JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 4:49 dk. • April 30th, 2023
- Temiz, uyuşturulmuş bir larvayı başı yukarıda olacak şekilde bir cam örtü kızağının altına monte ederek başlayın. Ardından, larvaları yuvarlamak ve konumunu ayarlamak için kapak fişini hafifçe iterek ilgi alanını ortaya çıkarın. Larva sinir hücrelerini bulmak için konfokal görüntülemeyi kullanın. Yaralanma bölgesi olarak hedef nöral hücrelerden birinde belirli bir akson tanımlayın.
Daha sonra hedef aksonu, hasara neden olmak için görüntüleme için kullanılandan daha yüksek bir güçte iki fotonlu bir lazere maruz bırakın. İki fotonlu bir lazer, çevredeki dokuya minimum hasar vererek canlı doku içindeki hasara nüfuz etme ve hassas bir şekilde lokalize etme kabiliyeti nedeniyle kullanılır.
Hedef nöronda hasar olduğunda, aksotomi veya aksonun kopması ile sonuçlandığında lazer maruziyetini derhal durdurun. Son olarak, istenen zaman noktalarında dejenerasyonunu ve ardından rejenerasyonunu görmek için yaralı nöronu görüntüleyin.
Örnek protokolde, mikroskopi için bir larva monte edeceğiz, larva duyusal nöronlarına zarar vereceğiz ve nöral rejenerasyonu izleyeceğiz.
- Larvaları uyuşturarak başlayın. Çeker ocakta, 60 milimetrelik bir cam tabağı 15 santimetrelik plastik bir petri kabına yerle
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin