Murin Böbrek Nakli Prosedürü

Fare böbrek transplantasyonu prosedürü, donör fareden sol böbreğin çıkarılıp buz üzerinde saklandığı donör organ hasadı ile başlar. Donör böbreğe yer açmak için alıcı fareden sağ böbrek çıkarılır. Ardından donör böbrek buzdan çıkarılır ve alıcı fareye nakledilir.

Kalan doğal böbrek çıkarılmadan önce farenin dört gün boyunca iyileşmesine izin verilir. Yedi gün sonra, greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir i-STAT taşınabilir klinik analizör kullanılarak kreatinin seviyeleri izlenir. Merhaba, ben Dr. Greg Hadley'nin laboratuvarından ve Ohio State Üniversitesi Transplant Cerrahisi Bölümü'nden Sarah Heimer.

Bugün sizlere farelerde renal transplantasyon prosedürünü göstereceğiz. Bugün izleyeceğiniz renal transplantasyon cerrahisi, uzman nörocerrahımız Jing Wing tarafından gerçekleştirilecektir. Transplant reddinin immünolojik olaylarını ve reddin meydana gelmesini önleme stratejilerini incelemek için laboratuvarımızda bu prosedürü kullanınız.

Hadi başlayalım. Donör organ hasadına başlamak için, hayvanın tamamen anestezi altında olduğundan emin olmak amacıyla bir ayak parmağı sıkıştırma testi uygulanır. Steril bir alan içerisinde ve sterilize edilmiş aletler kullanarak, anestezi altındaki farede sternumdan pubise kadar midline bir insizyon yapın ve donör böbrek perfüzyonunu gerçekleştirmek için bağırsağı sağ tarafa doğru lateral olarak kaydırarak sol böbreği açığa çıkarın. Renal arter ve venin alt ve üst kısımlarında aort ve vena cava inferior etrafına 4-0 ipek sütürler atın.

İnfrarenal aorta aracılığıyla soğuk heparinli Ringer Laktat çözeltisi ile in situ olarak yavaşça perfüze edilir. Birkaç lomber dal ile birlikte adrenal ve testiküler damarları 8-0 ipek sütürle bağlayıp bölerek sol böbreği izole edin. Ardından, aorta ve vena cava inferior ile sol renal arter ve venin birleşme noktasını mobilize ederek, renal arter ve venin altına ve üstüne aorta ve vena cava inferior çevresine dört adet 8-0 ipek sütür bağlayın.

Kanamayı en aza indirmek için, önce aortayı renal damarın altından ligatlayın. Ardından sol üreteri, renal hilumdan mesaneye kadar serbestçe disseke edin. Mesane kubbesine koda retraksiyonu uygulayarak üreterin vezikül birleşim yerini açığa çıkarın.

Sağ üreteri korumaya dikkat ederek, sol üreteral vezikal bağlantısını içeren küçük eliptik bir mesane yaması eksize edilir. Bu yama, mesaneden mesaneye anastomosis yoluyla üriner rekonstrüksiyon için kullanılacaktır. Ardından, aorta renal arter ve venin üzerinden ligatize edilir.

Raftı, infrarenal aorta üzerinden soğuk heparinli Ringer laktat çözeltisi ile in situ olarak yavaşça perfüze edin. Aortayı, renal arterin yaklaşık iki milimetre altından eğik olarak kesin. Son olarak, böbreği ve vasküler beslenmesini, üreter mesane yamasına tutturulmuş halde blok şeklinde çıkarın.

Böbrek, konak alıcıya nakledilmeye hazır olana kadar buz üzerinde ringer laktat çözeltisi içinde saklanmalı ve donör fare anestezi altında servikal dislokasyonla ötanize edilmelidir. Daha önce gösterildiği gibi, alıcı transplantasyonu, hayvanın tamamen anestezi altında olduğundan emin olmak için yapılan bir çimdikleme ile başlatılır. Cerrahiye başlamak için midline insizyon yapın, bağırsağı ıslak gazlı bezle örtün ve dikkatlice sol tarafa çekin.

Bu böbrek naklini başarıyla tamamlamak için, donör aortik manşet ile alıcının aortu arasında anastomoz gerçekleştirilmelidir. Donör renal ven ile alıcının inferior vena cava'sı ve donör mesane yaması ile alıcının mesanesi bağlanmalıdır. Sağ üreter renal arter ve ven.

Ligasyon sonrası böbreği çıkarın. Lumbar dalları bağladıktan sonra, infrarenal aort ve vena cava inferior'u iki adet dört milimetrelik mikrovasküler klemple dikkatlice izole edin ve çapraz klempleyin. Aortanın tam kalınlığı boyunca 10 0 nylon sütür yerleştirin ve damar çapının yaklaşık beşte biri kadar tek bir kesiyle eliptik bir aortotomi oluşturmak için geri çekin.

Ardından, 30 gauge bir iğne ile inferior vena cava'yı delerek boylamsı bir venotomi gerçekleştirin ve mikro makas kullanarak uygun şekilde genişletin. İntralüminal kanı veya pıhtıları temizlemek için hem aortu hem de inferior vena cava'yı heparinli salin ile irige edin. Donör böbreği buzun içinden çıkarın ve farenin sağ yan bölgesine yerleştirin.

Alıcının aorta otomisinin proksimal ve distal apeksine, donörün aortik manşeti ile birlikte iki adet tutucu dikiş yerleştirin. Aortanın dış kısmında, iki ila üç adet sürekli 10 oh naylon dikiş kullanarak donör aortik manşet ile alıcının aorta otomisinin ön duvarı arasında uçtan yana bir anastomoz gerçekleştirin. Ardından, donör böbrek greftini alıcının sol yan tarafına doğru çevirin.

Önceki prosedürü, donör aort manşeti ile alıcının aortunun arka duvarı arasında tekrarlayın. Otomi. Hem ven hem de arter anastomozunun 20 dakika içinde tamamlanması gerektiğini unutmamak önemlidir. Greft, anastomoz sırasında birkaç kez soğuk serum fizyolojik ile durulanmalıdır.

Donör renal ven ile alıcının vena cava inferiorunun arka duvarı arasında, vena cava inferiorun iç kısmından dört ila beş adet sürekli 10 oh naylon sütür kullanarak uçtan yana anastomoz gerçekleştirin. Vena cava inferiorun ön duvarını ve donörün renal venini, vena cava inferiorun dış kısmından dört ila beş adet sürekli sütür ile kapatın. Bir sonraki adım, alıcı mesanenin kubbesini bölmektir.

Koter ile kanamayı durdurun. İşlem tamamlandığında, kubbe üzerine küçük bir kesi yapın ve donörün küçük mesane yamasını alıcının mesane kubbesi ile anastomoz etmek için iki adet 10-0 naylon tutucu sütür yerleştirin; anastomozun her iki yanını sekiz ila 10 sürekli dikişle sütüre edin. Son olarak, karnı iki kat halinde, sürekli 4-0 steril sentetik emilebilir vicryl sütürlerle kapatın.

Ameliyat sonrası bakım, tek bir intramüsküler penisilin enjeksiyonu uygulanmasıyla başlar. Transplant alıcısına ayrıca ağrı yönetimi için cerrahi sonrası sıfırıncı ve birinci günlerde kilogram başına 0,05 miligram buprenorfine intramüsküler olarak verilir ve sulfa trim içeren sürekli su sağlanır. Ameliyat sonrası ilk 24 saat boyunca fareler sıcaklık kontrollü bir inkübatörde tutulur.

Cilt sütürleri cerrahiden iki hafta sonra alınır. Böbrek grefti fonksiyonundaki düşüşün serum kreatinin ölçümleriyle izlenebilmesi için kalan yerli böbreğin alınması esastır. Bu işlem tipik olarak donör böbreğin ilk greftlenmesinden dört ila yedi gün sonra gerçekleştirilir ve böbreğin donör fareden eksize edilmesi sırasında uygulanan temel adımları içerir.

Kan örnekleri toplayabilmek amacıyla konak hayvanı sedate etmek için ISO florin anestezisi kullanılır. Greft fonksiyonunu değerlendirmek için bir çıktı olarak retroorbital kantitatif tam kan kreatinin seviyeleri kullanılır ve bunlar bir I stat taşınabilir klinik analizör kullanılarak belirlenir. Konvansiyonel birimler, konvansiyonel birimlerin 88,4 ile çarpılmasıyla SI birimlerine dönüştürülür.

Kreatinin konsantrasyonu mikromol/litre cinsinden ifade edilir. Hayvanlar genellikle cerrahi işlemden iki ila üç saat sonra toparlanır ve geri kalan doğal böbreğin alınmasının ardından normal fare davranışları sergilerler. Hayvanın sağkalımı, genel hayvan sağlığı ve kreatinin değerlerinin günlük olarak incelenmesiyle değerlendirilebilen renal greft fonksiyonuna bağlıdır.

Referans için taşınabilir bir i-STAT klinik analizör kullanılarak tam kan ölçümü. Transplant yapılmamış normal bir farede kreatinin seviyesi 20 micromolar civarındadır. Farenin hastalık belirtileri göstermesi ve kreatinin seviyesinin 100 micromolar civarına yükselmesi durumunda renal greft disfonksiyonu olduğu kabul edilir.

Farede böbrek transplantasyonu prosedürünü size göstermiş olduk. Bu prosedür teknik olarak zorlayıcı olsa da, laboratuvarımız bunu gerçekleştirmede büyük başarılar elde etmiştir. İşte hepsi bu kadar.

İzlediğiniz için teşekkür eder, deneylerinizde başarılar dileriz.