Yetişkin Drosophila Sineklerinin Enjeksiyonu: Bir Bileşik veya Etiket Dağıtım Yöntemi

- Bir iğne çektirmesi kullanarak ince duvarlı cam kılcal damarları çekerek konik enjeksiyon iğneleri hazırlayın. Mikroskop altında bir iğne tutun ve ucu kırın, açıklığın yetişkin sinek kütikülünü gereğinden fazla yaralamadan delecek kadar büyük olduğundan emin olun. İğnenizi steril bir boya ve tuz tampon çözeltisi ile yükleyerek ve ardından bir sahne mikrometresinde bir damla mineral yağ üzerine çıkararak enjeksiyon hacmini ölçün. Dağıtılan hacmi hesaplamak için kullanılabilecek püskürtülen damlacığın çapını ölçmek için mikrometre üzerindeki ölçeği kullanın ve enjektör ayarlarınızı buna göre kalibre edin.

İğneyi enjeksiyon solüsyonunuzla yükleyin ve bir enjeksiyon memesine monte edin. Sineklerinizi CO2 ile uyuşturun ve onları anestezi altında tutacak bir CO2 sinek pedi üzerine yerleştirin. Sinekler deneyiniz için doğru yönde olduğunda, enjeksiyonlara devam edin. Örnek protokolde, in vivo görüntüleme için yetişkin sineklere floresein etiketli parçacıklar enjekte edeceğiz.

- İnce cidarlı cam kılcal damarları iğne çektirme ile çektikten sonra, iğneyi mikroskop altında tutmak için bir mikrometre kullanın ve ucu 100 mikrometre uç çapına kadar kırmak için beş numaralı ince uçlu paslanmaz