Bu protokol, deneysel araştırmalar için tasarlanan derin inferior epigastrik arter pedikulu temelinde insan perforatör flep modelinin toplanma cerrahi tekniğini açıklar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bu protokol, deneysel araştırmalar için tasarlanan derin inferior epigastrik arter pedikulu temelinde insan perforatör flep modelinin toplanma cerrahi tekniğini açıklar.
Son zamanlarda, sitoprottektif ajanların enjeksiyonu, ex vivo makine perfüzyonu ve aşırı soğutma gibi koruma yaklaşımları, iskemik ve hipoksik hasarı hafifleterek hem standart hem de marjinal organların uzun vadeli korunmasını artırmak için stratejiler olarak ortaya çıkmıştır. Cesaret verici olsa da, vaskülerize kompozit allotransplantasyon (VCA) alanında uygulanması büyük ölçüde preklinik araştırmalarla sınırlı kalır. Bugüne kadar, VCA perfüzyon stratejilerini inceleyen çoğu çalışma hayvan modellerine, özellikle domuz veya kemirgen kompozitlerine dayanmıştır. Bu modeller değerli mekanik içgörüler sağlasa da, anatomik, immünolojik ve fizyolojik farklılıkları insan uygulamalarında tekrarlanabilirliği ve translasyonel önemi sınırlar.
Bu protokolde, koruma çalışmaları için insan derin inferior epigastrik perforatör (DIEP) kapağının alınması için gereken her cerrahi adım ayrıntılı olarak tanımlanır. Perforatör, subfasyal diseksiyon olmadan fasyanın üzerinde kesilmiş olur ve kateterizasyon için kısa ama yeterli bir pedikle elde edilir. Bu model, standart abdominoplasti işlemlerinden atılan dokudan faydalanarak hasta için ek bir risk oluşturmaz. Fonksiyonel bir flepin ameliyat süresini uzatmadan veya hasta güvenliğini tehlikeye atmadan alınmasını sağlamak için kritik adımlar belirlenmiştir. Daha sonra deneysel kullanımdan önce flep canlılığını doğrulamak için fonksiyonel görüntüleme yapılır ve doku bütünlüğünü takip etmek için ardışık biyopsiler yapılabilir. Bu model, özellikle kas koruyucu VCA prosedürlerini içeren araştırmalar için uygundur — örneğin kısmi yüz nakli — ve otolog serbest flep koruma çalışmaları için de önemli olabilir.
Vaskülerize kompozit allotransplantasyon (VCA), özellikle yüz ve üst uzuvlarda karmaşık doku kusurlu hastalar için umut verici bir rekonstrüksiyon çözümüdür1. Ancak, VCA iskemi-reperfüzyon yaralanmasına karşı oldukça hassastır; bu da greftin canlılığını ve uzun vadeli sonuçları tehlikeye atabilir. Bu bağlamda, sitoprotektif ajanların enjeksiyonu, ex vivo makine perfüzyonu ve süper soğutma gibi koruma yaklaşımları, koruma süresini uzatmak, greft kalitesini optimize etmek ve nakil öncesi canlılık değerlendirmesini mümkün kılanstratejiler olarak ortaya çıkmıştır 3,4,5,6,7. Katı organların normotermik ex vivo perfüzyonu son on yılda deneysel bir laboratuvar tekniğinden klinik uygulamaya başarıyla aktarılmışolsa da, umut verici sonuçlar elde etmiş olsa da, büyük ölçüde VCA alanındaki araştırma ortamıylasınırlı kalır.
Bugüne kadar, VCA perfüzyon protokollerini inceleyen çoğu çalışma hayvan modellerine dayanmıştır, özellikle domuz veya kemirgenkompozitleri 10. Bu modeller değerli içgörüler sunsa da, anatomik, immünolojik ve fizyolojik farklılıklar nedeniyle tekrarlanabilirliği ve translasyonel önemi doğası gereğisınırlar 11,12. İnsan dokusu modelleri daha ilgili bilgiler sağlar, ancak beyin ölümü bağışçılarından alınan taze dokulara araştırma amaçlı erişim son derece zordur; karmaşık lojistik, sıkı düzenleyici onay gerektirir ve etik endişeler gündeme getirir13,14. İdeal bir alternatif, tam bir VCA prosedürünün karmaşıklığını veya riskini taşımayan, hasta için tamamen güvenli olan, kadavra olmayan, etik olarak kabul edilebilir, insan tabanlı bir flep modelidir. Önemli olarak, tekrarlanabilir ve ölçeklenebilir araştırmaları kolaylaştırmak için kolayca erişilebilir olmalıdır.
Burada, VCA koruma araştırmaları için insan derin inferior epigastrik perforatör (DIEP) flep modeli tanımlanmıştır; abdominoplasti işlemlerinden atılan dokular kullanılarak hasta için ek bir risk olmadan.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm hastalar Helsinki Bildirgesi'ne uygun olarak standart insani bakım gördü ve protokol kurumsal etik komitesi tarafından onaylandı (proje No. IRB00014528_2025_32). Hasta, atılmış dokunun araştırma amaçlı kullanımı için bilgilendirilmiş onay verdi.
1. Ameliyat öncesi bakım
NOT: Bu deri perforatör flapları, fasya ve kas hariç, hastalarda cerrahi atıklardan elde edilir; çoğunlukla bariatrik sonrası ve yalnızca önceden öngörülebilir göbek transpozisyonu (yani belirgin bir karın panusu) olan önceki dermolipektomi vakalarında alınabilir. İşlem sırasında planlı liposuction bir dışlama kriteridir. Eşzamanlı diyastaz onarımı kontrendikasyon değildir, çünkü bu işlem flep topundan sonra gerçekleşir. Karın pannusu genellikle en azından kısmi kasık bölgesini kaplar. Hastalarda tromboembolik olay öyküsü olmamalı ve vücut kitle indeksi (BMI) 30 kg/m²'nin altında olmalıdır; çünkü yüksek değerler obezite ile ilişkilidir ve genel anestezi altında seçici hayati olmayan işlemler için olumsuz risk-fayda oranına sahiptir. Önceki karın ameliyatı, liposuction hariç, genellikle bir perforatör Doppler muayenesiyle tanımlanır veya ameliyat sırasında doğrudan görselleştirilirse kontrendikasyon değildir. Bu araştırma prosedürü, zaten uzun ve karmaşık olan gerçek klinik tek taraflı DIEP serbest flep rekonstrüksiyonlarında da kaçınılmalıdır; bu operasyonlar zaten uzun ve karmaşık olan ve ameliyat öncesi ek adımların mantıksız olacağı ve prosedürel riski artıracağı anlamına gelir.

Şekil 1: DIEP flep hasadı ile bariatrik karın dermolipektomi sonrası ameliyat öncesi değerlendirme. (A) Orta hattın her iki tarafındaki paraumbilikal perforatörleri belirlemek ve konturlamak için akustik Doppler ve dermografik kalem kullanılarak yapılan ameliyat öncesi işaretleme. (B) Cerrah, rezeksiya edilecek karın derisi ve deri altı dokunun gevşekliğini gösterir; yatay işaretleme çizgisi boyunca kesiden önce adipokutan pannikülüsü vurgular. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
2. Flap tedarik

Şekil 2: Derin inferior epigastrik perforatör pediküllerin iskeletizasyonu ile abdominal dermolipektomi işleminin intraoperatif görünümü. Görsel, supraumbilikal diseksiyon ve boyuna infrastruktural bölünme öncesi operatif alanı gösterir. İki baskın iki taraflı paraumbilikal derin inferior epigastrik perforatör cerrahi aletlerle ortaya çıkarılır ve vurgulanır. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 3: Supraumbilikal diseksiyondan sonra iki taraflı derin inferior epigastrik perforatörleri gösteren ameliyat dışı görünüm. Perforatörler bağlanmamış ve subfasyal rotası ile uzunluğu hafif çekiş (beyaz oklar) altında daha iyi anlaşılabilir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4: Ameliyat sırasında yapılan görüntü, DIEP flaplarının cilde eliptik bir şekilde konturlandığı ve ligasyondan önce gösterildiği. (A) Deri küreği, dermografik bir kalem (beyaz daire) kullanılarak eliptik bir şekilde ayarlanır ve konturlanır; böylece adipokutan pannikulusun her iki tarafında kapağın medial kenarı boyunca perforatörün yer almasını sağlar. (B) DIEP flap hattı ve perforatörün ameliyat öncesi Doppler haritalamasına (beyaz ok) göre "x" ile işaretlenmiş genişletilmiş görünüm. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Ek Şekil 1: Üst karın kapağında aşağıya doğru çekiş, rezeksiyon yapılacak artık deri miktarını belirlemeye yardımcı olur. Supraumbilikal ve pubik bölgeleri birbirine bağlayan orta hattın uzun u, emilmez bir dikiş ucu rehber olarak kullanılır. Dermografik bir kalem kullanarak, artıklı adipokutan pannikulusun üzerindeki dikiş (beyaz oklar) boyunca rezeksiyon çizgisi çizin. Bu çizgiyi her ön üst iliak omuraya doğru yan tarafa uzatın. DIEP flapları bu işaretli rezeksion hattının altında yer alır. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 5: Pedikül ligasyonu sonrası hasat sırasında derin inferior epigastrik arter perforatör (DIEP) flaplarının intraoperatif görünümü. (A) DIEP flepi, yaklaşık 10 cm × 6 cm ölçülerinde, perforatörün lokalizasyonundan sonra cerrahi bir işaretleyici ile çizilmiştir. (B) Deri kesimi ve kapak toplama işlemi önceden belirlenmiş işaretler boyunca yapılır. İlk kesi, No. 15 bıçağı ile yapılır, ardından yaklaşık 50-60 °C ve 80 W koagülasyon modunda ayarlanmış monopolar elektrokoteriyle diseksiyon yapılır; bu nedenle fazla deri yağ dokusu hastaya bağlı kalır. Doku tamamen ayrıldıktan sonra, steril, tek kullanımlık, pil ile çalışan tek kullanımlık bir koter kalemi (büyük uç, yaklaşık 1.200 °C) kullanılarak ayrılma tamamlanır. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
3. Kapağın hazırlanması

Şekil 6: Araştırma DIEP kapağının hasat sonrası görünümü. (A) Hasat sonrası DIEP flepi, damar pedikuli mikrocerrahi forseps kullanılarak ayrılıp izole edilmiş. Arterial uç birkaç milimetre kesilerek temiz bir kesim elde edilir ve lümen mikro-genişletici pensis ile nazikçe açılır. (B) Baskın perforatör arterini sabitleyen mikrocerrahi pensler, kontrast maddesi enjeksiyonu için lümenin içine 24-G kateter yerleştirilmiş yakın çekim. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 7: DIEP flap pedikülünün kateterizasyonu. (A) Kateter, pedikülün lümenini engellememek için nazikçe bağlanmış 5-0 ipek dikişle sabitlenir. (B) Kateterin şırınga bağlı olmadan konumlandırılmış görünümü, kateter damar lümenine ne kadar yerleştirildiğini gösterir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 8: DIEP flepinin hasat sonrası floroskopisi, vasküler anatomiyi göstermektedir. (A,B) Kontrast maddesi, 24-G kateter aracılığıyla baskın perforatör arterine enjekte edilir; dallanma desenini ve vaskülerleşmiş alanı gösterir ve iki farklı flepte flep canlılığını doğrular. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmaya dahil edilen altı kadın hastadan on bir flap, alındı. Flep cerrahisi ve abdominoplasti konusunda deneyimli iki kıdemli plastik cerrah diseksiyon yaptı. Bir hastada, diseksiyon sorunu nedeniyle flep tek taraflı olarak alındı. Hasat edilen flapların ortalama ağırlığı 198,6 ± 24,4 g (n = 11) ve ortalama boyutları 10 cm × 6 cm idi; bu da bu flapların kullanıldığı koruma çalışması için numune gereksinimlerini karşılıyordu. Pedikül uzunluğu, hafif gerilim altında ölçüldüğünde ortalama 3,85 ± 0,74 cm ve
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
İnsan modelleri, hayvan çalışmalarından klinik uygulamaya bulguları birleştirmeye yardımcı olur; preklinik araştırmaların önemini ve öngörebilirliğiniartırır 16,17,18. Güvenlik ve etik uyumu sağlamak için dikkatlice tasarlanmalı, deneylerin kapsamını ve müdahaleciliğini sıklıklasınırlandıracak şekilde tasarlanmalıdır 17. Toplanan dört flapta ek bir diseksiyona gerek kalmadı ve hiçbir vakada operasyon süre...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Hiç kimse.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1 mL ve 5 mL Luer-Lok şırıngası | Becton Dickinson | https://www.bd.com/en-us/products-and-solutions/products/product-page.309646 | |
| 11.5" Orta ve Küçük Premium Surgiclip II Otomatik Dikiş Damar klipsi apliser | Covidien | Yok | |
| 22– 24 G kap kanülü küt uç | Medtronic Inc | Yok | |
| 5-0 ipek dikiş ve nbsp; | Yok | Herhangi bir uyumlu dikiş | |
| Tek kullanımlık, pil ile çalışan bir tek kullanımlık koter kalemi; | Helpmedical, Avrupa | Yok | 1200 ve derece C, büyük uçlu |
| Adson Pensetleri | MPM | 106-2112A | |
| Bipolar Koagülasyon Pensetleri | Olsen | 20-1320I | |
| Tek Kullanımlık Skalpel #15 & #21 | Sklar | Yok | |
| Eosin | Microm Microtech | U/C0363 | |
| Faraboeuf retraktorları | Medicta Enstrümanları | Yok | |
| İnce iğne koteri | Cormedica | Yok | |
| OEC MiniView Max | GE Healthcare | Yok | Floroskopi sistemi |
| Pensetler Genişleticiler | WPI | 15910 | |
| Hematoksilin | Microm Microtech | U/C0303 | |
| Ioheksol 300 mg I/mL | GE Healthcare Canada Inc. | Yok | |
| Mikro makas | WPI | 504492 | |
| Valleylab Monopolar Diatermi | Medtronic Inc | ||
| İyonsuz iyotlu kontrast madde, Omnipaque 300 mg I/mL | GE Healthcare | Yok | |
| Taşınabilir akustik Doppler, 8 MHz | Parks Tıbbi Elektronik | https://www.parksmed.com/ | |
| Tuzlu çözelti %0,9 | GenDepot | S0600-101 | |
| Standart plastik cerrahi alet seti | Eskülap | Yok | neşter sapı No. 3, Metzenbaum ve Mayo makas makineleri, Adson ve Gillies pensleri, diseksiyon makası makineleri, hemostatlar ve iğne tutucuları dahil. |
| Şaşılık makası | Surtex | 102-4109 | |
| Cerrahi işaretleme kalemi | Kardinal sağlık | 212PR | |
| Dikişler Ethilon 4.0 ve 3.0 | Etikon | 1667G | |
| Doku Pensepsi | MPM | 106-0511 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.