Sinek Tırmanma Deneyi: Drosophila melanogaster'de Genel Hareketi Test Etmek İçin Bir Yöntem

-İlk olarak, belirli sayıda yetişkin Drosophila edinin. Tırmanma testi için test odası, birbirine bantlanmış iki şişeden oluşur. Bu şişelerden biri bir çizgi ile işaretlenmelidir.

Tırmanma davranışını bozabilecek karbondioksit anestezisi olmadan, belirli sayıda sineği test odasına aktarın. Sineklerin önceden belirlenmiş bir süre boyunca iyileşmesine izin verin. Haznenin işaretli tarafı aşağıdayken, hazneyi sağlam bir yüzeye yerleştirilmiş bir mouse pad'e sıkıca vurun. Bu, sinekleri odanın dibine zorlar. Tırmanma testi, Drosophila'nın yerçekimine karşı yukarı doğru tırmanma eğiliminden yararlanır, bu davranış negatif jeotaksidir.

Deneme sırasında, sinekler doğrudan güneş ışığına maruz bırakılmamalıdır, çünkü sinekler fototaksi davranışı veya ışık uyaranına tepki olarak hareket gösterebilir. Çizgiye ulaşan veya çizgiyi geçen sineklerin sayısını kaydedin. Daha sonra bu sayıyı test edilen toplam sinek sayısına bölerek yüzde geçiş oranını elde edin. Denemeyi tekrarlamadan önce sineklerin iyileşmesine izin verin. Örnekte, kimyasal mutajenezden sonra Drosophila motor fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılan bir sinek tırmanma testini gözlemleyeceğiz.

-Başlamak için, ikinci kromozoma eşlenmiş ENU mutajenize Drosophila mutantları koleksiyonuna ait hatlardan homozigot sinekleri toplayın. 10 ila 12 günlük sinekleri anestezi olmadan bir test odasına çevirin, her seferinde bir satır ve beş dakika boyunca iyileşmelerine izin verin.

Beş santimetrelik çizgi aşağı bakacak şekilde işaretlenmiş durumdayken, tüm sineklerin teste alttan başlaması için katı bir yüzeye yerleştirilmiş bir fare altlığına hazneye üç kez zorla vurun. 10 saniyelik bir süre boyunca sinek hareketini gözlemleyin. Bu süre içinde beş santimetre çizgisine ulaşan veya geçen sinek sayısını ve test edilen toplam sinek sayısını kaydedin. İkinci denemeye başlamadan önce bir dakika bekleyin. Satır başına en az üç deneme yinelemesini yineleyin.