Name: Murin Böbrek Nakli Prosedürü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-10T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: Öğrenin fare böbrek nakli prosedürünü transplantasyon biyolojisi araştırmaları için. Bu yöntem greft fonksiyonunu kreatinin izlemiyle değerlendirerek nakil reddini ve immünolojik olayları incelemeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışmalar GAH için R01 AI36532 NIH tarafından finansman kısmen desteklenmiştir. Biz Dr. Tibor Nadasdy tarafından sağlanan nakli patoloji olağanüstü desteğini kabul etmek ister ve bu araştırma çabası başlatılması merhum Dr. Charles G. Orosz tarafından sağlanan değerli rehberlik ve öngörü.

Donör Organ Harvest (2): <ol><li> 65mg/kg pentobarbital IP kullanarak donör anestezi, anestezi İsofluranın (% 2-3) tarafından yapılmaktadır. </li><li> Donör karın girin ve sağ tarafındaki yanal bağırsak hareket ettirerek sol böbrek maruz sternum pubis için bir orta hat kesi olun. </li><li> 8-0 ipek sütür ile adrenal ve testis damarlarının ligating ve bölünmesi ile sol böbrek izole edin. </li><li> , Renal arter ve ven ile bileşkenin üzerindeki aorta seferber. </li><li> Renal arter ve ven ile kavşak yukarıda ve aşağıda inferior vena kava (IVC) harekete geçirmek. </li><li> Kanamayı en aza indirmek için 8-0 ipek sütür ile renal arter ve ven altına aort Arter. </li><li> Sol üreter, böbrek hilusta, mesane parçalara ayır. </li><li> Mesane kubbesi caudad retraksiyon kullanarak üreterovezikal bileşke Açığa. </li><li> Mesane sol üreterovezikal kavşak, idrar mesane mesane anastomoz ile yeniden inşası için kullanılan içeren Vergi, eliptik küçük bir yama. Sağ üreter, mesane dahil değildir. </li><li> 8-0 ipek sütür ile renal arter ve ven altına IVC Arter. </li><li> , Renal arter ve ven yukarıda aort Arter ve yavaş yavaş 0.2-0.4ml soğuk in situ greft serpmek, infrarenal aorta yoluyla Ringer laktat solüsyonu heparinize. </li><li> 8-0 ipek sütür ile renal arter ve ven yukarıdaki IVC Arter. </li><li> IVC, kavşakta renal ven transect. </li><li> Renal arter altında yaklaşık 2mm, oblik aort bölün. </li><li> Böbrek ve üreter ile en bloc mesane yama bağlı vasküler kaynağı çıkarın. Ringer laktat solüsyonu buz üzerinde saklayın. </li><li> Anestezi altında servikal dislokasyon ile donör fare Euthanize. </li></ol> Alıcı Nakli (2): <ol><li> 65 mg / kg pentobarbital IP ile alıcı anestezisi ve İsofluranın tarafından anestezi (% 2-3) korumak. </li><li> Bir orta hat kesi ıslak bir gazlı bez ile bağırsak kapak ve sol tarafında dikkatlice geri çekin. </li><li> Sağ üreter, renal arter ve ven Arter ve sağ böbrek kaldırmak. </li><li> Dikkatle lomber dal ligasyonundan sonra otörler iki adet 4 mm microvasular kelepçeli infrarenal aorta ve IVC izole ve kros-klemp. </li><li> Aorta tam kalınlığı ile 10-0 naylon dikiş yerleştirin ve tek bir kesim (damarın çapı yaklaşık beşte birinin) eliptik bir aortaotomy yapmak için geri çekme. </li><li> 30 gauge iğne ile IVC piercing ve uygun microscissors kullanarak uzanan uzunlamasına bir venotomi olun. </li><li> Intraluminal kan pıhtıları temizlemek için hem aorta ve IVC heparinize salin ile yıkayınız. </li><li> Buz donör böbrek çıkarın ve farenin sağ kanadını intra-abdominal yerleştirin. Donör böbrek soğuk tuzlu batırılmış gazlı bezle nemli tutulmalıdır. </li><li> Donörlerin aort manşet alıcıların aortaotomy proksimal ve distal apeks iki kalış sütür. </li><li> Donör aort manşet ve alıcıların aortaotomy ön duvar arasında bir uç-yan anastomoz, 2 ~ 3 sürekli 10-0 naylon sütürlerle aort dışında kullanarak olun. </li><li> Alıcının sol kanadını üzerinden donör böbrek greft açın. donör aort manşet ve alıcıların aortaotomy arka duvar arasında önceki prosedürü tekrarlayın </li><li> Donör renal ven ve alıcıların IVC arka duvar arasında bir uç-yan anastomoz, IVC iç 4 ila 5 sürekli 10-0 naylon sütürler kullanarak gerçekleştirin. IVC ve donörlerin renal ven ön duvar ve ardından 4 ~ 5 IVC dışında sürekli dikişlerle kapatılır. </li><li> 20 dakika içinde her iki ven ve arter anastomoz bitmiş olmalıdır. </li><li> Ile greft anastomozu sırasında soğuk tuzlu birkaç kez durulayın. </li><li> Alıcı mesane kubbesi Böl ve koter ile kanamayı durdurmak. </li><li> Kubbenin üzerindeki küçük bir kesim olun. </li><li> Alıcıların mesane kubbe ile donörlerin küçük mesane yama anastomize iki kalış 10-0 naylon sütürler yerleştirin. 8 ~ 10 sürekli dikiş ile anastomoz Her iki taraf sütüre edilir. </li><li> Sürekli 4-0 steril, sentetik emilebilir Vicryl dikiş ile iki kat karın kapatın. </li><li> Aralıklı enjeksiyon IV tarafından ameliyat sırasında alıcı fareler 0.4ml ılık tuzlu su verin. </li></ol> Alıcı Post-operatif Bakım <ol><li> Karın kapattıktan sonra, penisilin (500U/10g) tek bir intramüsküler enjeksiyon (2) uygulanır. </li><li> Buna ek olarak, alıcılar gün 0 ve 1 gün cerrahi sonrası ağrı için 0.05 mg / kg intramusküler buprenorfin verilmektedir. Deney te kadar ameliyatı takiben, transplant alıcıları sulfatrim (100mg/kg) içeren su almakrminated. </li><li> Ameliyat sonrası ilk 24 saat için fareler inkübatör kontrollü bir sıcaklık tutulur. </li><li> Fareler genellikle 1 saat içinde operasyon anestezi kurtarmak ve düzenli olarak yiyecek ve su ad libitum verilmiştir. </li><li> Cilt dikişler ameliyattan sonra 2 hafta kaldırılır. </li></ol> Alıcı Nefrektomi <ol><li> 65 mg / kg pentobarbital IP alıcı 4 ~ 7 gün sonrası böbrek nakli anestezi, anestezi İsofluranın (% 2-3) tarafından yapılmaktadır. </li><li> Karın orta hat kesi ile açın. </li><li> Kapak tuzlu batırılmış gazlı bez ile bağırsak ve dikkatle sağ tarafına geri çekin. </li><li> Sol üreter, böbrek ven ve arter ligasyonundan sonra otörler sol böbrek çıkarın. </li><li> Sürekli 4-0 sentetik emilebilir Vicryl dikiş ile iki kat karın kapatın. </li></ol> Tam Kan Kreatinin Ölçümleri <ol><li> 0.2 cc den az iki haftada bir kan toplama haftalık ya submandibularly İsofluranın anestezi altında ya da retro-orbitally anestezi olmadan yapılır. </li><li> Kantitatif bütün kan kreatinin seviyeleri I-Stat Taşınabilir Klinik Analyzer (Heska Corp, Fort Collins, CO) ile belirlenir. </li><li> Konvansiyonel birimleri (mg / dl) 88.4 geleneksel birimleri çarpılarak mikromol / L SI birimlerine dönüştürülür. </li></ol>

<ol><li>Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+transplants+in+mice.+An+analysis+of+the+immune+status+of+mice+bearing+long-term%2C+H-2+incompatible+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22JExpMed%22%5BJournal%5D)">Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants.</a> JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).</li>
<li>Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+techniques+for+kidney+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved techniques for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 16 (2), 103-109 (1995).</li>
</ol>

Hayvanlar üzerinde yapılan deneyler, Ohio State Üniversitesi IACUC tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak yapıldı.

Biz fareler,&gt;% 90 teknik başarı oranı ile yaklaşık 1200 vaka böbrek nakli gerçekleştirdik. Kalp nakli ile karşılaştırıldığında, böbrek nakli başarı oranı genellikle düşüktür. Ancak, laboratuvar, yüksek bir başarı oranı (% 90) böbrek nakli korumuştur. Başarı için kilit noktaları, hem donör böbrek ve alıcıları reperfüzyon yaralanmaları azaltmak ve prosedür ve ameliyat sonrası boyunca kanama ve tromboz en aza indirmek için. (C) aşağıdaki faktörler önemli olabilir: (a), ameliyat sırasında alıcı kanama mümkün olduğunca di...

<table><tbody><tr><td>i-STAT</td><td>Diğer</td><td>HESKA</td><td>Cat 5101</td><td></td></tr><tr><td>i-STAT Kartuşu</td><td>Diğer</td><td>HESKA</td><td>CAT 5110-CREA</td><td></td></tr><tr><td>Sulfatrim</td><td>Diğer</td><td>Actavis</td><td>R02109</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Diğer</td><td>NOVAPLUS</td><td>CA-0474</td><td></td></tr><tr><td>10-0 Sütur</td><td>Cerrahi</td><td>Sharpoint</td><td>AK0100</td><td></td></tr></tbody></table>

murin böbrek nakli prosedürü

Murine Renal Transplantation Procedure

Farelerde ortotopik Böbrek transplantasyonu teknik olarak oldukça zor bir işlemdir. Farelerde ilk böbrek nakli (1) önce 30 yılı aşkın Russell ve arkadaşları tarafından yapılan ve yıllar sonra Zhang ve ark (2) rafine olmasına rağmen, dünyada kaç kişi bu yordamı hakim olması. Laboratuarımızda 1200 ortotopik böbrek transplantasyon&gt;% 90 hayatta kalma oranı ile başarıyla gerçekleştirdik. Başarı için kilit noktaları, hem usul ve transplantasyon sonrası sırasında reperfüzyon hasarı, kanama ve tromboz, sıkı kontrol ve anastomozlar için 10-0, 11-0 sütür yerine. Alıcının Post-operatif bakım ve tedavi başarı ve değerlendirme nakli son derece önemlidir. Tüm böbrek greft alıcıları hemen penisilin enjeksiyon sonrası sürekli olarak içme suyu nakli ve sulfatrim şeklinde antibiyotik alırsınız. Genel hayvan sağlığı, günlük ve tam kan kreatinin analizler greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir taşınabilir I-STAT makine ile rutin olarak yapılmaktadır değerlendirilir.

Farelerde böbrek transplantasyonu, başarı için dikkatli post-operatif bakım ve tedavi gerektiren bir teknik olarak oldukça zor bir işlemdir.

Murin Böbrek Nakli Prosedürü

Farelerde renal ortotopik transplantasyon, teknik açıdan zorlu bir prosedürdür. Farelerdeki ilk böbrek transplantasyonları Russell tarafından gerçekleştirilmiş olsa da...

Fare böbrek transplantasyonu prosedürü, donör fareden sol böbreğin çıkarılıp buz üzerinde saklandığı donör organ hasadı ile başlar. Donör böbreğe yer açmak için alıcı fareden sağ böbrek çıkarılır. Ardından donör böbrek buzdan çıkarılır ve alıcı fareye nakledilir.Kalan doğal böbrek çıkarılmadan önce farenin dört gün boyunca iyileşmesine izin verilir. Yedi gün sonra, greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir i-STAT taşınabilir klinik analizör kullanılarak kreatinin seviyeleri izlenir. Merhaba, ben Dr. Greg Hadley'nin laboratuvarından ve Ohio State Üniversitesi Transplant Cerrahisi Bölümü'nden Sarah Heimer.Bugün sizlere farelerde renal transplantasyon prosedürünü göstereceğiz. Bugün izleyeceğiniz renal transplantasyon cerrahisi, uzman nörocerrahımız Jing Wing tarafından gerçekleştirilecektir. Transplant reddinin immünolojik olaylarını ve reddin meydana gelmesini önleme stratejilerini incelemek için laboratuvarımızda bu prosedürü kullanınız.Hadi başlayalım. Donör organ hasadına başlamak için, hayvanın tamamen anestezi altında olduğundan emin olmak amacıyla bir ayak parmağı sıkıştırma testi uygulanır. Steril bir alan içerisinde ve sterilize edilmiş aletler kullanarak, anestezi altındak

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Belirli hücrelerin içine hESC Yönetmen farklılaşma, rejeneratif tıp alanında büyük ilgi yarattı. Biz belirlemek için bir özlü, adım-adım...

Teratom Oluşumu İnsan Embriyonik Kök Hücre Kader Haritalama

Izole adacık transplantasyonu tip 1 şeker hastalığı için potansiyel bir tedavi olarak öne sürülmüştür. Burada, fare pancreata adacıkları izole, ve böbrek subkapsüler alan nakli için bir yöntem açıklanmaktadır.

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Burada, reddetme immünolojisini incelemek için bir protokol sunuyoruz. Sunulan cerrahi model, kısa bir ameliyat süresi ve özlü bir teknik rapor etti. Donör-alıcı suş kombinasyonuna bağlı olarak, nakledilen böbrek, interstisyel fibroz ve tübüler atrofi ile tanımlanan akut hücresel rejeksiyon veya kronik allogreft hasarı geliştirebilir.

Fare Böbrek Transplantasyonu: Allogreft Reddi Modelleri

Bu rapor, immün yetmezliği olan fare alıcılarının böbrek kapsülü altına farklı yaştaki donör farelerden murin timi naklinin ayrıntılı bir tanımını sağlar. Bu yaklaşımın amacı, T hücresi gelişimi ve timik seçim olaylarını in vivo olarak modellemektir.

İzolasyon ve Farklı Yaşlı Fare Timik Greft Nakli.

Bu makalenin amacı, arteriyel anastomozun ayrıntılarına özellikle dikkat ederek, bir farede böbrek nakli gerçekleştirmek için gereken adımları tanımlamaktır.

Murin Böbrek nakli Tekniği

Biz transplantasyon için basit ve verimli bir yöntem sağlamak 2 '-deoxyguanosine bir çıplak fare renal kapsül içine e 18.5 timus tedavi. Bu yöntem, hem timik epitelyal hücreler fonksiyon ve T hücrelerinin olgunlaşma çalışmada Yardımcısı olmalıdır.

Çıplak farelerde 2 '-Deoxyguanosine tedavi Murine embriyonik Thymus renal subkapsüler nakli

Bu protokol, modifiye arteriyel anastomoz stratejisine odaklanan fare böbrek transplantasyonunun yeni bir cerrahi tekniğini sunmaktadır. Basit ve daha güvenli bir üreter-mesane anastomoz yöntemini içeren bir vasküler sütür tekniği de sunulmaktadır. Bu modifikasyonlar ameliyat süresini kısaltır ve fare böbrek nakli işleminin başarı oranını artırır.

Farelerde Böbrek Nakli için Modifiye Bir Cerrahi Teknik

Sıçan ortotopik renal transplantasyon modeli, renal allogreft reddinin mekanizmasının araştırılmasına katkıda bulunur. Mevcut model, böbrek implantasyonunun uçtan uca anastomozu ve üreter-mesane anastomozunun uçtan uca "tünel" yöntemini kullanarak kan akımına ve alt vücudun venöz reflüsüne müdahale etmeden alıcıların sağkalımını arttırmaktadır.

Renal Allogreft Rejeksiyonu için Sıçan Ortotopik Böbrek Transplantasyonu Modeli

Bu protokol, güvenli ve iyi tolere edilen fare çift taraflı böbrek lenfadenektomisi için bir hayatta kalma prosedürünü tanımlar.

Sırın İki Taraflı Renal Lenfadenektomisi

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Öğrenin fare böbrek nakli prosedürünü transplantasyon biyolojisi araştırmaları için. Bu yöntem greft fonksiyonunu kreatinin izlemiyle değerlendirerek nakil reddini ve immünolojik olayları incelemeye yardımcı olur.

Murin Böbrek Nakli Prosedürü

Daha fazla video keşfet