10 Temmuz 2009
Farelerde böbrek transplantasyonu, başarı için dikkatli post-operatif bakım ve tedavi gerektiren bir teknik olarak oldukça zor bir işlemdir.
Fare böbrek nakli prosedürü, sol böbreğin donör fareden alındığı ve buz üzerinde saklandığı bir donör organ alımı ile başlar. Donör böbreğe yer açmak için sağ böbrek, alıcı fareden çıkarılır. Donör böbrek daha sonra buzdan çıkarılır ve alıcı fareye nakledilir.
Kalan doğal böbrek çıkarılmadan önce farenin dört gün iyileşmesine izin verilir. Yedi gün sonra, kreatinin seviyeleri, greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir I STAT taşınabilir klinik analizör kullanılarak izlenir. Merhaba, ben Dr.Greg Hadley'in laboratuvarından ve Ohio Eyalet Üniversitesi Organ Nakli Cerrahisi Bölümü'nden Sarah Heimer.
Bugün size farede böbrek nakli için bir prosedür göstereceğiz. Bugün göreceğiniz böbrek nakli ameliyatı, yerleşik uzman beyin cerrahımız Jing Wing tarafından gerçekleştirilecek. Transplant reddinin immünolojik olaylarını ve reddin oluşmasını önleme stratejilerini incelemek için lütfen laboratuvarımızda bu prosedürü kullanın.
Öyleyse başlayalım. Donör organ alımına başlamak için, hayvanın tamamen uyuşturulduğundan emin olmak için bir çekme tutamağı yapılır, steril bir alanda ve sterilize edilmiş aletler kullanılarak çalışılır, anestezi uygulanmış farede sternumdan pubise orta hat insizyonu yapılır ve donör böbrek perfüzyonu gerçekleştirmek için bağırsağı lateral olarak sağ tarafa hareket ettirerek sol böbreği açığa çıkarır. TY, aort ve inferior vena kava etrafında, renal arter ve venin altında ve üstünde dört sekiz oh ipek sütür.
İnfrarenal aort yoluyla soğuk heparinize halkalar laktat çözeltisi ile yerinde yavaşça perfüze edilir. Birkaç bel dalının adrenal ve testis damarlarını sekiz oh ipek sütür ile bağlayarak ve bölerek sol böbreği izole edin. Daha sonra, aort ve inferior vena kava ile sol renal arter arasındaki bileşkeyi mobilize edin ve aort ve inferior vena kava etrafında renal arter ve venin altında ve üstünde dört sekiz oh ipek sütür bağlayın.
Kanamayı en aza indirmek için, aortu önce böbrek damarının altına bağlayın. Daha sonra sol üreteri renal hilustan mesaneye serbest olarak inceleyin. Mesane kubbesinde koda retraksiyonu kullanarak vezikül bileşkesinin üreterini açığa çıkarın.
Sağ üreterden kaçındığınızdan emin olmak, sol üreteral vezikül bileşkesini içeren küçük eliptik mesane yamasını çıkarır. Bu yama, mesane yoluyla mesane anastomozuna idrar rekonstrüksiyonu için kullanılacaktır. Daha sonra aortu renal arter ve venin üzerine bağlayın.
İnfrarenal aort yoluyla soğuk heparinize halkalar laktat çözeltisi ile sal yerinde yavaşça perfüze edildi. Aortu renal arterin yaklaşık iki milimetre altına eğik olarak bölün. Son olarak, blok üzerindeki mesane yamasına bağlı üreter ile böbreği ve vasküler beslemesini çıkarın.
Böbrek, konakçı alıcıya aşılanmaya hazır olana kadar buz üzerinde ringer laktat solüsyonunda saklanmalı ve anestezi altında servikal çıkık ile donör fareye ötenazi yapılmalıdır. Daha önce gösterildiği gibi, alıcı nakli, hayvanın tamamen uyuşturulduğundan emin olmak için bir çimdikleme ile başlatılır. Ameliyata başlamak için orta hatta bir kesi yapın, bağırsağı ıslak gazlı bezle örtün ve dikkatlice sol tarafa geri çekin.
Bu böbrek naklinin başarılı bir şekilde tamamlanması için, donör aort manşeti ile alıcının aortu arasında anastomoz yapılması gerekir. Donör renal ven alıcının inferior vena kavasına ve donör mesane yaması alıcının mesane ligate'ine. Sağ üreter, renal arter ve ven.
Bağladıktan sonra böbreği çıkarın. Lomber dallar, infrarenal aortu ve inferior vena kava'yı iki adet dört milimetrelik mikrovasküler klemp ile dikkatlice izole eder ve çapraz klempler. Tam kalınlıkta bir aort boyunca 10 oh'luk bir naylon sütür yerleştirin ve damarın çapının yaklaşık beşte biri kadar tek bir kesi ile eliptik bir aort otomisi yapmak için geri çekin.
Ardından, inferior vena kava'yı 30 gauge iğne ile delerek uzunlamasına bir ven otomi yapın ve mikro makas kullanarak uygun şekilde uzatın. İntraluminal kan veya pıhtıları temizlemek için hem aortu hem de inferior vena kavayı heparinize salin ile yıkayın. Donör böbreği buzdan çıkarın ve farenin sağ tarafına yerleştirin.
Alıcının aort otomisinin proksimal ve distal apeksine donörün aort manşeti ile iki kalıcı sütür yerleştirin. Aortun dışında iki ila üç sürekli 10 oh naylon sütür kullanarak donör aort manşeti ile alıcının aort otomisinin ön duvarı arasında uçtan uca anastomoz yapın. Donör böbrek greftini alıcının sol tarafına çevirdikten sonra.
Donör aort manşeti ile alıcının aortunun arka duvarı arasındaki önceki prosedürü tekrarlayın. Otomi. Hem ven hem de arter anastomozunun 20 dakika içinde bitirilmesi gerektiğini hatırlamak önemlidir. Greft ayrıca anastomoz sırasında birkaç kez soğuk tuzlu su ile durulanmalıdır.
İnferior vena kavanın iç kısmında dört ila beş sürekli 10 oh naylon sütür kullanarak donör renal ven ile alıcının İnferior vena kavasının arka duvarı arasında uçtan uca anastomoz yapın. İnferior vena kavanın ön duvarını ve donörün böbrek damarını, inferior vena kava dışında dört ila beş sürekli sütürle kapatın. Bir sonraki adım, alıcı mesanenin kubbesini bölmektir.
Koter ile kanamayı durdurun. Tasyon tamamlandıktan sonra, kubbe üzerinde küçük bir kesik yapın, donörün küçük mesane yamasını anastomozun her iki tarafında sekiz ila 10 sürekli dikişle alıcının mesane kubbesi dikişi ile anastomozun her iki tarafına anastomoz yapmak için 10 oh naylondan iki tane dikiş atın. Son olarak, sürekli dört oh steril sentetik emilebilir vicryl sütür ile karnı iki kat halinde kapatın.
Postoperatif bakım, tek bir kas içi penisilin enjeksiyonu uygulanarak başlar. Nakil alıcısına ayrıca ağrı için sıfırıncı gün ve ameliyattan sonraki birinci gün intramüsküler olarak kilogram başına 0.05 miligram buprenorfin verilir ve ayrıca sülfa trim içeren sürekli bir su kaynağı verilir. Ameliyat sonrası ilk 24 saat cimri sıcaklık kontrollü bir inkübatörde tutuldu.
Ameliyattan iki hafta sonra cilt dikişleri alınır. Kalan doğal böbreğin çıkarılması, böbrek grefti fonksiyonundaki düşüşün serum kreatinin ölçümleri ile izlenebilmesi için önemlidir. Tipik olarak donör böbreğin ilk greftlenmesinden dört ila yedi gün sonra gerçekleştirilir ve böbreği donör fareden çıkarırken kullanılan ana adımları içerir.
ISO flor anestezisi, kan örneklerinin toplanabilmesi için konakçı hayvanı sakinleştirmek için kullanılır. Retroorbital kantitatif tam kan kreatinin seviyeleri, greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir okuma olarak kullanılır ve bir I stat taşınabilir klinik analizörü kullanılarak belirlenir. Konvansiyonel birimler, konvansiyonel birimlerin 88.4 ile çarpılmasıyla SI birimlerine dönüştürülür.
Kreatinin konsantrasyonu litre başına mikromol cinsinden ifade edilir. Hayvanlar tipik olarak ameliyattan iki ila üç saat sonra iyileşir ve kalan doğal böbreğin çıkarılmasının ardından normal fare davranışı gösterir. Hayvanın hayatta kalması, genel hayvan sağlığı ve kreatinin ile ilgili günlük muayenelerle değerlendirilebilen renal greft fonksiyonuna bağlıdır.
Referans için taşınabilir bir i-STAT klinik analizörü kullanılarak tam kan ölçümü. Nakil yapılmayan normal bir fare, 20 mikromolar arasında bir kreatinin seviyesine sahiptir. Renal greft disfonksiyonu, fare hastalık belirtileri gösterdiğinde ve kreatinin seviyesi 100 mikromolar seviyeye yakın yükseldiğinde düşünülür.
Size az önce farede böbrek nakli prosedürünü gösterdik. Bu prosedür teknik olarak zor olsa da, laboratuvarımız bunu gerçekleştirmede büyük başarı elde etti. İşte bu kadar.
İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde iyi şanslar.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Farelerde renal transplantasyon, başarı için dikkatli bir ameliyat sonrası bakım ve tedavi gerektiren teknik açıdan zorlu bir prosedürdür. İşlem, donör böbreğin çıkarılmasını ve alıcı fareye nakledilmesini, ardından greft fonksiyonunun izlenmesini içerir.
Güvenilir fare böbrek transplantasyonu modellerinin kurulması, transplant reddi yolaklarını hedefleyen immünoterapötik adaylarının mekanistik risk azaltma süreçlerine olanak tanır. Bu prosedür, greft sağkalımı ve fonksiyonunu değerlendirmek için hastalıkla ilgili bir sistem sağlayarak biyolojiklerin ve küçük moleküllerin preklinik validasyonunu destekler. Taşınabilir analizörler aracılığıyla yapılan kantitatif kreatinin izlemi, erken keşif aşamasındaki karar verme süreçleri için translasyonel biyobelirteç uyumu sağlar.
Bu yöntem, öncü bileşiklerin belirlenmesine ve risk ayarlı ilerlemeye temel teşkil eden ölçülebilir greft fonksiyon metrikleri sağlayarak, hedef doğrulamadan preklinik değerlendirmeye kadar olan keşif sürecine entegre olur.