JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:23 dk. • April 30th, 2023
- Yumurtalıkları canlı Drosophila sineklerinden izole etmek için, anestezi uygulanmış bir dişiyi önceden ısıtılmış böcek diseksiyon ortamı ile doldurulmuş üç diseksiyon kuyusundan birine taşıyarak başlayın. Ortam, doku bütünlüğünün ve canlılığının korunmasına yardımcı olacaktır.
Diseksiyon mikroskobu altında, karnı torakstan ayırın. Ardından, karnı yeni bir kuyuya taşıyın. Yumurtalıkları izole etmek için, karnı arka uçta tutun ve üreme organlarını dikkatlice kazıyın. Son olarak, yumurtalıkları taze bir kuyuya aktarın. Bu adımdan sonra, tüm yumurtalığı kullanabilir veya bileşen yapılarına daha fazla inceleyebilirsiniz.
Her Drosophila yumurtalığı, artan olgunluk seviyelerine sahip bir yumurta odaları zincirinden oluşan birkaç yumurtalıktan oluşur. Yumurtalıkları serbest bırakmak için, yumurtalığı opak arka uçta sıkıştırın ve yumurtalıklar düzgün bir şekilde ayrılana kadar koruyucu kılıfı yumurtalığın etrafından dikkatlice çıkarın.
Örnek protokolde, Drosophila yumurtalıklarının canlı ve sabit doku mikroskobunda kullanımları için diseksiyonunu göstereceğiz.
- Anestezi uygulanmış beş dişi sineği metin protokolüne göre ayırdıktan sonra, diseksiyon mikroskobu altında, göğüs kafesi karından ayırmak için iki çift forseps kullanın. Ardından, karınları dikkatlice yemeğin ikinci kuyusuna aktarın. Karnı arka uçta tutmak için bir çift forseps kullanarak, yumurtalıkları yavaşça dışarı itmek için diğer forseps çiftini kullanın.
Ardından, tek bir yumurtalığı opak arka ucundan tutmak için forsepsleri kullanın ve alay etmek veya sabitlemek için dikkatlice yemeğin üçüncü kuyusuna taşıyın. Arka ucu tutmak için bir çift forseps kullanarak ve bir alay iğnesini arkadan ön uca doğru hafifçe süpürerek koruyucu kılıfı yumurtalıkların etrafından dikkatlice çıkarın.