Bu çalışma, bir murin modelinde ışıldayan kolorektal kanser hücrelerinin in vivo deri altı indüksiyonuna ve ardından bir görüntüleme sistemi kullanılarak lüminesans ölçümüne odaklanmaktadır. Prosedür, gerçek zamanlı izleme ve terapötik değerlendirme için tekrarlanabilir bir tümör büyüme modeli oluşturmayı amaçlamaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Antitümör Etkinliğini Değerlendirmek için Atimik Çıplak Farelerde İnsan Kolorektal Kanser Hücrelerinin Deri Altı Enjeksiyonu
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Kolorektal kanser (KRK), dünya çapında kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedenlerinden biridir ve potansiyel tedavileri değerlendirmek için gelişmiş preklinik modellere olan acil ihtiyacı vurgulamaktadır. Hayvan modelleri, tümör biyolojisini aydınlatmak ve yeni terapötik müdahaleleri değerlendirmek için gereklidir. Fare modelleri, genetik manipüle edilebilirlik, hızlı üreme, maliyet etkinliği ve insan kanserlerinin hassas modellenmesini sağlayan immünokompetan ve immün yetmezliği olan suşların mevcudiyeti dahil olmak üzere mevcut modellere göre önemli avantajlar sunar.
Bu protokol, immün yetmezliği olan bir murin modelinde biyolüminesan kolorektal kanser hücre hattı HCT-116'nın deri altı indüksiyonuna, ardından tümör ilerlemesini ve büyümesini izlemek için IVIS sistemi ve kaliper kullanılarak non-invaziv biyolüminesans görüntülemeye odaklanır. Lüminesan hücrelerin kullanılması, tümör gelişimini ve terapötik müdahalelere yanıtı izlemek için gerçek zamanlı, ölçülebilir bir yaklaşım sağlayarak invaziv prosedürlere olan ihtiyacı azaltır. Tümör hücresi implantasyonu için bir fare kohortu (n = 12) gereklidir ve terapötik test için standart bir model oluşturmak üzere lüminesans yoğunluğu ölçülür. Tümör hacmi tipik olarak sadece uzunluk ve genişlik ölçümleri veya genişlik kullanılarak hesaplanır.
Mevcut metodoloji, değişkenliği en aza indirirken tutarlı tümör oluşumu sağlar ve sonuçta klinik öncesi değerlendirmenin güvenilirliğini artırır. Bu çalışmanın bulguları, ilaç testi için tümör modellerinin iyileştirilmesine ve klinik uygulamalarda klinik öncesi araştırmaların translasyonel potansiyelinin geliştirilmesine katkıda bulunacaktır. Bu çalışma, gelişmiş görüntüleme teknikleri ve tekrarlanabilir bir deneysel tasarım kullanarak, kolorektal kanser tedavisi için in vivo ilaç değerlendirmesinin doğruluğunu ve verimliliğini artırmayı amaçlamaktadır.
Giriş
Kolorektal kanser (KRK), en yaygın ve ölümcül maligniteler arasında yer alan önemli bir küresel sağlık yüküdür1. Geleneksel in vitro tahliller, canlı bir sistemdeki tümör büyümesinin ve ilaç yanıtının karmaşıklığını tam olarak yakalayamadığından, yeni terapötik yaklaşımları değerlendirmek için güvenilir preklinik modeller geliştirmek çok önemlidir. İn vivo modeller, özellikle fare modelleri, tümör biyolojisi hakkında değerli bilgiler sağlamak için kullanılmış ve araştırmacıların kontrollü bir ortamda potansiyel tedavilerin etkinliğini değerlendirmelerine olanak sağlamıştır.
Fare modellerinde ışıldayan CRC hücrelerinin kullanımı, tümör ilerlemesinin gerçek zamanlı, invaziv olmayan izlenmesini sağlayan klinik öncesi araştırmalarda önemli bir ilerlemeyi temsil eder2. Bu çalışma, tümör büyümesini dinamik olarak izlemek için subkutan tümör indüksiyonu ve IVIS görüntüleme için standart bir protokol oluşturmayı amaçlamaktadır. Teknik basitliği, tekrarlanabilirliği ve uzunlamasına tümör izleme kolaylığı nedeniyle deri altı enjeksiyon modeli seçildi. Araştırmacılar, biyolüminesans görüntülemeden yararlanarak, hayvanları birden fazla zaman noktasında ötenazi yapmaya gerek kalmadan tümör gelişimi ve terapötik yanıtlar hakkında kesin, ölçülebilir veriler elde edebilirler3.
IVIS görüntüleme sistemi, in vivo çalışmaların tekrarlanabilirliğini ve doğruluğunu artıran, tümör yükünü yüksek duyarlılık ve özgüllük ile değerlendirmek için güçlü bir araçtır. Bu çalışma, kolorektal kanser tedavisi için klinik öncesi ilaç testlerine standartlaştırılmış ve verimli bir yaklaşım sağlayarak gelecekteki terapötik değerlendirmeler için bir temel görevi görecektir. Bu araştırma, tümör indüksiyon yöntemlerini geliştirerek ve ileri görüntüleme tekniklerini uygulayarak, onkolojide klinik öncesi ve klinik uygulamalar arasındaki boşluğun doldurulmasına katkıda bulunur4.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvanlar, Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB, Murcia) etik komitesi (No A13240502) tarafından belirlenen yönergelere göre belirli patojen içermeyen koşullar altında tutuldu. Denetimler, R. D. 1201/2005'e uygun olarak kalifiye personel tarafından haftalık olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Hayvanlar
NOT: Enjeksiyondan önce tüm hayvanlar güvenli ve emniyetli bir şekilde zapt edilmelidir. İmmün yetmezliği olan farelerle (yani, Crl: NU (NCr) -Foxn1nu gibi çıplak atimik fareler) çalışıyorsa, steriliteyi korumak önemlidir. Bu çalışmada, deneyin başında 5 haftalık (dişiler için 20-22 g ve erkekler için 22-26 g) 12 atimik çıplak fare kullanıldı (% 50 erkek). Tüm anestezi ve deneysel işlemler, merkezin Guía de Ética y Buena Práctica en Investigación'unda , kurumsal etik kurulun onayı (Protokol No. A13240502) ve İspanyol mevzuatına (R.D. 1201/2005) uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
- Tahlili başlatmadan önce, 4 haftalık fareleri yaklaşık 1 hafta boyunca hayvan merkezine alıştırın. Ardından, aşağıdaki prosedürleri gerçekleştirin.
2. D-lusiferin stoğunun hazırlanması
- Bir biyogüvenlik kabini içindeki konik bir tüpte önceden ısıtılmış Fosfat Tamponlu Salin (PBS) içinde 15 mg / mL'lik bir D-Luciferin Potasyum Tuzu Biyolüminesan Substrat çalışma çözeltisi hazırlayın. Çözeltiyi iyi bir şekilde homojenize etmek için tüpü birkaç kez ters çevirin.
- Çözeltiyi sterilizasyon için 0.2 μm'lik bir şırınga filtresinden geçirin.
- Sterilize edilmiş solüsyonu 1 mL opak mikrotüplerde ayırın ve -20 ° C'de saklayın.
NOT: Luciferin ışığa duyarlıdır.
3. Hücre dışı matris hazırlığı
- Fenol kırmızısı içermeyen ticari hücre dışı matris (ECM) hidrojeli gece boyunca 2 °C ile 8 °C arasında bir buzdolabının içinde buz üzerinde çözdürün5.
- Enjeksiyon gününde, ECM'yi buz üzerinde tutun ve önceden soğutulmuş bir P1000 mikropipet kullanarak 200 μL ECM'yi steril tüplere alın.
NOT: Geniş delikli mikrotüplerin kullanılması tavsiye edilir. Sıcaklık değişikliklerini en aza indirin ve tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçının. - ECM'nin ani sıcaklık değişikliklerini önlemek için enjeksiyonları hazırlamadan önce şırıngaları ve iğneleri buz üzerinde önceden soğutun.
4. Hücre ayrılması ve sayımı
- Yeterli hücre sayısını sağlamak için tümör indüksiyonundan birkaç gün önce T75 şişelerinde plaka HCT-116 biyolüminesan hücreleri (ATCC hücre hattı CCL-247-LUC2). Hücre kültürünü 37 ° C,% 5 CO2'de tutun ve gerekirse ortamı değiştirin6.
- Deney gününde, yapışık hücreleri rahatsız etmemek için kültür ortamını dikkatlice aspire edin.
- Kalan serumu çıkarmak için hücreleri 8 mL steril PBS (bir su banyosunda 30 ° C'de önceden ısıtılmış) ile yıkayın.
- Ilık Tripsin-EDTA (% 0.05) şişesi başına 2 mL ekleyin ve 37 ° C'de 4-5 dakika inkübe edin. Ters çevrilmiş bir mikroskop altında hücre ayrılmasını izleyin. Hücreler bağlı kalırsa, ayrılmaya yardımcı olmak için şişenin yan tarafına hafifçe vurun.
- Fetal sığır serumu (FBS) içeren 10 mL tam büyüme ortamı ekleyerek tripsini nötralize edin.
- 10 mL'lik bir serolojik pipet kullanarak hücreleri 15 mL'lik bir konik tüpe aktarın. Kalan hücreleri toplamak için şişeleri 2 mL ilave taze ortamla durulayın ve yıkamaları 15 mL'lik tüpe ekleyin.
- Hücre süspansiyonunu oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 200 × g'da santrifüjleyin. Hücre peletini bozmadan süpernatanı dikkatlice aspire edin.
- Homojen bir süspansiyon elde etmek için hücre peletini 3 mL tohumlama ortamında nazikçe yeniden süspanse edin.
- Bir Neubauer odasındaki veya otomatik hücre sayacındaki hücreleri sayın. 10 μL hücre süspansiyonunu 10 μL Tripan mavisi ile karıştırarak hücre canlılığını belirleyin ve ters çevrilmiş bir mikroskop altında canlı hücreleri sayın.
NOT: Çalışma için yeterli sayıda hücre hazırlayın: fare başına en az 3 × 106 canlı hücre. - Hücreleri steril PBS'de (bir su banyosunda 30 ° C'de önceden ısıtılmış) yeniden süspanse edin ve canlı hücrelerin konsantrasyonunu PBS ile 2 × 107 hücre / mL'lik bir nihai konsantrasyona değiştirin. 200 μL'lik alikotlar hazırlayın.
5. Ekipman öğelerini ayarlayın ve hayvanları uyuşturun.
- Görüntülemeden en az 4 saat önce görüntüleme sistemini açın.
NOT: Sinyal-gürültü oranına bağlı olarak ışık yoğunluğu ve kamera maruz kalma süresi ayarlarının yapılması da dahil olmak üzere, başlatma adımına izin vermek için sistemin talimatlarını izleyin. Bu ayar, deney koşullarına göre manuel olarak ayarlanmalıdır. - Hayvanları tartın ve uygulanması gereken D-lusiferin hacmini hesaplayın (20 g hayvan başına 200 μL 15 mg / mL çözelti).
- Görüntüleme odalarını ve kabinini temizleyin ve dezenfekte edin.
- Anestezi için her fareyi tanımlayın ve güvenli bir şekilde kısıtlayın.
NOT: Deri altı enjeksiyonu sırasında ellerinizi kazara iğne batmalarından korumak için iki çift eldiven giyin. - 1.8-2.0 L / dk akışta oksijende% 2 izofluran ile fareleri uyuşturun. Aspirasyon pompasını anestezi pompası ile aynı anda açın.
6. Hücrelerin enjeksiyon için hazırlanması
- 200 μL 2 × 107 biyolüminesan CRC hücresi/mL ile 200 μL ECM'yi bir biyogüvenlik kabini içindeki bir kriyoviyalde karıştırın. Hava kabarcığı oluşumunu ve ayrışmasını önlemek için bir P1000 pipeti ile nazikçe pipetleyin.
- 400 μL'lik karışımı 1 mL'lik bir şırıngaya aktarın, hava kabarcıklarını çıkarın ve hemen enjeksiyona devam edin.
- İğnenin sterilliğini her zaman koruyarak iğneyi güvenli bir şekilde açın.
NOT: Kontaminasyonu en aza indirmek için her hayvan için ayrı iğneler kullanılması tavsiye edilir. Fareler arası enfeksiyonu önlemek için her fare için yeni bir iğne kullanılır. - 25 G'lik bir iğne takın ve şırınga içeriğini 200 μL'ye ayarlayarak hava kabarcıklarını giderin.
NOT: Enjeksiyonlar genellikle 200 μL ile yapılır ve enjeksiyon başına 2 × 106 hücreye yol açar. - Hayvan tutulurken kapağı veya iğneyi tutmadan iğneyi gevşek bir şekilde kapağın içine geri kaydırın.
7. Deri altı tümör indüksiyonu
- Uyuşturulduktan sonra fareyi hazneden çıkarın ve hayvanın burnunu aynı anesteziyi sağlayan bir prize yerleştirin.
NOT: Bizim durumumuzda, nozul bir eldiven kullanılarak yapılmıştır. - Hayvanı sağ tarafına düz bir yüzeye yerleştirin. Baskın olmayan elin parmaklarının uçlarını kullanarak, hayvanın derisini sol alt kadranda hafifçe sıkıştırın ve kaldırın.
- Enjekte etmeden önce, iğnenin uygun şekilde yerleştirilmesini sağlamak için önce aspire edin. İğne eğimini baskın elinizle yukarı kaldırın, üçte ikisi kaldırılmış deriye, vücuda paralel olarak, parmakları delmemeye veya çift eldivenleri delmemeye çok dikkat edin.
NOT: Doğru yerleştirme, negatif basınç vermeli ve iğnenin göbeğinde aspirasyon olmamalıdır. - Şırınganın içeriğini (200 μL) iki parmağınızın arasında, kaldırılmış cilde enjekte edin. İğneyi yavaşça çekmeden önce kısa bir süre tutun. Deri altı enjeksiyondan sonra iğneyi çıkarın ve güvenli bir şekilde bir Sharps kabına atın.
8. D-lusiferinin intraperitoneal enjeksiyonu
- Hayvanı anestezi odasına geri döndürmeden önce, 30 G insülin şırıngasında (20 g hayvanın başına 200 μL) 15 mg / mL stok çözeltisi ile 150 mg / kg vücut ağırlığı konsantrasyonunda D-lusiferini intraperitoneal (IP) uygulayın.
NOT: 0,5 mL'ye kadar enjeksiyon iyi tolere edilir. - Hayvanın kraniyal (baş) ucu aşağı bakacak şekilde elle kısıtlayın, dorsal yaslanma (karın tarafı yukarı). Bağırsak içeriğinin aşağı doğru hareket etmesine izin verin.
- İğneyi eğimli tarafı yukarı ve 15-20°'de hafif açılı tutarak, iğneyi karın boşluğuna itin, böylece iğnenin ucu hayvanın sol alt karın kadranının karın duvarına nüfuz eder.
- D-lusiferini intraperitoneal boşluğa yavaşça enjekte edin, iğneyi çıkarın ve güvenli bir şekilde atın.
- Fareyi anestezi odasına yerleştirin ve yaklaşık 5 dakika stabilize olmasına izin verin. 15 dakika sonra in vivo görüntülemeye devam edin.
NOT: En yüksek sinyal süresini belirlemek için her yeni hayvan modeli için bir D-lusiferin kinetik eğrisi oluşturun. Bizim durumumuzda, ışık emisyonu in vivo görüntülemede yaklaşık 15 dakikada zirve yaptı.
9. İn vivo görüntüleme analizi
- Tamamen anestezi uygulanmış hayvanı görüntüleme sisteminin odasına, sağ tarafa yerleştirin. Tümör alanını yakalamak için hayvanın kamera ve ışık kaynağı ile düzgün şekilde hizalandığından emin olun.
- Bağlantılı yazılımı açın. Hayvanın konumunu doğrulamak için görsel veya fotoğrafik görüntüleme modunu seçin. Verileri kaydedin ve klasörün adını değiştirin.
- Biyolüminesans görüntüleme modunu seçin ve otomatik olarak ayarlayın. Biyolüminesans görüntüleri yakalayın ve bilgisayar ekranındaki tümör ışığını izleyin.
- Görüntüleme tamamlandıktan sonra, hayvanı kafesine geri koyun ve herhangi bir komplikasyon gözlemlemeyin.
- İşlem sonrası gerçekleştirin, önce biyolüminesan ışığı, tüm fare tümörleri aynı ölçeği gösterecek şekilde, genellikle 1e6 ile 1e8 arasında ölçeklendirin.
- Analiz için tümörün etrafında bir İlgi Bölgesi (ROI) oluşturun ve daha fazla analiz için kopyalayın. Yatırım getirisinin ışığını ölçün ve bu sonuçları daha fazla analiz için dışa aktarın. Sonraki tümörler için daha önce oluşturulan ve kopyalanan aynı boyuttaki ROI'yi yapıştırın.
- Sistemi üreticinin talimatlarına göre kapatın ve görüntüleme odasını temizleyin. Oksijen akışıyla birlikte ekstraksiyon ve anestezi pompalarını kapatın.
10. Tümör hacmi ölçümü
- Tümör ölçümü için hayvanları izofluran ile uyuşturun. Hayvanı sabit bir pozisyona getirin ve başını örtün. Hayvanı hızla hareketsiz hale getirin.
- Kalibre edilmiş bir dijital kumpas kullanarak tümör uzunluğunu, genişliğini ve derinliğini ölçün.
NOT: Hayvan anestezi odasından çıkarıldıktan yaklaşık 1 dakika sonra uyanmaya başlayacağı için ölçümleri hızlı bir şekilde gerçekleştirin. - Ölçümleri tekrarlayın ve bir ortalama hesaplayın.
- Hacmi küresel veya eliptik tümörler için formüle göre hesaplayın:
Küresel tümörler için 7
(1)
Elipsoid tümörler için 8
(2)
NOT: Ölçüm yanlılığını en aza indirmek için, çalışmadaki tüm tümör ölçümleri aynı operatör tarafından yapılmalıdır. Ek olarak, tümör indüksiyonunun yapıldığı gün, tümör kitlesi henüz tam olarak katılaşmadığı için doğru ölçümün genellikle zor olduğu unutulmamalıdır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu protokol, insan hücrelerinin immün yetmezliği olan bir fare modeline sokulmasına izin vererek, bu tümöral hücrelerin in vivo olarak büyümesini sağlar, bu da her zaman in vitro olarak fizyolojik olarak daha önemlidir. Deney koşullarının mümkün olduğunca tekrarlanabilir olmasını, tümörlerin benzer sayıda canlı hücre içermesini ve karşılaştırılabilir ve tutarlı bir şekilde erişilebilir bir yere implante edilmesini sağlamak çok önemlidir.
Biyo...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Atimik çıplak fare modelinde ışıldayan kolorektal kanser hücrelerinin deri altı indüksiyonu için protokol, tümör oluşumu ve gerçek zamanlı izleme için standartlaştırılmış ve tekrarlanabilir bir yaklaşım sunar. İlk olarak, bu tür çalışmaların tipik olarak 28 gün boyunca yürütüldüğünü, lüminesans ölçümlerinin tümör indüksiyonu gününde ve ardından haftalık olarak yapıldığını belirtmek önemlidir. Tersine, tümör hacminin kaliper ölçümleri, hücre süspansiyonu henüz kapsüllenmediği için ilk gün...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar, bu çalışmada rapor edilen çalışmayı etkileyebilecek bilinen hiçbir rekabet eden mali çıkarları veya kişisel ilişkileri olmadığını beyan ederler.
Teşekkürler
ACS ve CNN, "Sağlık Bilimleri Doktora Programı, Universidad Católica de Murcia (UCAM), Campus de los Jerónimos nº 135, Guadalupe 30107, Murcia, İspanya" ya aittir ve UCAM'den doktora hibelerine sahiptir. Yazarlar, klinik öncesi testin yapıldığı İMİB'deki (Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria, Murcia) Hayvan Tesisi platformlarına minnettardır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1 mL opak mikrotüp tüpleri | Eppendorf | 30125215 | D-luciferin depolama |
| 15 mL konik tüp | Falcon, Thermo Fisher Scientific | 11507411 | Hücre kültürü materyali |
| İleri Dulbecco' s Modifiye Kartal Ortamı (DMEM) | Thermo Fisher Scientific | 1152046 | Hücre kültürü reaktifi |
| Athymic Nude Mouse | Charles Nehri | Crl:NU(NCr)-Foxn1nu | İmmünodeficient çıplak fare |
| Biyolüminesans İnsan Kolon kanseri hücreleri HCT116 | ATCC | CCL-247-LUC2 | HCT 116-Luc2, in vivo biyolüminesans için idealdir |
| D-luciferin Pierce | Thermo Fisher Scientific | 15215733 | Biyolüminesans ölçümü için |
| Ekstraselülük Matris (ECM) | Corning | 356231 | Hücre istilası için Matrigel Matrisi |
| Fetal Sığır Serumu | Thermo Fisher Scientific | 10500064 | Hücre kültürü reaktifi |
| Filtre Pipet Uçları | Finntip, Thermo Fisher Scientific | 94056710 | Hava baloncukları oluşumunu önlemek için |
| İnsülin Şırıngası 25 G 1 mL | İberomed | JERINRAYS29 | HCT-116 hücre hattının implantasyonu için |
| İnsülin Şırıngası 30 G 0.5 mL | DH Materyal Medico | 9.41652E+15 | D-luciferin uygulaması için |
| Living Image yazılımına sahip IVIS görüntü sistemi | PerkinElmer/Revvity | 128201 | Biyolüminesans ve floresans görüntüleme tarayıcısı |
| İğne Sterikan Heparin | VWR | 612-0153 10 | D-luciferin ve HCT-116 implantasyonu uygulaması |
| Fosfat Tamponlu Tuzlu Su (PBS) | VWR | 392-0042P | HCT-116'nın ayrılması ve implantasyonu için hücre askı çözümü |
| Tripsin-EDTA | Thermo Fisher Scientific | 11590626 | Hücre kültürü reaktifi |
| T-75 Şişesi, TC ile işlenmiş | STARLAB | CC7682-41 | Hücre kültürü materyali |
Kaynaklar
- Brough, D., Amos, H., Turley, K., Murkin, J. Trends in subcutaneous tumour height and impact on measurement accuracy. Cancer Inform. 22, 11769351231165181(2023).
- Hossain, M. S., et al. Colorectal cancer: A review of carcinogenesis, global epidemiology, current challenges, risk factors, preventive and treatment strategies. Cancers. 14 (7), 1732(2022).
- Evans, J. P., et al. Development of an orthotopic syngeneic murine model of colorectal cancer for use in translational research. Lab Anim. 53 (6), 598-609 (2019).
- Song, W. -J., et al. Colorectal cancer mouse metastasis model combining bioluminescent and micro-computed tomography imaging for monitoring the effects of 5-fluorouracil treatment. Transl Cancer Res. 12 (10), 2572-2581 (2023).
- Francescone, R. A., Faibish 3rd, M., Shao, R. A. A Matrigel-based tube formation assay to assess the vasculogenic activity of tumor cells. J Vis Exp. (55), e3040(2011).
- Li, C., Lau, H. C. -H., Zhang, X., Yu, J. Mouse models for application in colorectal cancer: Understanding the pathogenesis and relevance to the human condition. Biomedicines. 10 (7), 1710(2022).
- Jensen, M. M., Jørgensen, J. T., Binderup, T., Kjær, A. Tumor volume in subcutaneous mouse xenografts measured by microCT is more accurate and reproducible than determined by 18F-FDG-microPET or external caliper. BMC Med Imaging. 8, 16(2008).
- Faustino-Rocha, A., et al. Estimation of rat mammary tumor volume using caliper and ultrasonography measurements. Lab Anim. 42 (6), 217-224 (2013).
- Jensen, M. M., Jørgensen, J. T., Binderup, T., Kjaer, A. Tumor volume in subcutaneous mouse xenografts measured by microCT is more accurate and reproducible than determined by 18F-FDG-microPET or external caliper. BMC Med Imaging. 8, 16(2008).
- Vedder, A. R., et al. Effects of Corynebacterium bovis on engraftment of patient-derived chronic-myelomonocytic leukemia cells in NSGS mice. Comp Med. 69 (4), 276-282 (2019).
- Evans, M. S., et al. A synthetic luciferin improves bioluminescence imaging in live mice. Nat Methods. 11 (4), 393-395 (2014).
- Jain, S. Kinetic model for designing a cancer therapy. Cancer Cell Int. 2 (1), 13(2002).
- Chiu, W. -C., Ou, D. -L., Tan, C. -T. Mouse models for immune checkpoint blockade therapeutic research in oral cancer. Int J Mol Sci. 23 (16), 9195(2022).
- Peyton, S. R., Platt, M. O., Cukierman, E. Challenges and opportunities in modeling the dynamic tumor matrisome. BME Front. 4, 0006(2023).
- Ravoori, M. K., et al. Magnetic resonance imaging and bioluminescence imaging for evaluating tumor burden in orthotopic colon cancer. Sci Rep. 9 (1), 6100(2019).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
