JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:08 dk. • April 30th, 2023
- Parafin gömmek için sinekleri hareketsiz hale getirmek için, anestezi uygulanmış Drosophila'yı bir sinek tasmasının boşluğundan dikkatlice itin, böylece kafaları hala vücudun geri kalanına bağlıyken cihazın üstüne düzgün bir şekilde yerleştirilir. Doku fiksasyonu için, tasmaları Carnoy'un solüsyonuna yerleştirin. Carnoy, etanol, kloroform ve asetik asitten oluşan denatüre edici bir fiksasyon maddesidir.
Numuneyi parafin infiltrasyonu için hazırlamak için, bileziği kademeli etanol konsantrasyonlarından geçirerek dokuyu kurutun. Ardından, bileziği organik bir çözücü olan metil benzoata aktarın. Daha sonra, parafinin erimiş kalmasını sağlamak için ısıtılırken bir metil benozoat ve eritilmiş parafin çözeltisine yerleştirin. Metil benzoatı çıkarmak için yalnızca önceden ısıtılmış parafin ile ayrıntılı bir dizi yıkama adımına geçin.
Ardından, bileziği hızlı bir şekilde bir kalıba yerleştirin ve tamamen kaplamak için erimiş parafin dökün. Parafin sertleştikten sonra, bloğu kalıptan çıkarın ve fazla parafini kesmek için bir tıraş bıçağı kullanın. Parafin bloğunda gömülü kafa sırasını bırakarak bileziği kırın. Örnek protokolde, nörodejeneratif fenotiplerin analizi için gösterilen prosedür
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin