Drosophila Oyuk Açma ve Tünel Açma Deneyi: Sinek Larvalarında Doku Hipoksisini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

- Embriyo toplama kafesini kurmak için, taze maya macunu ile desteklenmiş üzüm suyu agar plakaları kullanın ve plakaları uygun genotipe sahip erkek ve dişi Drosophila sinekleri içeren kafeslere yerleştirin. Maya ve üzüm suyundan gelen koku çekicidir ve dişiler tarafından yumurtlamayı teşvik eder. Belirli bir süre boyunca yumurtlamaya izin verin. Daha sonra yetişkinleri çıkarın ve ilk instar larvalarını elde etmek için embriyo plakalarını 24 saat boyunca inkübe edin. Daha sonra, üzüm suyu tabağından birkaç ayrı larvayı, plakanın ortasındaki agarda bir deliğin kesildiği ve maya ezmesi ile doldurulduğu, yalnızca agar test plakasına nazikçe aktarın.

Genç larvaların gelişmesi için vücut ağırlığını kazanmak için beslenmeleri gerekir, bu nedenle besin kaynağı olan maya macununda yuva yaparlar. Larvalar geliştikçe, dolaşma aşamasına girerler ve pupa için bir yer aramak için yiyeceklerden uzaklaşırlar. Hipoksiyi değerlendirmek için, substratta larvaların oluşturduğu tünel desenlerini inceleyin. Tünel açma eksikliği veya yetersizliği, oksijen yoksunluğunun bir işaretidir. Örnek protokolde, oyuk açma ve tünel açma testinin nasıl kurulacağını göreceğiz.

- Metin protokolünde açıklandığı gibi yu