Name: Murin Bioluminescent Karaciğer Tümör Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-17T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 23 s
Description: Öğrenin, farelerde ortotopik biyolüminesan karaciğer tümörleri oluşturmak için cerrahi teknik. Canlı görüntüleme ile tümör büyümesini inceleyin ve kanser tedavileri geliştirin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Cork Güney Revir Victoria Üniversitesi Hastanesi Göğüs fonu, İrlanda Kanser Derneği (CRI07TAN) ve Cork Kanser Araştırma Merkezi ile finanse edildi. Lewis akciğer hücre hattı stably lusiferaz ifade eden Dr bir tür hediye Jooss Karin Cell Genesys, Inc, San Francisco, ABD.

Giriş Karaciğer genellikle metastatik hastalığın ilk site ve ileri hastalığı olan hastaların% 30 gibi birçok 40 yayılmış tek bir site olabilir. Ancak metastatik karaciğer tümörleri tedavi etmek için seçenekler rezeksiyonu için uygun hasta bir azınlık azdır ve kemoterapötikler için sadece% 23 oranında önemli bir yanıt. Klinik öncesi araştırma, bu alanda izole karaciğer hastalığı incelemek için uygun bir fare modeli yokluğunda sınırlı kalmıştır. Biz güvenilir üniforma, diffüz karaciğer metastazlarının kurmak için kullanılabilecek bir split-dalak yaklaşımı açıklar. Dalak bu yarım Rezeksiyon dalak tümör büyümesi ve dalak immün koruyucu özellikleri sağlamak için sağlam bir portal sirkülasyon ile dalak, diğer yarısı iade edilir sonuçlarını önler. Tarif modeli gerçekleştirmek için oldukça basit ve tek bir kesi yoluyla hızlı bir şekilde yapılabilir. Tümör hücre hattı bioluminescent özellikleri hayvanların kurban olmadan, tedaviye yanıt doğru kantifikasyon verir. Protokol I. Hücre Hazırlık <ol><li> Lewis akciğer kanseri hücreleri 37% 10 fetal sığır serumu ile takviye Dulbecco'nun Modifiye Essential Orta ° C,% 5 CO 2 trypsinisation alt-konfluent tarafından yetiştirilen ve hasat edilir. </li><li> Hücreler, serum serbest medya hazırlanan bir Nucleocounter (Kemo-METEC, Danimarka) ve 200 ul 1 X 10 6 hücreleri tek bir hücre süspansiyonu kullanılarak sayıldı . </li></ol> II. Fare Hazırlık Not: Tüm işlemler University College Cork etik komite tarafından kabul edildi. Laboratuarımızda fare uyutmak için enjektabl anestezikler kullanır; alternatif olarak, aynı etkiyi elde etmek için inhale anestezikler kullanabilirsiniz. Biz kullanılan fare suşu Harlan Laboratuvarları (Oxfordshire, İngiltere) elde tüysüz MF1 nu / nu gerginlik. Bu deneyde 16-22 g ve yaş 6-8 hafta ağırlığında kadın MF1 nu / nu fareler dahil edildi. C57 ve Balb / c gibi diğer türleri de uygun tümör hücre hatları ile kullanılıyor olabilir. <ol><li> Anestezi 100ul 1.5 mg ketamin ve 300 ug ksilizin intraperitoneal tarafından teslim edildi. </li><li> Anestezi derinliği ayak tutam kullanılarak değerlendirilir. Ayak tutam herhangi bir geri çekilme refleksi olmalıdır. </li><li> Anestezi fare doğru konumda ve bir ısıtma yastığı üzerinde bantlanmış. </li><li> Karın% 10 betadin çözümü ile prepped. </li><li> Karın ve cerrahi alan steril bir moda dökümlü. </li></ol> III. Karın Kesi <ol><li> Deride küçük bir subkostal insizyon yapılır. </li><li> Kesi 2-3 cm kadar uzatılmıştır. </li><li> Karın duvarı kas bölünmüş ve periton boşluğuna girildi. </li></ol> IV. Pozlama ve Dalak Bölümü <ol><li> Dalak, önceden kesilmiş steril gazlı bez üzerine harekete ve hafifçe exteriorized. </li><li> İki 4-0 Vicryl ligatür dalak orta vücudu etrafında bağlıdır. </li><li> Dalak iki hemi-dalak yaratan iki bitişik harfler arasında bölünmüş durumda. </li></ol> Hemi-dalak içine V. Hücre Enjeksiyonu <ol><li> A 27 G 100 mcL bir hücre hacmi bir hemi-dalak içine enjekte etmek için kullanılır. </li><li> Tümör hücreleri karaciğer karaciğer ulaşmak için enjekte edilen hücrelerin çoğunluğu için yeterli zaman sağlamak için on dakika akıtmak için izin verilir. </li></ol> VI. Eksizyon Hemi-dalak, karın kapatılması ve Kurtarma <ol><li> Enjekte hemi-dalak eksize. </li><li> Diğer hemi-dalak, karın boşluğuna geri döndü. </li><li> Kas tabakası çalışan basit bir dikiş kullanarak 4-0 PDS sütür ile kapatılır. </li><li> Karın cilt 4-0 Prolen kesintiye dikiş ile kapatılır. </li><li> Akışkan bolus verilir ve 24 saat cerrahi sonrası post-operatif analjezi, Carpofen (5 mg / kg) IP enjeksiyon yoluyla uygulanır. </li><li> Fare anestezi kurtarmak için izin verilir </li></ol> VII. IVIS Tüm Vücut Bioluminescent Görüntüleme <ol><li> Fare enjektabl anestezi ile uyuşturulduktan. </li><li> Luciferase Yüzey görüntüleme önce periton içi enjeksiyon on dakika verilir </li><li> Fareler sahne üzerine yerleştirilen ve 3 dakika görüntülü IVIS Tüm vücut görüntüleme sistemi kullanılarak </li><li> Karaciğer Lüminesans bir bölge faiz aracını kullanarak ölçülebilir. </li></ol> VIII. Fare karaciğerinde maruz kalma <ol><li> Fare enjektabl anestezi ile uyuşturulduktan. </li><li> Çatı katındaki abdominal kesi in vivo diffüz karaciğer metastazı görselleştirme sağlar. </li><li> Fare servikal dislokasyon ötenazi ve karaciğer daha fazla analiz için eksize edilebilir. </li></ol>_upload/1977/1977fig1.jpg "alt =" Şekil 1 "/&gt; Şekil ciğeri 1. Taze eksize fare tedavi edilmemiş ve tümör infiltre. <img src="/files/ftp_upload/1977/1977fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 IVIS tüm vücut görüntülemesi ile kanıtlandığı gibi karaciğer tümörü büyüme kinetiği.

<ol><li>Kasuya, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+subcutaneous+spleen+reservoir+for+multiple+portal+venous+injections+to+treat+liver+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies.</a> Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).</li>
<li>Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+metastasis+models+of+human+colorectal+carcinoma+established+in+nude+mice+by+orthotopic+transplantation+and+their+biologic+characteristic%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic.</a> World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).</li>
<li>Li, Z. Y., Ni, S., Yang, X., Kiviat, N., Lieber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenograft+models+for+liver+metastasis%3A+Relationship+between+tumor+morphology+and+adenovirus+vector+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Xenograft models for liver metastasis: Relationship between tumor morphology and adenovirus vector transduction.</a> Mol Ther. 9, 650-657 (2004).</li>
<li>Cashman, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+gene+therapy+as+a+neoadjuvant+to+surgical+excision+to+control+metastatic+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Immune gene therapy as a neoadjuvant to surgical excision to control metastatic cancers.</a> Cancer Lett. , (2008).</li>
</ol>

Karaciğer metastazı çalışması için in vivo modeller güvenilir gelişimi yeni tedavi stratejilerinin gelişiyle birlikte artan önemli hale gelmektedir. Yeni stratejilerin doğru çalışması için, hayvan modelleri gerçekleştirmek için nispeten kolay olmalı, önemli sayıda metastaz formu metastatik kaskadın tüm adımları içeren ve sınırlı sayıda metastatik hücrelerinin algılama ve sayma sağlayan bir muhabir sistemine sahip. Split-dalak yaklaşımı olarak tanımlanan tek bir işlemle içerir ve Karsinomatozis ve porta...

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6429</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>V&amp;eacute;toquinol</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>V&amp;eacute;toquinol</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Karprofen</td><td>V&amp;eacute;toquinol</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Videne</td><td>Ecolab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0 sütur</td><td>Ethicon Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PDS 4-0 sütur</td><td>Ethicon Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prolene 4-0 sütur</td><td>Ethicon Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Firefly Lusiferin</td><td>Biosynth International, Inc</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

murin bioluminescent karaciğer tümör modeli

Murine Bioluminescent Hepatic Tumour Model

Bu video, daha sonra bioluminescent görüntüleme ile analiz edilebilir bir fare modelinde karaciğer metastazlarının kurulması açıklanmıştır. Tümör hücreleri, dalak her bir yarısı için pedikül sağlam vasküler bırakarak ikiye dalak ve bölme sağlanması yoluyla, özellikle lokalize bir karaciğer tümörü neden karaciğer yönetilmektedir. Yapısal ateşböceği lusiferaz gen (luc1) ifade Lewis akciğer kanseri hücreleri, daha sonra 10 dakika sonra rezeke bir hemi-dalak inoküle. Diğer yarı dalak sağlam ve sol karın döndü. Karaciğer tümör büyümesini IVIS tüm vücut görüntüleme sistemi kullanılarak biyoparlaklık görüntüleme ile takip edilebilir. IVIS kullanarak tümör büyümesi nicel görüntüleme canlı tümör hücrelerinin hassas kantitatif sağlar. Tümör hücre ölümü ve ilaç tedavisi nedeniyle nekroz bioluminescent sinyali bir azalma erken gösterilir. Bu fare modeli metastatik tümör hücresi hayatta kalma ve büyüme altında yatan mekanizmaları araştıran sağlar ve karaciğer metastazı terapötikler değerlendirilmesi için kullanılabilir.

Bu makalede, farelerde ortotopik bioluminescent karaciğer tümörleri indüksiyon ve canlı tüm vücut lüminesans görüntüleme ile karaciğer sınırlı tümör büyümesini sonraki analiz için bir prosedür açıklanmıştır.

Murin Bioluminescent Karaciğer Tümör Modeli

Bu video, daha sonra biyolüminesans görüntüleme ile analiz edilebilen bir fare modelinde karaciğer metastazlarının oluşturulmasını açıklamaktadır. Tümör hücreleri...

Herkese merhaba. Benim adım Simon Regenron. Buradaki, İrlanda'daki kanser araştırma merkezinde cerrahi asistanlarından biriyim.Bugün size karaciğer metastazları oluşturmaya yönelik bir cerrahi tekniği göstereceğim. Nöron modelinde karaciğer, metastatik yayılımın yaygın bir merkezidir ve kansere bağlı ölümlerin başlıca nedenidir. İleri evre karaciğer hastalığı olan hastaların sadece küçük bir yüzdesi cerrahi rezeksiyon için uygundur.Bu nedenle, bu durumun tedavisi için yeni terapötiklere ihtiyaç duyulmaktadır. Karaciğer metastazlarının birçok hayvan modeli, klinik tabloya benzeyen bir hastalıkla sonuçlanmamaktadır. Bugün size göstereceğim model, klinik olarak ilgili bir modeldir; öğrenilmesi nispeten kolaydır ve oldukça yüksek başarı oranlarına sahiptir.Bu model, dalağın iki yarım dalağa bölünmesini içerir. Yarım dalaklardan biri tümör hücrelerinin inokülasyonu için kullanılır. Bu tümör hücreleri, portal dolaşım aracılığıyla karaciğere taşınır.Diğer hemi dalak, immünolojik özelliklerini korumak amacıyla bozulmadan bırakılır. Kullandığım hücre hattı stabil olarak lusiferaz eksprese etmekte olup, bu durum tümör büyümesinin in vivo biyolüminesans analizine olanak tanır. Bu nedenle, söz

murine-bioluminescent-hepatic-tumour-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Lusiferaz modifiye insan beyin tümörü xenografts atimik farelerde tümör büyümesi ve biyoparlaklık görüntüleme kullanarak tedaviye yanıt daha sonraki izleme ile intrakranyal kurulmuş olabilir. Sağkalım analizi ile birlikte, biyoparlaklık izleme, beyin tümörlerinin tedavisi için düşünülen tedavilerin klinik öncesi test için önemli bir araştırma aracı.

Biyoparlaklık Görüntüleme kullanarak Tümör Büyüme ve Terapi yanıt sonraki Analizi ile İntrakranial Beyin Tümörü Xenografts kurulması

Hipoksi indüklenebilir faktör-1α aktivite Biyoparlaklık görüntüleme, bir meme kanseri beyin metastazı fare modeli intrakranial tümör hipoksi gelişimini izlemek için uygulanır.

Meme Kanseri Beyin metastaz tümör Hipoksi Dynamics in vivo Biyoparlaklık Görüntüleme Fare Modeli

Bu video, lokalize hücre iletimi için Matrigel ve tümör ilerlemesinin non-invaziv izlenmesi için in vivo biyolüminesans görüntüleme kullanan ortotopik bir pankreas kanseri modelini göstermektedir. Ortotopik model hem sinjeneik hem de ksenogreft modelleri için uygundur ve yeni anti-kanser terapötiklerinin primer pankreas tümörü ve metastazı üzerindeki etkisini araştırmak için klinik öncesi çalışmalarda kullanılabilir.

Biyolüminesan Ortotopik Pankreas Kanseri Fare Modeli: Farelerde Kanser İlerlemesini İzlemek İçin İnvaziv Olmayan Bir Teknik

Kaynak:Marina Arantes Radicchi1, Victor Carlos Mello1,Victória Paz Machado1, Márcia Cristina Oliveira da Rocha1, Jaqueline Vaz de Oliveira1, Luana Cristina Camargo1,2, Luís Alexandre Muehlmann1, Ricardo Bentes Azevedo1, Sônia Nair Bao1, João Paulo Figueiró Longo11Biyolojik Bilimler Enstitüsü, Brasília Üniversitesi, 2Temel Psikolojik Süreçler Bölümü, Psikoloji Enstitüsü, Brasília ÜniversitesiBu video, lusiferaz eksprese eden meme adenokarsinom hücrelerini dişi bir fareye enjekte ederek ve zaman...

Dişi Fare Modelinde Meme Tümörü İlerlemesinin Biyolüminesans Görüntülemesi

Kaynak: Clark, A.J., et al. Glioblastoma için İmmün Yetmezliği Olan Bir Hayvan Modelinin Biyolüminesans Görüntülemesi. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, tümör büyümesini non-invaziv olarak ölçmek için lusiferaz eksprese eden tümör hücreleri ve lusiferin kullanarak, immün yetmezliği olan bir fare modelinde glioblastoma ilerlemesini izlemek için biyolüminesans görüntülemeyi göstermektedir.

Glioblastoma için İmmünkompetan Bir Fare Modelinin Biyolüminesans Görüntülemesi

Pankreas kanseri biyoloji Geliştirilmiş anlayış eleştirel pankreas kanseri tedavisi için daha iyi tedavi seçeneklerinin gelişimi için gereklidir. Bu ihtiyacı karşılamak için, bizim kullandığımız kanser ilerlemesi non-invazif izleme izin pankreas kanseri ortotopik modeli...

Pankreas Kanseri İlerleme Bioluminescent Ortotopik Model

GL261 glioma hücreleri, glioblastomun yararlı bir immünokompetan hayvan modelini sağlar. Bu protokolün amaçları, in vivo biyolüminesans görüntüleme kullanarak intrakraniyal tümör büyümesini izlemek için uygun teknikleri göstermek ve glioblastom tedavisi için tümör immünolojisi ve immünoterapötik yaklaşımları incelemek için lusiferaz ile modifiye edilmiş GL261 hücrelerinin faydasını doğrulamaktır.

Glioblastoma&#39;nın için bir Immünkompetan Hayvan Modeli Biyoparlaklık Görüntüleme

Biyoparlaklık görüntüleme tümörleri ve metastazları lokalize için iyi bilinen bir araçtır, ama bu görüntülerin miktar genellikle karmaşık hesaplamaları ve özellikle araçların gerektirir. Biz hiçbir hesaplamalar gerektiren ve tümör yükü ve tedavi yanıtı fare modellerinde izlenecek sağlayan hassas satın alma koşullarına göre, kolay kullanımlı luminoscore yöntem açıklanmaktadır.

Fare Lenfoma Modellerinde İzleme Tümör ilerleme ve Tedavi Etkileri Biyoparlaklık Tabanlı Tümör Niceleme Yöntemi

Metastatik klonların uzak bölgeleri kolonize etme yeteneği, çoğalma kapasitelerine ve/veya önemli bir çoğalma olmaksızın konakçı mikro ortamda hayatta kalma yeteneklerine bağlıdır. Burada, metastatik klonlar tarafından her iki tip karaciğer kolonizasyonunun kantitatif olarak görselleştirilmesine izin veren bir hayvan modeli sunuyoruz.

İleri Hayvan Karaciğer Kolorektal Metastaz Model: Görüntüleme Teknikleri ve Metastatik Klonların Özellikleri

Biz bir fare orthotopic meme kanseri modeli ve radikal mastektomi modeli insan meme kanseri ilerleme taklit etmek için tümör yükünü ölçmek için bioluminescence teknolojisi ile tanıtmak.

Fare Orthotopic metastatik meme kanseri Model oluşturma ve fare radikal mastektomi gerçekleştirme

Akciğer kanseri için yeni tedaviler geliştirmenin en büyük zorluğu, bölgesel hastalık metastatik hastalığa ilerlerken tümör mikro çevresinin modellenmesini içerir. Burada, zaman içinde hastalığın in vivo olarak izlenmesine izin veren ortotopik bir sinjeneik akciğer kanseri modeli oluşturmanın basit bir yöntemini açıklıyoruz.

Akciğer Kanserinin Sinjeneik Ortotopik Fare Modelini Oluşturmak için Minimal İnvaziv Bir Yöntem

Öğrenin, farelerde ortotopik biyolüminesan karaciğer tümörleri oluşturmak için cerrahi teknik. Canlı görüntüleme ile tümör büyümesini inceleyin ve kanser tedavileri geliştirin.

Murin Bioluminescent Karaciğer Tümör Modeli

Daha fazla video keşfet