Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kronik Miyokard İskemisi Olan Büyük Bir Hayvan Modelinin Hemodinamik Karakterizasyon ve Perfüzyon Analizi ile Terminal Hasat Prosedürü

495 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68545

⸱

22 Ağustos 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Division of Cardiothoracic Surgery, Warren Alpert Medical School, Brown University, 2Cardiovascular Research Center, Rhode Island Hospital

Bu makalede

Özet

Aşağıdaki cerrahi protokol, yeni tedavileri araştırmak amacıyla bir domuz modelinde kronik miyokard iskemisinin başarılı bir şekilde indüksiyonundan sonra kardiyak fonksiyonu ve miyokard perfüzyonunu tam ve güvenilir bir şekilde karakterize etmek için ikinci ve son prosedürü temsil etmektedir.

Özet

Tekrarlanabilirlik ve araştırma bütünlüğü, iyi kurulmuş, kanıtlanmış ilkeler ve protokoller kullanılarak üretilen bilimsel keşfin temel ilkeleridir. Ayrıca, kardiyovasküler hastalıkların (KVH) bireyler ve genel olarak toplum üzerindeki artan prevalansı ve yükü ile birlikte, araştırma için sağlam ve doğrulanmış bir model geliştirmenin gerekli olduğunu düşünmektedir. Grubumuz, son yirmi yılda aşamalı olarak rafine edilmiş bir domuz modelinde iki cerrahi protokol kullanmaktadır ve bu protokolde ilk olarak insanlarda koroner arter hastalığının (KAH) patofizyolojisini taklit eden bir ameroid konstriktör yerleştirerek kronik miyokardiyal iskemiyi indüklemekteyiz. İkinci ve son prosedür, kardiyak hemodinamik parametrelerin yanı sıra bölgesel koroner perfüzyonun kapsamlı ve düşünceli bir koleksiyonudur, ardından atan kalp ötenazisi ve kalbin ayrıntılı kesiti gelir. Laboratuvarımız, deneysel terapötik ajanlara bağlı teminatlandırmayı ölçmek için güçlü bir yöntem olarak iskemik alana miyokardiyal kan akışını analiz etmek için izotop etiketli mikroküreler kullanır. Ayrıca, muhtemelen en önemli ölçülebilir kardiyovasküler sonuç, çok çeşitli hemodinamik parametreleri ölçmek için sol ventrikül basınç-hacim (PV) döngü kateterizasyonunu kullanıyoruz. Kronik miyokard iskemisi domuz modelimizin kapsamlı kardiyak analizini detaylandırarak, diğer araştırmacıların kardiyovasküler hastalıkların ortadan kaldırılması için kendi protokollerini ve tedavi araştırmalarını geliştirip geliştirebileceklerini umuyoruz.

Giriş

Amerika Birleşik Devletleri'nde, bireylerin yaklaşık yarısı, kalp ve kan damarlarının büyük bir hastalık durumu grubunu içeren en az bir CVD bileşenine sahiptir1. 2060 yılına gelindiğinde, KVH içeren çoklu tanıların prevalansının 2025 yılına kıyasla önemli ölçüde artacağı tahmin edilmektedir. Örneğin, miyokard enfarktüsünün %30, iskemik kalp hastalığının (İHD) %31,3 ve kalp yetmezliğinin %33 oranında artacağı tahmin edilmektedir2. Bu şaşırtıcı istatistikler, diabetes mellituslu bireylerin sayısının %39,3, dislipideminin %27,5 ve hipertansiyonun %27,2 oranında arttığı tahmin edilen kardiyovasküler risk faktörlerine ilişkin benzer tahminlerle birlikte ele alındığında daha da endişe vericidir2. Toplamda, bu, CVD ve risk faktörleri için yenilikçi tedavileri etkili bir şekilde araştırmak için güvenilir ve tekrarlanabilir araştırma modellerine olan yakın ihtiyacı vurgulamaktadır. Domuz3'te fizyolojik olarak benzer CAD modelimizi gösterdik. Domuz kullanımı, klinik öncesi çalışmaların daha önce çevrilebilirlik açısından eleştirildiği CAD'ın insan durumunu doğru bir şekilde temsil etmede araştırma modelimizin geçerliliğini yerine getirmeye yardımcı olur. Domuzlar, insanlara benzer koroner anatomiye, kalp fizyolojisine ve miyokard proteomuna ve metabolizmasına sahiptir4. Ayrıca, modelimizin önemli bir bileşeni, araştırma terapileri nedeniyle sonraki fizyolojik, miyokardiyal ve moleküler sonuçları doğru bir şekilde açıklamaktır.

Tipik olarak, klinik çalışmalar, yalnızca gözlem yoluyla keşfedilen herhangi bir yararlı kardiyovasküler sonucu araştırmak için yeni tıbbi veya cerrahi tedavileri uygulamak için kullanılır. Bu, kardiyovasküler etkilerini araştıran birkaç yeni anti-diyabetik ilacın dönüm noktası denemelerinde belirgindir. Örneğin, SUSTAIN-6 randomize kontrol çalışmasında, glukagon benzeri bir peptit-2 (GLP-1) agonisti olan semaglutid ile tedavi edilen tip 1 diyabetli hastaların, plasebo5'e kıyasla daha düşük majör kardiyovasküler advers olay oranlarına sahip olduğu bulundu. Benzer gözlemler, tip 2 diyabet, kronik böbrek hastalığı ve ek kardiyovasküler risk faktörleri6 olan hastalarda majör advers kardiyovasküler olayların azaldığını gösteren, bir çift sodyum-glukoz kotransporter 1 ve 2 (SGLT-1 ve SGLT-2) inhibitörü olan sotagliflozin üzerinde çalışan başka bir RCT'de de görülmüştür. Bu bulgular, kardiyovasküler risk faktörlerinin ve hastalıkların insidansını azaltmak için bu tür tedavilerin FDA onayını genişletmede çok önemli olmuştur. Bununla birlikte, bu gözlemsel bulguların önemli bir sınırlaması, bu yeni tedavilerin bu tür etkileri sürdürdüğü mekanizmaların anlaşılmamasıdır. Bu, CVD için yeni tedaviler için altta yatan mekanik belirleyicilerin bilimsel keşfinde modelimizin önemini örneklemektedir.

Büyük bir hayvan modeli kullanarak, kardiyak fonksiyon ve miyokard perfüzyonundaki makroskopik değişiklikleri invaziv olarak karakterize edebiliyor ve deneysel tedavilere yanıt olarak mikroskobik moleküler kaymaları kapsamlı bir şekilde anlayabiliyoruz. Kardiyak fonksiyondaki varyasyonları belirlemek için PV loop kateterizasyonunun kullanımını kullanıyoruz. PV döngülerinin kullanımı, sistol ve diyastol sırasında ventriküler fonksiyonu invaziv olarak belirlemek için altın standarttır ve ekokardiyogram veya kardiyak MRG7 gibi invaziv olmayan görüntüleme tekniklerini karşılaştırmak için bir ölçüt görevi görür. Bu teknik, her bir hemodinamik değişkeni belirlemek için birkaç ölçüm yapmamıza ve tekrarlanabilir veri toplamayı sağlamak için kateteri gerçek zamanlı olarak yeniden konumlandırmamıza olanak tanır. Başka bir deyişle, bu tekniğin kullanımı, başlangıç kardiyak fonksiyonel, iskemik başlangıçtaki kardiyak fonksiyon ve tedavi sırasında gibi uzunlamasına verilerin toplanamaması durumunda sınırlıdır. Bunun, yükten bağımsız ölçümleri ölçme yeteneği ile dengelendiğini ve kalbin içsel fonksiyonel durumunu kazandığını düşünüyoruz. Ayrıca, en iskemik bölgenin haritalandırılmasından sonra izotop etiketli mikroküre enjeksiyonlarının kullanılması, bir terapötik ajanın herhangi bir iskemik faydasının belirlenmesine yardımcı olur. Mikroküre enjeksiyonlarının bölgesel miyokardiyal kan akışındaki değişikliklerin doğru bir temsili olduğu uzun zamandan beri kanıtlanmıştır8.

Laboratuvarımız sürekli olarak 15 μm çapında ve 2,5 milyon mikroküre/mL konsantrasyonda mikro küreler kullanır. Bu çap, mikrokürelerin kan akışına göre düzgün bir şekilde dağıldığını ve daha küçük çapın sol ventrikül katmanları9 arasındaki dağılımda en az varyasyon gösterdiğini gösteren önceki bir çalışma ile onaylandığı gibi, miyokardiyal kan akışının en hassas ölçümünü sağlar. Ek olarak, laboratuvarımızda kullanılan bu kadar yüksek konsantrasyonlarda kolayca üretilen güvenilir sonuçlar elde etmek için minimum miktarda mikroküre alımı gereklidir. Birlikte ele alındığında, terminal hasat sırasında kullanılan teknikler, herhangi bir sayıda deneysel tedaviden sonra temel kardiyak fizyolojik değişiklikleri tutarlı ve titiz bir şekilde analiz eder. Bu karakterizasyon, miyokard dokusunu toplama ve miyokard içindeki merkezi dogmanın her katmanında sağlam, kantitatif karakterizasyon sağlayan multiomik çalışmalar gibi ileri teknolojilerle bölgesel değişiklikleri kapsamlı bir şekilde analiz etme yeteneği ile daha da desteklenmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Aşağıdaki cerrahi prosedür, Rhode Island Hastanesi ve Brown Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır (Protokol #23-08-0005).

1. Hayvan modeli

  1. Daha önce proksimal sol sirkumfleks koroner arter (LCx) etrafına bir ameroid yılan yerleştirilmiş, böylece kronik miyokardiyal iskemiyi indükleyen ve daha sonra deneysel bir terapötik ajan ile tedavi edilmiş Yorkshire domuzunu seçin. Ameroid yerleştirme için ilk işlem ile sonraki terminal hasat arasında ~ 7 hafta tutun. Ameroidlerin kapanması için 2 hafta bekleyin ve domuzun daha sonra deneysel bir tedavi görmesini sağlayın. Bu terminal hasat sırasında domuzun ~ 18 haftalık olduğundan ve ~ 40 kg ağırlığında olduğundan ve deney ve kontrol gruplarının cinsiyete göre eşleştiğinden emin olun.
    NOT: Temsili bir şekil, ameroidin daha önce yerleştirildiği yeri ve iskemik miyokardın beklenen alanını içeren, hasat ettiğimiz kalbin anatomisini göstermektedir (Şekil 1).

2. Cerrahi öncesi prosedür

  1. İşlem sabahı yiyecekleri saklayın.
  2. İntramüsküler telazol (4.4 mg / kg) ve ksilazin (2.2 mg / kg) enjeksiyonları kullanarak domuzu uyuşturun ve kelepçeli bir endotrakeal tüp ile entübe edin.
  3. 0.03 mg / kg buprenorfin kullanarak analjezi başlatın.
  4. Büyük kulak damarlarından birine intravenöz (IV) bir kateter (20-22 G) yerleştirin ve ~ 5-10 cc ∙kg-1 ∙h-1 oranında% 0.9 salin infüze etmeye başlayın.
    NOT: IV sıvısı, domuzun NPO durumu ve cerrahi vakanın uzunluğu bağlamında yalnızca bir bakım oranındadır.
  5. Cerrahi bölgeyi ve EKG izleme için kullanılan diğer bölgeleri tıraş edin.
  6. Domuzu ameliyathane masasına taşıyın, bacaklar masaya bağlanmış olarak sırtüstü yatırın ve izofluran (% 0.75-3.0) kullanarak anesteziye devam edin.
  7. EKG ve kan basıncı izlemeye başlayın ve domuzun üzerine bir elektrokoter topraklama pedi uygulayın.
  8. Ameliyat bölgesini temizleyin.
    NOT: Bu bir terminal prosedürüdür; Bu nedenle, sterilitenin korunmasına gerek yoktur. Cerrahi alan hazırlığı ve örtüleme açısından bireysel tercihtir.

3. Cerrahi prosedür

  1. Femoral kateterizasyon
    1. Femoral nabız için palpe edin.
    2. Sol veya sağ kasıkta, kasık kıvrımına kabaca dik olarak, kranyokaudal olarak hareket eden bir femoral kasık kesimine hazırlanmak için% 2 lidokain enjekte edin.
    3. # 10 neşter kullanarak 4-5 cm'lik bir kesi yapın, yine kasık kıvrımına dik kalın, femur nabzının palpe edildiği yerde kaudal olarak başlayın ve kraniyal olarak hareket edin. (Şekil 2A)
    4. Elektrokoter kullanarak, deri altı dokusundan femoral arter seviyesine kadar diseksiyon yapın. Femoral arteri daha da açığa çıkaran kasları yaymak için bir Weitlaner ekartörü kullanın.
      NOT: Bu, semimembranosus ve vastus medialis kasının küçük bir miktar bölünmesini gerektirebilir.
    5. Femoral arteri çevreleyen dokudan çevresel olarak açığa çıkarmak için dik açılı bir kelepçe kullanarak künt bir şekilde inceleyin. Keskin bir şekilde çıkarılamayan yapışmaları keskin bir şekilde bölmek için Metzenbaum makasını kullanın.
    6. Arteri bir damar halkası ile çevreleyerek femoral arteri izole edin.
    7. Arterin proksimal ve distal kontrolünü sağlamak için ikinci bir damar halkası yerleştirin.
    8. 80 IU / kg'lık bir dozda kanülasyondan önce domuzu sistemik olarak heparine edin.
      NOT: Heparinize etmeden ve femoral erişim sağlamadan önce medyan sternotomi ve kardiyak maruziyetin tamamlandığından emin olun. Heparinizasyondan önce kardiyak maruziyetin tamamlandığından emin oluruz çünkü herhangi bir yapışıklık lizisi kanamaya neden olabilir. Heparinizasyonun genel amacı, hem femoral artere hem de sol ventriküle erişirken trombüsün önlenmesidir.
    9. Seldinger tekniğini kullanarak, arka arter duvarını delmekten kaçınarak femoral arteri 18 G'lik bir erişim iğnesi ile delin. Kan geri döndüğünde, iğneden artere bir kılavuz tel ilerletin. İğneyi çıkarın ve 7F arteriyel kılıfı artere yönlendirin. Kılavuz teli ve vasküler dilatörü çıkarın, sadece arteriyel kılıfı yerinde bırakın.
      NOT: Femoral artere kolayca diseksiyon yapabildiği için erişmek zor olabilir. Bunun bir terminal prosedürü olduğu göz önüne alındığında, femoral arterin Metzenbaum makasıyla keskin bir şekilde kesilmesi ve bu meydana gelirse kılavuz telin doğrudan lümene yerleştirilmesi önerilir. Arteriyel kılıf daha sonra kılavuz tel üzerinden damar içine kolayca geçirilebilir. Femoral arterin distal kısmını küçük bir hemostat kullanarak klemplediğinizden emin olun.
    10. Kılıf üzerinden kan akışını sağlayın. Harvard Aparatı para çekme pompasına bağlayın (Şekil 3).
  2. Medyan sternotomi
    1. Yardımcı cerrah sayısına bağlı olarak, bu kısım kasık kesimi ile eş zamanlı olarak tamamlanabilir.
    2. Orta hat sternotomisine hazırlanmak için deri altına% 2 lidokain enjekte edin.
    3. # 10 neşter kullanarak sternal çentikten ksifoid sürecine kadar orta hat insizyonu yapın. (Şekil 2B)
    4. Elektrokoter kullanarak, sternuma ulaşılana kadar deri altı dokusunu bölün ve hemostazı koruyun.
    5. Elektrokoter ile lateral ve inferior olarak herhangi bir yapışmayı serbest bırakarak ksifoid sürecini eksize edin. Ksifoidi yukarı kaldırmak için bir Kelley kelepçesi kullanın ve elektrokoter kullanarak tabanından yatay olarak kesin.
    6. Sternumun bu kısmını bölmeyi kolaylaştırmak için sternal çentiğin üst kısımda serbest olarak diseke edildiğinden emin olun. Bu tipik olarak bazı yüzeysel kayış kaslarının bölünmesini gerektirir.
    7. Bir parmağınızı kullanarak sternumun altını künt bir şekilde inceleyin.
    8. Bir Lebsche bıçağı kullanarak, sternumu keskin bir şekilde bölün ve orta hatta kalmanızı sağlayın. Bıçağın açısını gerektiği gibi değiştirin ve sternumun son üçte birine ulaşıldığında yavaşça devam edin.
      NOT: Sternumun kraniyal kısmının dik açılanması ve kalınlığı nedeniyle bıçağın kullanımı, insanlarda olduğu gibi sternal testereye tercih edilir ve ideal olarak altta yatan büyük damarlara zarar verme riskini azaltır. Altta yatan büyük damarları korumak için sternumun kraniyal kısmının altına gazlı bez yerleştirmek faydalı olabilir.
    9. Sternotomi tamamlandıktan sonra, göğüs duvarı ile perikard veya plevra arasında varsa herhangi bir yapışıklığı künt ve keskin bir şekilde parçalayın.
    10. Kaburgaları açmak ve kalbi ortaya çıkarmak için bir sternal ekartör yerleştirin.
    11. Metzenbaum makası kullanarak perikardımı açın. Sağ atriyuma doğru uzanın ve sol ventrikül tepesine doğru kaudal olarak devam edin.
    12. Sol ve sağ atriyal uzantıları ortaya çıkarmak için yapışıklıkları künt veya keskin bir şekilde parçalamaya devam edin. Allis kelepçesi üzerinde fıstık süngeri kullanılması bu diseksiyon için yardımcı olabilir.
    13. Atriyal apendiksleri incelemek ve tanımlamak zorsa, timektomi yardımcı olabilir. Bunu yapmak için, timik dokuyu incelemek için elektrokoter kullanın.
    14. Atriyal ekler açığa çıktıktan sonra, tek odacıklı bir harici pacing kutusuna bağlı olan her iki uzantıya da pacing clamps uygulayın. Her vuruşun EKG'de yakalandığından emin olmak için 150 bpm'ye kadar ilerleme hızını test edin.
    15. Yine künt ve keskin diseksiyon kullanarak sol ventrikül apeksinin açığa çıkmasını sağlayın.
    16. Son olarak, sol plevral boşluğa girin ve inferior vena kava'yı (IVC) büyük bir Satinsky klempi ile çevreleyin. Bir damar halkası ile izole edin.
    17. Bu tamamlandıktan sonra, domuzu heparinize etmek ve femoral erişim sağlamak için uygun bir zamandır.
  3. Mikroküre enjeksiyon-perfüzyon analizi
    1. IV tüpüne bağlı ince ölçülü bir kelebek iğne ve üç bir musluk ile sol atriyal apendiksiyona erişin. İğneyi yönlendirmek ve yerinde tutmak için küçük bir hemostat kullanın.
    2. Steril heparinize salin ile musluka bir şırınga bağlayın ve doğru konumlandırmayı sağlamak için geri çekin. Kan kolayca çekiliyorsa, pozisyon doğrudur.
    3. 5 mL lutesyum etiketli mikroküreler (konsantrasyon: 2,5 milyon mikroküre / mL) içeren bir şırıngayı üç vanaya bağlayın.
    4. 90 saniye boyunca bir ameliyathane asistanı atayın.
    5. Harvard Apparatus pompası aracılığıyla 6.67 mL / dak hızında toplam 10 mL kan için femoral arter kan alımına başlayın ve zamanlamaya başlayın.
    6. Kan alımının ilk 30 saniyesinde, lutesyum mikrokürelerini sol atriyal apendikste enjekte edin (Şekil 4). Yarısında, mikro küreler içeren şırıngayı geri çekerek konumlandırmayı onaylayın.
    7. Bu tamamlandıktan sonra, hortumu bir heparinize salin şırıngası ile yıkayın ve tekrar doğru konumlandırmayı sağlayın.
    8. 90 saniye sonra, boruyu femoral erişimden çekme pompasına ayırın ve pacing sırasında analiz elde etmek için yeni boruyu yeniden bağlayın.
    9. 150 bpm'ye kadar ilerlemeye başlayın.
    10. 3.3.5, 3.3.6 ve 3.3.7 adımlarını 5 mL samaryum etiketli mikroküreler kullanarak tekrarlayın (konsantrasyon: 2.5 × 106 mikro küre / mL).
    11. Pacing'i durdurun ve femoral arteriyel kılıfı Harvard Aparatı çekme pompasından ayırın.
    12. Kelebek iğneyi çıkarın ve sol atriyal apendiksin hemostazını sağlamak için baskı uygulayın.
  4. Basınç-hacim döngü kateterizasyonu
    1. Sol ventrikül apeksine 4-0 polipropilen ile bir çanta ipi sütürü yerleştirin.
    2. Sütürün kapsadığı alanın ortasında, yukarıda açıklanan Seldinger tekniğini kullanarak sol ventriküle başka bir arteriyel kılıfa erişin ve yerleştirin.
    3. Kalibre edilmiş bir mikromanometre uçlu basınç-hacim transdüksiyon kateterini kılıf aracılığıyla sol ventriküle yerleştirin. Arteriyel kılıfı kateterin üzerinden sol ventrikülden dışarı çekin ve Basınç-Hacim Ölçüm Sistemini kullanarak basınç dalga biçimini dönüştürmeye başlayın. Bu, kateterin yerini, örneğin kateterin aortta, kapak kompleksinde veya sol ventrikülde olup olmadığını bildirecektir. Sol ventrikül boşluğunda olduğundan emin olmak için kateteri gerektiği gibi geri çekin ve basınç-hacim döngü morfolojisinin uygun görünmesini sağlamak için yeniden konumlandırın (Şekil 5).
      NOT: Kılıfın sol ventrikülden çıkarılması, basınç-hacim izlemesinin kateterden daha iyi transdüksiyonuna izin verir ve her bir PV döngüsünün en uygun morfolojisini elde etmek için kateterin konumunu değiştirmede daha fazla kolaylık sağlar.
    4. Sistolik ve diyastolik kan basıncı ve ortalama arteriyel basınç elde etmek için femoral girişe başka bir kalibre edilmiş PV kateteri yerleştirin.
    5. PV döngülerinin morfolojisinden memnun kaldıktan sonra, basınç-hacim döngülerindeki solunum değişimini azaltmak için dinlenme sırasında üç nefes tutma işlemi gerçekleştirin. Bu, kardiyak debi ve strok hacmi gibi yüke bağlı birkaç değişkeni ölçecektir.
    6. Bunu takiben, damar halkasını nazikçe geri çekerek IVC'yi kapatın ve sistolik basınç sonu hacim ilişkisi (ESPVR) ve diyastol sonu basınç hacmi ilişkisi (EDPVR) gibi yükten bağımsız değişkenler elde etmek için eşzamanlı bir nefes tutma işlemi gerçekleştirin. İki kez daha tekrarlayın.
    7. 150 bpm'ye kadar volta atmaya başlayın ve stres koşulları altında kardiyak performansı karakterize etmek için üç nefes tutma elde edin.
    8. Bu, kardiyak fonksiyonun profilini çıkarır. Her iki kateteri de çıkarın ve çanta ipi dikişini sol ventriküle bağlayın.
  5. Ötenaziyi yenmek
    1. İlerleme hızı kablolarını ve tüm aletleri göğüsten çıkarın.
    2. Yardımcı cerrah için emme elde edin.
    3. Kalbin göğüs duvarına herhangi bir lateral yapışıklığını künt bir şekilde inceleyin ve sol ventrikül apeksinin kolayca üst kısımdan kaldırılabildiğinden emin olun.
    4. Sedasyonu derinleştirmek için anesteziye danışın.
    5. Kolayca erişilebiliyorsa, superior vena kava (SVC) üzerine büyük bir Kelley kelepçesi ve IVC'nin etrafına büyük bir Satinsky kelepçesi yerleştirin. Aynı anda kelepçeleyin.
    6. Kalbi göğsünden çıkarmak için hemen bir # 10 neşter alın. Bu, kalbin IVC, SVC, aort, pulmoner arterler ve pulmoner venlerden ayrılmasını içerir.
      NOT: Yardımcı cerrah, bu süre zarfında cerrahi alanı mümkün olduğunca açık tutmak için emme sağlamalıdır.
    7. Kalbi göğsünden alın ve ayrı bir masaya koyun.
    8. İki yarıya kesin: apikal ve bazal (Şekil 6A). Bu, ventriküler dokuyu atriyumdan ve büyük damarlardan ayıracaktır.
    9. Sol ventrikülü diğer tüm miyokard dokusundan ayırın.
    10. Her yarı, Şekil 6B'de gösterildiği gibi, sol ön inen koroner arter (LAD) ve arka inen koroner artere yakınlığa bağlı olarak çevresel olarak on iki bölüme ayrılmalıdır.
    11. Diğer tüm odacıklardan, kapakçıklardan, büyük damarlardan ve pankreas, karaciğer, akciğer, böbrek vb. gibi periferik dokulardan doku örnekleri toplayın.
    12. Her sol ventrikül bölümünden küçük bir numune, mikroküre ölçümü için BioPAL'a tahsis edilmelidir. Bazı bölümler histolojik analiz için formalin içinde sabitlenirken, dokunun çoğunluğu gelecekteki moleküler çalışmalar için sıvı nitrojen içinde dondurulur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

İlk olarak, sol atriyal apendikste izotop işaretli mikroküreler enjekte edilerek, bölgesel miyokard perfüzyonu ölçülür. Miyokardiyal kan akışını hesaplamak için, 6.67 mL/dk'lık sabit bir kan çekme oranı kullanıldığında, aşağıdaki denklem uygulanabilir: miyokardiyal kan akışı = (referans kan çekilmesi [6.67 mL/dk]/doku ağırlığı) (niceliksel doku mikroküre sayısı/niceliksel kan referans mikroküre sayımı). Basitçe söylemek gerekirse, belirli bir miyokard bölümündeki ölçülen mikrokürelerin, b...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu cerrahi prosedürün dört kritik adımı vardır: kalbin maruz kalması, femoral kateterizasyon, perfüzyonel analiz için mikroküre enjeksiyonu ve basınç-hacim döngüsü edinimi. Kalbin açığa çıkarılması ile ilgili olarak, ilk cerrahi işleme bağlı olarak belirgin yapışıklıklarla karşılaşma olasılığı önemli bir husus olmalıdır. Medyan sternotomi yapılırken, perikard, sternotomiye başlamadan önce künt bir şekilde süpürülmesi gereken göğüs duvarına yapıştırılabilir. Sternumun son üçte birine yakl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların herhangi bir açıklaması veya çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Araştırma finansmanı, aşağıdaki hibe numaraları da dahil olmak üzere Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından sağlandı: T32HL16051703 (KCM, C.S., D.D.H, M.K.), R01HL46716 (FWS) ve R01HL128831 (FWS). Rhode Island Hastanesi ve Brown Üniversitesi'ndeki veteriner personeline, insancıl hayvan bakımı ve çok sayıda projemizdeki olağanüstü destekleri için en derin şükranlarımızı sunarız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
#10 NeşterMedlineMDS15310
%0,9 Tuzlu SuDechra/Vetivex17033-492-50Oran: Vaka sırasında 5-10 mL/kg
18G İğnelerPatterson Veteriner78032793İlaç/mikroküre çizmek için
%2 LidokainAnka57319-533-05Dozajlama: 2-5mg/kg
4-0 Polipropilen SütürCovidD9H0436YÇanta ipi için
Tüm Cerrahi AletlerSteris ve MedlineSatış Temsilcisi GerektirirHepsi genellikle hastane ameliyathanelerinde bulunur
Analjezi: BuprenorfinHospiraMarka Adı: BupredineDozaj: 0,03 mg/kg
Anestezi: TelazolZoetis(tiletamin ve zolazepam)Dozaj: 4,4 mg/kg
Anestezi: ksilazin (Rompun)Dechra HakkındaYOKDozajlama: 2,2 mg/kg
Atardamar KılıfıCordis401-711 milyon6F veya 7F; iki gerektirir
Kelebek iğne infüzyon setiSörfSV-25BLKMikroküre enjeksiyonu için; tipik olarak 23-25G
Klorheksidin %4BD E-Z Fırçalama371073Tercih edilirse Cerrahi Hazırlık
Kelepçeli Endotrakeal TüpRUŞTipik olarak 7-0Domuz boyutuna ve ağırlığına bağlı olarak farklı boyutlara ihtiyaç duyabilir
EKG İzleme SistemiOrta İşaretYOKÇok Parametreli Monitör
ElektrokoterBovie Uzmanı Pro1250'LERMümkünse genellikle 2 kurun
İzofluran, USPDechra HakkındaDozajlama: %0,75-%3,0
Dizüstü bilgisayarHP MicrosoftYOKBireysel olarak tercih edilen herhangi bir dizüstü bilgisayarı kullanabilir
Lebsche BıçağıBütünleşik300-425YOK
Lutesyum STERspheresBioPAL, Inc.C-15E20Miktar: Ameliyat başına 5cc
Mini Beyaz Damar Döngüleri (X-ışını Tespit Edilebilir)DeRoyal30-711Femoral arter ve IVC'yi izole etmek için
Çoklu 5cc ŞırıngalarTerumoSS-05L SerisiYıkamalar ve mikroküre enjeksiyonları için
Kalp piliOsypka Medikal2428001Geçici bir tempo
PV Loop KateterlerTransonikModel: FDH-5018B-E3450 ve S/N: 50-679PV Döngü Alımı için
PV Döngü Bilgisayar ProgramıTransonik BilimADV500 YazılımıDizüstü bilgisayarınızda programlayın
PV Döngü Veri Toplama SistemiTransonik ve EnstrümanlarModeller: FY097B ve PowerLab 8/35Kateterleri ve bilgisayarı bağlar
Samaryum STERIspheresBioPAL, Inc.C-15A20Miktar: Ameliyat başına 5cc
Küçük TokmakBütünleşik410-335YOK
Steril EldivenlerEncore820955Yine de steril eldiven ve önlük tavsiye ederim
Steril SalinBAXTERG171328Hemarinize tuzlu su yapmak için seyreltin
Emiş SistemiGOMCO4042Kendi Tesisinin Duvar Emişi Daha İyi
Emme ucu: YankauerMedlineDYND50130Kalbi rezeke ederken alanı temiz tutmak önemlidir
Sistemik HeparinKoyu Renkli82496Dozaj: 80 IU/kg
Üç muslukJorgensen Laboratuvarları, Inc.200820Mikroküre enjeksiyonları için
Sıcak Su BanyosuBalıkçıKullanmadan önce kateterleri ısıtmak için
Para Çekme PompasıHarvard Aparatı70-2002Periferik kanı sabit oranda çekmek için
Yorkshire DomuzuCBSET, Inc.YOKDomuz zaten ilk cerrahi prosedürden geçmiş olacak

Kaynaklar

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2022 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).
  2. Mohebi, R., et al. Cardiovascular disease projections in the United States based on the 2020 census estimates. J Am Coll Cardiol. 80 (6), 565-578 (2022).
  3. Stone, C. R., et al. Crafting a rigorous, clinically relevant large animal model of chronic myocardial ischemia: what have we learned in 20 years. Methods Protoc. 7 (1), 17(2024).
  4. Jia, H., Chang, Y., Song, J. The pig as an optimal animal model for cardiovascular research. Lab Anim (NY). 53 (6), 136-147 (2024).
  5. Marso, S. P., et al. Semaglutide and cardiovascular outcomes in patients with type 2 diabetes. N Engl J Med. 375 (19), 1834-1844 (2016).
  6. Aggarwal, R., et al. Effect of sotagliflozin on major adverse cardiovascular events: a prespecified secondary analysis of the SCORED randomised trial. Lancet Diabetes Endocrinol. 13 (4), 321-332 (2025).
  7. Stonko, D. P., et al. A technical and data analytic approach to pressure-volume loops over numerous cardiac cycles. JVS Vasc Sci. 3, 73-84 (2022).
  8. Cannon, P. J. Radioisotopic studies of the regional myocardial circulation. Circulation. 51 (6), 955-963 (1975).
  9. Domenech, R. J., et al. Total and regional coronary blood flow measured by radioactive microspheres in conscious and anesthetized dogs. Circ Res. 25 (5), 581-596 (1969).
  10. Roth, D. M., et al. Development of coronary collateral circulation in left circumflex Ameroid-occluded swine myocardium. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 253 (5 Pt 2), H1279-H1288 (1987).
  11. Elmadhun, N. Y., Sadek, A. A., Sabe, A. A., Lassaletta, A. D., Sellke, F. W. Alcohol and the heart: a proteomics analysis of pericardium and myocardium in a swine model of myocardial ischemia. Ann Thorac Surg. 100 (5), discussion 1635 1627-1635 (2015).
  12. Harris, D. D., et al. Proteomic analysis and sex-specific changes in chronically ischemic swine myocardium treated with sodium-glucose cotransporter-2 inhibitor canagliflozin. J Am Coll Surg. 238 (6), 1045-1055 (2024).
  13. Harris, D. D., et al. Proteomic profiling of SGLT-2 inhibitor canagliflozin in a swine model of chronic myocardial ischemia. Biomedicines. 12 (3), 558(2024).
  14. Sabe, A. A., et al. Investigating the effects of resveratrol on chronically ischemic myocardium in a swine model of metabolic syndrome: a proteomics analysis. J Med Food. 18 (1), 60-66 (2015).
  15. Sabe, S. A., et al. Effects of canagliflozin on myocardial microvascular density, oxidative stress, and proteomic profile. J Mol Cell Cardiol Plus. 6, 100052(2023).
  16. Xu, C. M., et al. Proteomic assessment of hypoxia-pre-conditioned human bone marrow mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles demonstrates promise in the treatment of cardiovascular disease. Int J Mol Sci. 24 (2), 1674(2023).
  17. Billig, S., et al. Transesophageal echocardiography in swine: evaluation of left and right ventricular structure, function and myocardial work. Int J Cardiovasc Imaging. 37 (3), 835-846 (2021).
  18. Hocum Stone, L. L., et al. Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery. J Thorac Cardiovasc Surg. 153 (3), 582-590 (2017).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Domuz ModeliAmeroid KonstriktörKoroner Arter HastalığıBasınç-Hacim DöngüsüMiyokardiyal Kan Akımıİzotop Etiketli Mikrosferler

Bu makale yayımlandı

Video yakında

Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.