaya aktarın ve aşılanana kadar buzda tutun.
  4. 8 haftalık DBA1/J farelerini (erkek veya dişi) intraperitoneal medetomidin (0,3 mg/kg), midazolam (4 mg/kg) ve vetorfal (5 mg/kg) enjeksiyonlarıyla anestezi edin.
    NOT. Transgenik fareler genellikle C57BL6 geçmişine sahiptir. Tavuk kolajeni genellikle C57BL6 farelerinde CIA için kullanılır; ancak C57BL6 farelerinde CIA sisidansı ve şiddeti, DBA/1J farelerine göre daha düşüktür. C57BL6 arka planında transgenik fareler kullanılıyorsa, CIA insidansı ve şiddetini değerlendirmek için pilot çalışma yapmayı düşünün.
  5. Kuyruk çevresindeki tüyleri makas makinesiyle tıraş ederek aşı için hazırlanın.
  6. Yumruk tabanına yakın kuyruklu dorsum boyunca (200 μg kolajen içeren) 100 μL emülsiyon hacmini yavaşça enjekte edin (Şekil 2).
  7. İkinci aşı için 21. günde 1.2 ila 1.6 numaralı adımları tekrarlayın (Şekil 2).

2. Artrit klinik skorunun değerlendirilmesi ve pati kalınlığının ölçülmesi

NOT: Artritin klinik puanlanması ve pati kalınlığının ölçülmesi, hastalık aktivitesinin değerlendirilmesi için gereklidir. Genellikle, artrit klinik puanlama ve pati kalınlığı ölçümleri ilk aşılamadan sonra her 1-3 günde bir alınır.

  1. Artrit klinik puanı: Her farenin dört pençesinin toplamını kaydedin. Aşağıdaki puanlama sistemini kullanın:
    0 = Normal
    1 = Bir parmakta eritema ve şişlik
    2 = Eritem ve iki parmakta şişlik veya eritem ve ayak bileği ekleminin şişmesi
    3 = Eritem ve üç parmaktan fazla şişlik veya iki parmak ile ayak bileği eklemlerinde şişlik
    4 = Eritem ve ayak bileği, ayak ve parmaklarda şiddetli şişlik ile deformite.
    NOT. Şişmiş ayak bileği eklemi, 4 mm'den büyük bir pati kalınlığı olarak tanımlanır.
  2. Pati kalınlığı ölçümü: Her bir patinin kalınlığını dijital sürgü kaliperleri kullanarak ölçün. Her farenin dört pençesinin ortalama pençe kalınlığını kullanın.

3. Eklemlerin in vivo görüntülemesi

NOT: Eklemlerin in vivo görüntülemesi, canlı farelerde eklemlere lökositlerin göçünü gözlemlememize ve dokudaki davranışlarını analiz etmemize olanak tanır. Hücreleri görselleştirmek için, belirli hücrelerde floresan proteinleri eksprese etmek üzere genetik olarak tasarlanmış transgenik fareler ve damar içi anti-hücre belirteç antikorları enjekte edilen fareler kullanılır. Kullanılan malzemeler Şekil 3'te gösterilmiştir.

  1. Artritojenik fareleri intraperitoneal olarak medetomidin (0,3 mg/kg), midazolam (4 mg/kg) ve vetorfal (5 mg/kg) ile anestezi edin.
  2. Fare bacağını makas makinesiyle tıraş edin ve kalan tüyleri temizlemek için tüy alma kremi (<60 sn) kullanın. Cilt tahrişini önlemek için uzun süreli uygulamadan kaçının.
  3. Kremi nemli gazlı bezle çıkarın (Şekil 4A). Görüntüleme alanında istenmeyen otofloresansı önlemek için tüm tüylerin alındığından emin olun. Gerekirse tekrar edin.
  4. Anestezi sırasında korneanın kurumasını veya ülserasyonunu önlemek için steril kornea kayganlaştırıcısı uygulanır.
  5. Cerrahi bir dürbünde, mikromakasla cilt boyunca 1 cm uzunluğunda bir kesi yapın (Şekil 4B).
    NOT. Bu adım çok önemli. Cerrahi, lökositlerin (özellikle nötrofiller) alımı tetikleyebilir. Eser yaratabilecek herhangi bir hasardan kaçının. Artritik eklemlerde anjiyogenez nedeniyle, bu eklemler kanamaya yatkındır. Başarılı ameliyat için birden fazla pratik seansı gerekebilir.
  6. Artritik eklemleri plastik plakaya yerleştirin (Şekil 4C).
    NOT. Farenin bacağını yerinde sabitlemek için doku yapıştırıcısı kullanılabilir. Bu çalışma, cam kaydırağı plastik bir plakaya sabitlemek için kil kullanmaktadır.
  7. Görüntüleme alanını yaklaşık 1 mL %1,5 agaroz ile fosfatlı tamponlu tuzlu (PBS) ile kaplayın (Şekil 4D).
    NOT. Agarozun soğuduğundan emin olun, doku yaralanmasını önlemek için bu da görüntüleme alanına lökositlerin katılımını teşvik edebilir.
  8. Sahneyi mikroskobun üzerine kur.
    NOT. Uzun süreli görüntüleme seansları sırasında farenin vücut sıcaklığını korumak için bir ısıtma pedi kullanın.
  9. Konfokal mikroskop ayarlarını ayarlayın (lazer gücü, kazanç, ofset, konum vb.). Burada, 25 suya battırma objektif lensle konfokal mikroskopta, NA 1.1 görüntüleme yapılabilir. Lazer uyarımını 488 nm, 561 nm ve 640 nm olarak ayarlayın ve emisyonu 488,0 nm, 561,6 nm ve 638,5 nm seviyelerinde toplayın.
    1. Mikroskobun tarama hızını kontrol et. 512 x 512 piksel çözünürlüğü, 5 optik kesit, 4 μm Z yığını ve 15 saniyelik döngü süresi kullanılarak bireysel hareket hücresinin yeterli zaman içinde analiz edilmesine olanak tanıyarak anlamlı veri elde edin.
  10. Uygun bir konum belirlendikten sonra görüntü alımına başlayın.
    NOT. Lökositleri etiketlemek için anti-hücre belirteç antikorları kullanıyorsanız, görüntüleme başlamadan 3 dakika önce antikorları damar içi enjekte edin. Kan damarı görselleştirmesi için Qdots, CD31 antikor veya Dextran aynı anda enjekte edin. Örneğin, fare başına yaklaşık 2 μg antikor Ly6G (nötrofiller için) ve CD4 (T hücreleri için) enjekte edilir; ayrıca fare başına yaklaşık 80 μg 680-250k Dextran (kan damarı boyama) enjekte edilir. Antikorlar ve Dextran genellikle 100 μL steril PBS içinde çözünür. Bazı antikorların lökositleri azaltabileceğini unutmayın, bu yüzden seçilen antikorların lökosit sayısını azaltmadığını kontrol edin.
  11. Konfokal mikroskopla elde edilen ND2 dosya görüntülerini, NIS-Elements görüntü analiz yazılımının General Analysis 3 (GA3) modülü kullanılarak (sürüm 6.20.00) işleyin. Damar bölgelerinin çıkarılması ve arka plan çıkarımı yapıldı. Tüm zaman dilimlerinin işlenmesini takip ettikten sonra, görüntüleri video olarak dışa aktarın.
    NOT. Analizin bir parçası olarak, yapışkan ve ekstravazasyon hücre sayısını sayın.
  12. Görüntüleme tamamlandıktan sonra, deneysel tasarıma bağlı olarak hayvanın iyileşmesine izin verin ya da insancıl bir şekilde ötenazi yapın. Hayatta kalma amaçlıysa, cerrahi bölgeyi nazikçe kapatın ve kurumsal hayvan bakım yönergelerine uygun ameliyat sonrası bakımı sağlayın.
    NOT: Bu çalışmada, tüm hayvanlar görüntülemeden hemen sonra kurumsal ve ulusal yönergelere uygun olarak insancıl bir şekilde ötenazi edildi.

4. İstatistiksel analiz

  1. Verileri ortalama ± ortalama standart hatası (SEM) olarak sunun. İki grup karşılaştırması için Student's t-testi veya birden fazla grup için tek yönlü ANOVA ile istatistiksel analiz yapın, ardından Tukey'nin sonradan yaptığı test. P-değeri < 0.05'i istatistiksel olarak anlamlı olarak düşünün.
    NOT: Tüm analizler GraphPad Prism sürüm 10 kullanılarak gerçekleştirildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Burada, 8 haftalık erkek DBA/1J fareler, 0. ve 21. gün 1:1 oranında sığır tip II kollajen ve CFA içeren emülsiyonla aşılanıyor. Artrit klinik puanlama ve pati kalınlığı ölçümleri 0. ile 42. gün arasında her 1-3 günde bir yapılır. Genellikle artritin başlangıcı yaklaşık 28. gün civarında gözlemlenir; artrit klinik skoru ve pati kalınlığı 35. gün civarında zirveye ulaşır (Şekil 5A-C). DBA/1J farelerinde CIA görülme oranı genel...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Eklemlerin in vivo görüntülemesi, geleneksel son nokta çalışmalarının aksine, canlı farelerde dinamik biyolojik süreçler hakkında eşi benzeri görülmemiş içgörüler sunar. Örneğin, bu teknik, dört farklı kemoattrektan reseptörün - C5aR1, BLT1, CCR1 ve CXCR2 - artritte iltihaplı eklemlere nötrofil katılımını başlatmak için nasıl iş birliği yaptığınıanlamamızı sağlar 10,11. Ayrıca, in vivo görüntüleme, C5aR2'nin dok...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Y.M., Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.'den hibe/araştırma desteği aldı.

Teşekkürler

Y.M.'nin çalışmaları, Japon Bilimi Teşvik Derneği (JSPS) KAKENHI [hibe numarası JP22K08531, JP25K02574] tarafından desteklenmektedir; Japonya Tıbbi Araştırma ve Geliştirme Ajansı (AMED) [Hibe Numarası 25bm1423033]; Mochida Memorial Tıbbi ve İlaç Araştırmaları Vakfı; FRONTIER ve Mitsubishi Vakfı için Araştırmaları Teşvik Etmek için JCR Bursu.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
29 G x 1/2"TerumoSS-10M2913
0,1 M asetik asitFujifilm016-18835
1 mL plastik şırıngaSayfanın Üstü19531
Yağ için 1 mm şırıngaTerumoSS-01T
18 G x 1 1/2"TerumoNN-1838R
26 G x 1/2"TerumoNN-2613S
680-250 kDa dextranBiyotyum80135
Agaroseinvitrogen16520-100
Sığır tip II kolajeniKolajen Araştırma MerkeziK42
KilDebika93186
Tam bir freund' adjuvant (CFA)Chondrex7001
Konfokal mikroskopNikonA1
Kapak camıMatsunami Cam IND.,LtdC024401
Dijital kaydırma kaliperiMitsutoyo500-180-30
Falcon tüpü (15 mL)CorningNA
Falcon tüpü (50 mL)CorningNA
FITC ile konjuge edilmiş anti-fare Ly6G antikoruBiolegend127606
ForsepsRobozRS-5070
ForsepsNAPOXMA-48-2
Cam şırınga ve konnektörTsubasa Endüstri Şirketi, Ltd S7P
YağToray Dow Corning SilikonNA
Saç makası makinesiWahlWA5109
Saç makası makinesiWahl9966
Tüy çıkarma crè benKracieYok
MedetomidinMeijiYok
Mikro-makasRobozRS-5610
Mikro-makasRobozRS-5630
MidazolamSandozYok
Nemli gazlı bezNippon Paper Crecia Co., LtdS-200
NIS-Elements görüntü analizi 6.20.00NikonNA
Falcon tüpünde PBS (50 mL)Shimadzu Tanı Kurumu5913
PE konjuge anti-fare CD4 antikorBiolegend100408
Plastik plakaCorning351029
Prizma 10.3.1GraphPadNA
Kaydırmalı camMuto Pure Chemicals Co.,Ltd5115
Cerrahi kapsamOlympusVMZ
Doku bağı3M1469SB
Vetorphale MeijiYok

Kaynaklar

  1. Nourshargh, S., Alon, R. Leukocyte migration into inflamed tissues. Immunity. 41 (5), 694-707 (2014).
  2. Miyabe, Y., Lian, J., Miyabe, C., Luster, A. D. Chemokines in rheumatic diseases: pathogenic role and therapeutic implications. Nat Rev Rheumatol. 15 (12), 731-746 (2019).
  3. Griffith, J. W., Sokol, C. L., Luster, A. D. Chemokines and chemokine receptors: positioning cells for host defense and immunity. Annu Rev Immunol. 32, 659-702 (2014).
  4. Murooka, T. T., et al. HIV-infected T cells are migratory vehicles for viral dissemination. Nature. 490 (7419), 283-287 (2012).
  5. Mempel, T. R., Henrickson, S. E., Von Andrian, U. H. T-cell priming by dendritic cells in lymph nodes occurs in three distinct phases. Nature. 427 (6970), 154-159 (2004).
  6. Sumen, C., Mempel, T. R., Mazo, I. B., von Andrian, U. H. Intravital microscopy: visualizing immunity in context. Immunity. 21 (3), 315-329 (2004).
  7. Wang, J., et al. Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair. Science. 358 (6359), 111-116 (2017).
  8. Lammermann, T., et al. Neutrophil swarms require LTB4 and integrins at sites of cell death in vivo. Nature. 498 (7454), 371-375 (2013).
  9. Miyabe, Y., Kim, N. D., Miyabe, C., Luster, A. D. Studying chemokine control of neutrophil migration in vivo in a murine model of inflammatory arthritis. Methods Enzymol. 570, 207-231 (2016).
  10. Miyabe, Y., et al. Complement C5a receptor is the key initiator of neutrophil adhesion igniting immune complex-induced arthritis. Sci Immunol. 2 (7), eaaj2195(2017).
  11. Sadik, C. D., Miyabe, Y., Sezin, T., Luster, A. D. The critical role of C5a as an initiator of neutrophil-mediated autoimmune inflammation of the joint and skin. Semin Immunol. 37, 21-29 (2018).
  12. Miyabe, Y., Miyabe, C., Mani, V., Mempel, T. R., Luster, A. D. Atypical complement receptor C5aR2 transports C5a to initiate neutrophil adhesion and inflammation. Sci Immunol. 4 (35), eaav5951(2019).
  13. Kohl, J. Igniting the flame in arthritis: C5aR2 controls endothelial transcytosis of C5a. Sci Immunol. 4 (35), eaax0352(2019).
  14. Miyabe, Y., Miyabe, C., Luster, A. D. LTB4 and BLT1 in inflammatory arthritis. Semin Immunol. 33, 52-57 (2017).
  15. Miyabe, Y., et al. Necessity of lysophosphatidic acid receptor 1 for development of arthritis. Arthritis Rheum. 65 (8), 2037-2047 (2013).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

L kosit MigrasyonuEklem nflamasyonuKonfokal MikroskopiKollajenle nd klenmi Artritmm n H cre Trafi iN trofil MigrasyonuTransendotelyal MigrasyonArtrit Fare ModeliL kosit Trafi i

İlgili makaleler